Question

大肠杆菌与人类的生产生活密切相关。据图表回答下列有关问题：

(1)科研人员用放射线处理某大肠杆菌获得两个突变株A和B，然后对A和B进行实验，结果如上表。突变株A不能在一般培养基上生长的直接原因是____________。将突变株A和B混合在一起接种于一般培养基中，却能正常生长的原因最可能是_____________。
(2)上图是利用lacZ基因的插入失活筛选重组质粒示意图。大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列位于该质粒的lacZ基因中。若lacZ基因完整，便可表达出β-半乳糖甘酶，并能将培养基中含有的IPTG和x-gal水解成蓝色，形成蓝色菌落；若lacZ基因中插入了外源基因，带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达β-半乳糖苷酶，将形成白色菌落；pUC118还携带了氨苄青霉索抗性基因。据此可知，作为受体的大肠杆菌应______，以便筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌。图中获取人体基因时所用到的酶是_______试管I中必须加入的酶是___________，将利用氯化钙溶液处理(增加其细胞壁的通透性)过的受体大肠杆菌置于试管Ⅱ中，并加入在试管I中制备好的人体基因。
(3)图中的选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外，还应加入__________、_________等物质，用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌。
(4)将上述处理后的大肠杆菌置于图中选择培养基上培养，以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒，请预测菌落的颜色，并分析结果：
①．_________________________________；
②．_________________________________。

Answer 1

(1)突变株A中缺乏合成营养物质甲所需要的酶      B可以提供A生长所需要的营养物质甲，A可以提供B生长所需要的营养物质乙
(2)不含氨苄青霉素抗性基因(或对氨苄青霉素敏感)     限制酶    DNA连接酶
(3)IPTG和X-gal      氨苄青霉素
(4)①．如果长出蓝色菌落，说明载体pUC118质粒已转入受体菌，但目的基因没有接入载体(或说明重组质粒没有导人受体大肠杆菌)      ②．如果长出白色菌落，说明重组质粒已导入受体大肠杆菌