Question

【题目】有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境，研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解，分离能降解苯磺隆菌株的实验过程如下图所示。请回答问题：

(1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、________、________四类，该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是_________________________________。

(2)纯化菌株时，通常使用的划线工具是________。在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是____________________________________________________。

(3)若要检测土样中的细菌含量，应采用__________法。在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养了一段时间，这样做的目的是____________________________________。

然后，将1 mL土壤溶液稀释100倍，在3个平板上分别接入0.1 mL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升土壤溶液中的活菌数为________个。

Answer 1

【答案】（1）氮源 无机盐 只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长和繁殖

（2）接种环 将聚集的菌体逐步减少以便获得单个菌落

（3）稀释涂布平板 检测培养基平板灭菌是否合格 3.8×107

【解析】试题分析：微生物的营养物质主要有碳源、氮源、水和无机盐等．筛选目的微生物必须使用选择培养基．从土壤中分离微生物的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株常用的接种方法主要有稀释涂布平板法和平板划线法．

解：（1）微生物生长所需要的主要营养物质包括：碳源、氮源、水和无机盐．使用选择培养基是因为选择培养基只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长和繁殖，同时又能抑制或阻止其他微生物的生长的培养基．（2）平板划线法接种时常使用接种环划线．在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线．这样做的目的是将聚集的菌体逐步减少以便获得单个菌落．

（3）兴奋题表平板法常常用来进行微生物的分离和计数．为检验培养基平板灭菌是否合格，常常需要在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养了一段时间，观察有无菌落形成，若没有菌落形成则表明培养基灭菌合格，否则则不合格．根据题意，每升土壤溶液中的活菌数为：（39+38+37）÷3×100÷0.1×1000=3.8×107个．

故答案为：

（1）氮源 无机盐 只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长和繁殖

（2）接种环 将聚集的菌体逐步减少以便获得单个菌落

（3）稀释涂布平板 检测培养基平板灭菌是否合格 3.8×107