科目：高中生物 来源：上海市长宁区2012届高三上学期期末质量抽测生物试题 题型：071
回答有关生物工程的问题。
小鼠是实验室常用的实验动物，如：利用小鼠制备抗X病毒单克隆抗体、利用小鼠进行DNA重组研究中导致了“基因敲除”技术的出现。
用小鼠制备抗X病毒单克隆抗体。
1．将小鼠等分为两组，甲组定期间隔注射适量的含X病毒的溶液，其目的是_________；乙组注射_________。
2．一段时间后，取甲组小鼠脾脏中的相应细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，细胞融合的结构特点是_________。融合形成的杂交瘤细胞特点是_________。
3．为了保存有价值的杂交瘤细胞系，通常用超低温将其冻存，请分析其原_________。
用小鼠进行DNA重组研究中形成的“基因敲除”技术，能“敲除”DNA分子上的特定基因。该技术的主要过程如下：
第一步：分离小鼠胚胎干细胞，这些细胞中含有需要改造的基因，称“靶基因”。
第二步：获取与“靶基因”同源的DNA片断，利用特定技术在该DNA片段上插入neoR基因（新霉素抗性基因）成为突变DNA（如下图），使该片段上的靶基因失活。
第三步：将插入neoR基因（新霉素抗性基因）的靶基因转移入胚胎干细胞，再通过同源互换，用失活靶基因取代两个正常靶基因中的一个，完成对胚胎干细胞的基因改造。
第四步：将第三步处理后的胚胎干细胞，转移到特定培养基中筛选培养。
其基本原理如下图所示：
4．第二步中neoR基因插入靶基因使用的工具酶是_________。neoR基因不仅能使靶基因失活，还是_________；“靶基因失活”的含义是_________。
5．从研究者成功获得如上图所示的“敲除”一个靶基因的胚胎干细胞，到将该细胞培育成“基因敲除”小鼠，运用到的生物技术有_________、_________等。
6．科学家可以通过“基因敲除”来研究基因的功能，4题中获得的基因敲除小鼠，能否直接用来研究基因功能并说明原因_________。
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科目：高中生物 来源： 题型：
35.（7分）棉铃虫是一种危害棉花的害虫。我国科学工作者发现一种生活在棉铃虫消化道内的苏云金杆菌能分泌一种毒蛋白使棉铃虫致死，而这种毒蛋白对人畜无害。通过基因工程方法，科学家采用花粉管通道法将毒蛋白基因转入棉花植株并成功表达，棉铃虫吃了这种转基因棉花的植株后就会死亡。花粉管通道法是指：利用植物花粉萌发时形成的花粉管通道将毒蛋白基因送入胚囊，进而导入尚不具备细胞壁的合子或早期胚细胞，最终形成含有目的基因的种胚。此种方法的优点是操作简便，省去了组培的复杂过程。
（1）利用花粉管通道法将毒蛋白基因导入棉花细胞，此过程是基因操作的基本步骤中的第三步，即 。构建基因表达载体时要把目的基因整合到Ti质粒的T-DNA上，其原因是 。
（2）基因工程的工具酶可以将目的基因切下并连接到运载体上。限制酶可以识别特定的DNA序列，并切断 键。下列所示的黏性末端是由 种限制酶作用产生的。
（3）用标记的特异性抗体可以直接检测毒蛋白，这种检测方法称为 。
也可在宏观性状水平检测该目的基因是否表达，方法是 。已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞 。
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