Question

【题目】如图是利用羊来生产人抗凝血酶（AT）的基本流程．图中ampR表示氨苄青霉素抗性基因，如tetR表示四环素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ为三种限制酶及酶切位点．据图回答问题：
（1）通过逆转录人工合成的AT基因（填“有”或“无”）内含子，可采用技术来扩增获得的AT基因．
（2）图中将人AT基因插入到质粒前，需要用限制酶同时切割载体和含AT基因的片段，筛选含有重组质粒的大肠杆菌首先需要在含的培养基上进行．
（3）重组质粒上启动子的功能是 ． 过程①可采用的方法将重组质粒导入羊受精卵中，羊的早期胚胎发育至阶段后通过过程②移植到代孕羊体内．
（4）可采用技术从分子水平来检测AT基因是否表达成功．

Answer 1

【答案】
（1）无；PCR（多聚酶链式反应）
（2）HindⅢ和BamHI；氨苄青霉素
（3）驱动目的基因转录；显微注射；桑椹胚或囊胚
（4）抗原一抗体杂交
【解析】解：（1）真核生物基因的编码区包含外显子和内含子，但是翻译的模板mRNA只是由外显子转录而来，因此通过逆转录人工合成的AT基因没有内含子，可采用PCR（多聚酶链式反应）技术来扩增获得的AT基因．（2）由于质粒中只含有两种限制酶切点，因此图中将人AT基因插入到质粒前，需要用HindⅢ和BamHI限制酶同时切割载体和含AT基因的片段；质粒中氨苄青霉素抗性基因作为标记基因，用于检测目的基因是否导入受体细胞，因此筛选含有重组质粒的大肠杆菌首先需要在含氨苄青霉素的培养基上进行．（3）重组质粒上启动子的功能是驱动目的基因转录．过程①可采用显微注射的方法将重组质粒导入羊受精卵中，羊的早期胚胎发育至桑椹胚或囊胚阶段后通过过程②移植到代孕羊体内．（4）可采用抗原一抗体杂交技术从分子水平来检测AT基因是否表达成功． 所以答案是：（1）无 PCR（多聚酶链式反应）（2）HindⅢ和BamH I 氨苄青霉素 （3）驱动目的基因转录 显微注射 桑椹胚或囊胚（4）抗原一抗体杂交
【考点精析】通过灵活运用基因工程的原理及技术，掌握基因工程的原理是利用DNA重组技术即可以解答此题．