(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用限制酶为______，酶切后的载体和目的基因片段通过________酶作用后，获得重组质粒。

(2)若BclⅠ酶切的DNA末端与HindⅢ酶切的DNA末端可直接被DNA连接酶连接，原因是_______，这两种酶_____________(填“都能” “都不能”或“只有一种能”)切开连接的部位，原因是________________________。

(3)若用Sau3AⅠ切割图甲质粒最多可能获得______种大小不同的DNA片段。
(4)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加________平板上长出的菌落，常用PCR鉴定，所用的引物组成为图乙中的____________________________________。

（1）连接Leu和Ala的化学键称为____________，这样的化学键在神经肽Y中至少有________个。

（2）组成神经肽Y的11种氨基酸中，Glu占全部氨基酸的1/9，其他氨基酸分子中仅有一个羧基，则神经肽Y含有的游离羧基有____________个。

（3）组成鱼和人的神经肽Y的氨基酸种类和数量相同，但两者的结构存在一定的差别，那么造成这种差别的原因可能是____________________________________________________________。

（4）从鱼体内提纯神经肽Y并喂养小鼠后，小鼠的摄食行为和血压没有发生变化，原因是________________________________________________________________________

(1)自然界中①环节需要的微生物大多分布在_________的环境中。②中获得的酶是__________酶。

(2)若从土壤中分离出上述微生物，应以_________为唯一碳源的培养基进行培养，并加入_____________形成红色复合物进行筛选，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的_______。

(3)接种后一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示，推测接种时可能的操作失误是___。向试管内分装含琼脂的培养基时，若试管口黏附有培养基，需要用酒精棉球擦净的原因是_。

(4)生产中可以满足④环节的常见菌种是_________。玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可为该微生物的生长提供______。

（1）两图中 A 代表的元素是________。(用元素符号填写)

（2）Ⅰ在小麦种子中主要指________。Ⅳ与图 2 中________表示同一物质。

（3）大分子物质Ⅰ～Ⅴ中，具有物种特异性的是________，Ⅳ的结构具有多样性，其根本上是由_____(填图中序号)决定的。

（4）鉴别细胞中Ⅱ、Ⅲ的分布，可用紫色的洋葱鳞片叶________ (填内或外) 表皮细胞，使用的试剂是________，在低倍显微镜下观察时，应选择染色均匀、色泽____(填深 或浅)的区域。Ⅱ染色后颜色呈现________色。本实验需用盐酸处理细胞，则盐酸对结构1和结构2的作用是____。

（1）构成红细胞膜的基本支架是_______________。膜上有多种蛋白质，其中 B 蛋白与多糖结合，主要与细胞膜的______________功能有关。A 和 G 蛋白均与跨膜运输有关，G 主要功能是利用红细胞____呼吸产生的 ATP 供能, 通过____________方式排出 Na+吸收 K+，从而维持红细胞内高 K+低 Na+的离子浓度梯度。

（2）在制备细胞膜时，将红细胞置于________中，使细胞膜破裂释放出内容物。由表中结果推测，对维持红细胞影的形状起重要作用的蛋白质包括__________。

（3）研究发现，红细胞膜上胆固醇含量与动脉粥样硬化（As）斑块的形成密切相关。成熟红细胞不具有合成脂质的___________（填细胞器），其细胞膜上的脂类物质可来自血浆。当血浆中胆固醇浓度升高时，会导致更多的胆固醇插入到红细胞膜上，细胞膜________性降低，变得刚硬易破，红细胞破裂导致胆固醇沉积，加速了 As 斑块的生长。

(1)毛霉的生长需要豆腐提供水、无机盐、____和____四大类基本营养物质。此外，还需要一定的温度、湿度等环境条件。

(2)民间制作腐乳时_____(填“需要”或“不需要”)灭菌，发酵好的豆腐上布满了菌落，这些菌落________(填“属于”或“不属于”)同一物种。

(3)流程中扩大培养时使用的培养基与毛霉菌种分离时使用的培养基最大的区别是后者培养基中加入了__________。

(4)当豆腐上长出毛霉后，对豆腐要进行___________。腐乳制作的后期要加入卤汤，其中酒的浓度要控制在12%左右，原因是酒的浓度过高，则______；酒的浓度过低，则不足以_______，可能导致豆腐腐败。

（1）进行①过程的目的是 ，②过程所使用的接种方法是 法。

（2）从用途上来说，Ⅰ号培养基属于 培养基，配制时仅以 作为唯一碳源；从物理状态上来说，Ⅱ号培养基属于固体培养基，配制时应加入 作为凝固剂。

（3）Ⅰ、Ⅱ号培养基配制和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是 。一般对配制的培养基采用 法灭菌。

（4）培养一段时间后，应从Ⅰ号培养基上挑出 的菌落，接种到Ⅱ号培养基上。

（1）制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜，原因是新鲜蔬菜中 。

（2）制作泡菜所利用的菌种是 ，与酿造果酒所需菌种相比较，该菌种细胞结构上的主要特点是 。

（3）配制的盐水需煮沸，其作用是 和 。

（4）测定亚硝酸盐含量的原理是亚硝酸盐与 发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成 色染料。将显色反应后的样品与已知浓度的标准显色液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。

（5）提取亚硝酸盐的过程中使用的氢氧化铝乳液的作用是 。

A　　　 　　　B　　 　 　C　　　　 　　D

请回答：

（1）容器A中放置的一般是幼龄动物的器官或组织，原因是其细胞_________________，易于培养。培养时先要剪碎，然后用____________分散细胞，制成B瓶中的细胞悬液。将细胞悬液转入C瓶中进行的初次培养称为___________。

（2）细胞正常培养了一段时间后，发现细胞绝大部分死亡，只有极少数细胞存活，这是因为存活的细胞发生了________，可无限增殖。目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为________代以内，以保持细胞正常的二倍体核型。

（3）C、D瓶中的培养液为保证无菌、无毒的环境，需要添加一定量的________。培养过程中还需要提供O2和CO2等气体环境，CO2的作用主要是_______________。

（4）动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。下图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。

据图可知，培养________细胞一定需要添加血清。

(1)酵母菌细胞与菠菜叶肉细胞相比，在结构上最主要的区别是无__________。

(2)甲图中能发生碱基互补配对的细胞器有_________，能产生CO2的场所是________。(填序号)

(3)在无氧环境中，酵母菌也会逆浓度梯度吸收葡萄糖，为此过程提供载体蛋白和能量的细胞结构分别是[　　]_________和[　　]_________。

(4)⑧彻底水解可得到的物质主要是______________。

(5)丙图中均代表细胞的某种结构，它们依次是_________、_________和_________；代表某种物质，它是____________。分泌蛋白从合成到排出细胞的过程，体现了生物膜结构具有____________的特点。