[题目]埃博拉病毒(EBO)呈纤维状.EBO衣壳外有包膜.包膜上有5种蛋白棘突.其中GP蛋白最为关键.能被宿主细胞强烈识别.人感染埃博拉病毒后会引起出血热.治疗疾病的有效方法是注射疫苗或者抗体.如图为制备埃博拉病毒的单克隆抗体的过程.据图回答问题:侵入人体时.在细胞中以RNA为模板.在酶的作用下.合成相应的DNA并指导� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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【题目】埃博拉病毒（EBO）呈纤维状，EBO衣壳外有包膜，包膜上有5种蛋白棘突（VP系列蛋白和GP蛋白），其中GP蛋白最为关键，能被宿主细胞强烈识别。人感染埃博拉病毒后会引起出血热。治疗疾病的有效方法是注射疫苗或者抗体。如图为制备埃博拉病毒的单克隆抗体的过程，据图回答问题：

（1）埃博拉病毒（EBO）侵入人体时，在细胞中以RNA为模板，在_____________酶的作用下，合成相应的DNA并指导蛋白质合成，进行增殖。冻干剂型埃博拉病毒疫苗于2017年10月在我国研制成功。以GP蛋白作为疫苗比较安全，其原因是GP蛋白自身没有感染能力，但保留有________________。

（2）B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的过程均体现了细胞膜具有__________________的结构特点。在体外融合时需要诱导，与诱导植物原生质体融合不同的是图中还可用__________________融合。筛选后的所需细胞群应具备的特点是__________________________。

（3）在体外进行动物细胞培养时需要在合成培养基的基础上添加________________等天然成分。同时为了维持培养液的PH值，需要提供的气体环境是______________。

（4）获得的单克隆抗体最终可以从________________提取。“生物导弹”中，抗体的靶向作用是利用了其具有________________________的特点。

【答案】逆转录抗原性一定的流动性灭活的病毒既能无限增殖又能产生专一抗体血清 95%空气和5%的二氧化碳小鼠腹水或培养液特异性

【解析】

要制备埃博拉病毒的单克隆抗体，应该用埃博拉病毒对小鼠进行免疫，然后提取相应的浆细胞与骨髓瘤细胞进行融合，经过筛选获得杂交瘤细胞，再经过专一抗体检测获得既能无限增殖又能产生专一抗体的杂交瘤细胞。

（1）埃博拉病毒（EBO）侵入人体时，在细胞中以RNA为模板，在逆转录酶的作用下，合成相应的DNA并指导蛋白质合成，进行增殖。GP蛋白作为疫苗比较安全，是因为GP蛋白自身没有感染能力，但保留有抗原性，可以刺激机体产生特异性免疫反应。

（2）B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的过程均体现了细胞膜具有一定的流动性。在体外融合时需要诱导，动物细胞融合可以用电激法、聚乙二醇处理、灭活的病毒处理；植物原生质体融合可以用电激法、聚乙二醇处理，不能用灭活的病毒处理，故与诱导植物原生质体融合不同的是图中还可用灭活的病毒融合。筛选后的所需细胞群即杂交瘤细胞既能无限增殖又能产生专一抗体。

（3）在体外进行动物细胞培养时需要在合成培养基的基础上添加血清血浆等天然成分。同时要提供相应的气体环境即95%空气和5%的二氧化碳，其中氧气用于细胞代谢，二氧化碳可以维持培养液的pH值。

（4）杂交瘤细胞可以在培养液中培养，也可以在小鼠的腹腔中培养，故可以从培养液或腹水中提取单克隆抗体。“生物导弹”可以借助单克隆抗体的导向作用，能将药物定向带到癌细胞所在位置，抗体的靶向作用是利用了其特异性。

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(1)片段D为目的基因中的某一片段，则下列酶能形成或断裂图中②所示化学键的有_________(多选填字母)。

a、限制性核酸内切酶 b、DNA连接酶 c、Taq酶 d、解旋酶 e、DNA水解酶

(2)若想获得大量的目的基因，可采用________法进行扩增，含目的基因的DNA片段共经过______次循环后刚好能形成等长的目的基因片段，复制n次需要提供特异性引物对______对。

(3)图中作为目的基因运载体最理想的质粒是________(填“A”“B”或“C”)，请据图分析，其他两种质粒一般不能作为运载体的理由分别是________________________________

(4)用EcoR Ⅰ全酶切目的基因和质粒B形成的重组质粒，并进行电泳观察，可出现长度分别为1.1 kb和______kb的两个片段，或者长度分别为_________的两个片段(重组质粒上目的基因的插入位点与EcoR I的识别位点之间的碱基对忽略不计)。

(5)将分别用限制酶Pvu Ⅰ切开的质粒B溶液与目的基因溶液混合，加入DNA连接酶后，进行大肠杆菌受体细胞导入操作，则受体细胞的类型（对抗生素表现出抗性R或敏感性S，蓝白代表菌落颜色）包含________(多选填字母)。

A．ApR、蓝色　　　B．ApR、白色 C．ApS、蓝色 D．ApS、白色

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（1）科学家将目的基因导入黄花蒿愈伤组织细胞的常用方法是_____________________。

（2）图中结构P、T是基因成功转录的保证，其中结构P位于基因的首端，其作用是__________________________。为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，并将含有目的基因的细胞筛选出来，图中还缺少的结构是_________________________。构建重组DNA的目的是_________________________________________________。

（3）要检测目的基因是否插入到冠瘿组织细胞的染色体DNA上，可采用_______________技术。该技术的原理是____________________________。

（4）与愈伤组织相比，冠瘿组织的生长速度更快，原因可能是________________________。

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