下图是利用工程菌生产人答案解析

下图是利用工程菌(大肠杆菌)生产人生长激素的实验流程。所用的pBR322质粒含有限制酶pstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ的切点各一个，且三种酶切割形成的末端各不相同，而Ampr表示青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因。请回答以下相关问题：

(1)过程①所用到的组织细胞是________________，过程④所用的酶是________。⑤过程常用________溶液处理大肠杆菌。
(2)如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ对图中质粒进行切割，用一种酶、两种酶和三种酶分别切割时形成的DNA片段种类与用一种酶和两种酶分别切割时形成的DNA片段种类________(填“相同”或“不同”)。
(3)如果只用限制酶PstⅠ切割目的基因和质粒，完成过程④、⑤后(受体大肠杆菌不含Ampr、Tetr质粒)，将三角瓶内的大肠杆菌先接种到甲培养基上，形成菌落后用无菌牙签挑取培养基甲上的单个菌落，分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如图乙、丙所示。接种到甲培养基上的目的是筛选________________的大肠杆菌；接种到培养基乙上的大肠杆菌菌落，能存活的大肠杆菌体内导入的是______________________的质粒。含有目的基因的大肠杆菌在培养基乙和丙上的生存情况是____________________。
(4)将大肠杆菌培养在含青霉素、四环素培养基上的过程，属于基因工程基本操作中的__________________________步骤。

下图是利用工程菌(大肠杆菌)生产人生长激素的实验流程。所用的pBR322质粒含有限制酶pstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ的切点各一个，且三种酶切割形成的末端各不相同，而Ampr表示青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因。请回答以下相关问题：

(1)过程①所用到的组织细胞是________________，过程④所用的酶是________。⑤过程常用________溶液处理大肠杆菌。

(2)如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ对图中质粒进行切割，用一种酶、两种酶和三种酶分别切割时形成的DNA片段种类与用一种酶和两种酶分别切割时形成的DNA片段种类________(填“相同”或“不同”)。

(3)如果只用限制酶PstⅠ切割目的基因和质粒，完成过程④、⑤后(受体大肠杆菌不含Ampr、Tetr质粒)，将三角瓶内的大肠杆菌先接种到甲培养基上，形成菌落后用无菌牙签挑取培养基甲上的单个菌落，分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如图乙、丙所示。接种到甲培养基上的目的是筛选________________的大肠杆菌；接种到培养基乙上的大肠杆菌菌落，能存活的大肠杆菌体内导入的是______________________的质粒。含有目的基因的大肠杆菌在培养基乙和丙上的生存情况是____________________。

(4)将大肠杆菌培养在含青霉素、四环素培养基上的过程，属于基因工程基本操作中的__________________________步骤。

 

20．如图是利用工程菌（大肠杆菌）生产人生长激素的实验流程．所用的pBR322质粒含有限制酶pstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ的切点各一个，Amp^r表示青霉素抗性基因，Tet^r表示四环素抗性基因．请回答以下相关问题：

（1）过程①所用到的组织细胞是人垂体组织细胞，①过程不能利用人的皮肤细胞，其原因是基因的选择性表达（或皮肤细胞不能合成生长激素的mRNA）．获得人的生长激素基因，一般可采用PCR技术进行扩增，此基因在基因工程中称为目的基因．
（2）如果从限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ中任选两种酶对质粒进行切割，均会将质粒切成两段，则切割形成的DNA片段共有6种，其中含有完整四环素抗性基因的DNA片段占$\frac{1}{6}$．
（3）如果只用限制酶PstI切割目的基因和质粒，完成过程④、⑤后（受体大肠杆菌不含Ampr、Tetr质粒），将三角瓶内的大肠杆菌先接种到甲培养基上，形成菌落后用无菌牙签挑取培养基甲上的单个菌落，分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如图乙、丙所示．接种到甲培养基上的目的是筛选含含四环素抗性基因的大肠杆菌；接种到培养基乙上的大肠杆菌菌落，能存活的大肠杆菌在培养基乙和丙上的生存情况是在丙中能存活，在乙中不能存活．
（4）也可将基因表达载体导入胚胎干细胞，形成早期胚胎后，移植入动物体内获得转基因小动物，所用的胚胎干细胞可以从早期胚胎或原始性腺（原始生殖腺）中分离出来．将该细胞培养在添加了抑制因子的培养液中，是为了能够维持其不分化的状态，以保持干细胞的全能性．

9．如图是利用工程菌（大肠杆菌）生产人生长激素（由人垂体细胞产生的一种蛋白质类激素）的实验流程．所用的 pBR322 质粒含有限制酶 pstⅠ、EcoRⅠ和 HindⅢ的切点各一个，且三种酶切割形成的黏性末端各不相同，而 Ampr 表示青霉素抗性基因，Tetr 表示四环素抗性基因．请据图回答以下相关问题：

（1）人生长激素基因在经③处理之前需经过 PCR 扩增，扩增前需要人工合成2种引物备用，扩增时应在 PCR 扩增仪中加入热稳定DNA聚合酶用以催化互补链的合成．
（2）若用限制酶 PstⅠ切割，完成过程④、⑤后，将三角瓶内的大肠杆菌先接种到甲培养基上，再将甲培养基上的单个大肠杆菌接种到丙培养基上，待形成12个菌落后，将相应菌落的一部分转接到乙培养基的相同位置上．一段时间后，菌落的生长状况如图乙、丙所示．将三角瓶内的大肠杆菌接种 到甲培养基上的目的是筛选含含四环素抗性基因基因的大肠杆菌；接种到培养基乙上能存活的是导入含普通质粒的大肠杆菌．生产人生长激素的工程菌应从丙培养基的菌落中选取，选取的依据是在丙中能存活，在乙中不能存活．

12．如图是利用工程菌（大肠杆菌）生产人生长激素（由人垂体细胞产生的一种蛋白质类激素）的实验流程．所用的pBR322质粒含有限制酶pasⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ的切点各一个，且三种酶切割形成的黏性末端各不相同，而Amp^r表示青霉素抗性基因，Tet^r表示四环素抗性基因．请据图回答以下相关问题：

（1）过程①所用细胞是人垂体细胞，过程②所用的原料和酶分别是（四种）脱氧核苷酸、逆转录（反转录）酶．
（2）人生长激素基因在经③处理之前需经过PCR扩增，扩增前需要人工合成2种引物备用，扩增时应在PCR扩增仪中加入热稳定DNA聚合酶用以催化互补链的合成．
（3）若人生长激素基因两端具有限制酶pstⅠ识别序列，切割人生长激素基因和pBR322质粒时只用限制酶pstⅠ的目的是确保产生相同的黏性末端，切割时断开的键是磷酸二酯键．
（4）过程④所用的酶是DNA连接酶；过程⑤应选择对青霉素和四环素敏感型的大肠杆菌作为受体细胞，为提高转化率，首先用Ca²⁺处理大肠杆菌使其成为感受态细胞．
（5）若用限制酶PstⅠ切割，完成过程④、⑤后，将三角瓶内的大肠杆菌先接种到甲培养基上，再将甲培养基上的单个大肠杆菌接种到丙培养基上，待形成12个菌落后，将相应菌落的一部分转接到乙培养基的相同位置上．一段时间后，菌落的生长状况如图乙、丙所示．将三角瓶内的大肠杆菌接种到甲培养基上的目的是筛选含四环素抗性基因的大肠杆菌；接种到培养基乙上能存活的是导入含完整的pBR322质粒或含有Amp^r、Tet^r的质粒的大肠杆菌．生产人生长激素的工程菌应从丙培养基的菌落中选取，选取的依据是在丙中能存活，在乙中不能存活．

下图是利用奶牛乳汁生产人的血清白蛋白的图解,根据下图回答：

（1）被①处理后的分散细胞进行培养，通常要在培养液中添加一定量的        ，此外应定期更换培养液，以便保证被培养的细胞处于无菌无毒的环境中进行培养。
（2）在形成图中③的过程中,获取②的途径主要有从基因文库中获取、        、人工合成。
（3）图中①一般经                   处理可以得到③,从③到④的过程中涉及到的生物技术有             和             。
（4）有人对这种牛奶不敢食用，人们对这种转基因食品的担心表现在担心出现      效应,担心出现新的         ，担心营养成分改变。
（5）人的血清白蛋白的生产，说明该工程突破了自然界物种之间的           。

下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。

（1）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？     。
原因是                                                    。
（2）过程②称为                   。
（3）为使过程⑧更易进行，可用      处理D。
（4）下图为上图中质粒B的简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，amp^R为青霉素抗性基因，tct^R为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。

①将上述连接产物导入无任何抗药性的大肠杆菌细胞中然后接种到含青霉素的培养基中，能生长的大肠杆菌所含有的连接产物是                         。（2分，）
②在上述实验中，为了防止目的基因和质粒在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是                 。
（5）若要使A在体外通过③④⑤过程扩增，那么在此过程中所使用的酶是             。（2分）除酶外还需要加入引物，其作用是                                 。（2分）

下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。

（1）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？     。

原因是                                                    。

（2）过程②称为                   。

（3）为使过程⑧更易进行，可用      处理D。

（4）下图为上图中质粒B的简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，amp^R为青霉素抗性基因，tct^R为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。

①将上述连接产物导入无任何抗药性的大肠杆菌细胞中然后接种到含青霉素的培养基中，能生长的大肠杆菌所含有的连接产物是                         。（2分，）

②在上述实验中，为了防止目的基因和质粒在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是                 。

（5）若要使A在体外通过③④⑤过程扩增，那么在此过程中所使用的酶是             。（2分）除酶外还需要加入引物，其作用是                                 。（2分）

 

下图是利用奶牛乳汁生产人的血清白蛋白的图解,根据下图回答：

（1）被①处理后的分散细胞进行培养，通常要在培养液中添加一定量的         ，此外应定期更换培养液，以便保证被培养的细胞处于无菌无毒的环境中进行培养。

（2）在形成图中③的过程中,获取②的途径主要有从基因文库中获取、         、人工合成。

（3）图中①一般经                    处理可以得到③,从③到④的过程中涉及到的生物技术有              和              。

（4）有人对这种牛奶不敢食用，人们对这种转基因食品的担心表现在担心出现       效应,担心出现新的          ，担心营养成分改变。

（5）人的血清白蛋白的生产，说明该工程突破了自然界物种之间的            。

 

下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图回答。

   （1）在基因工程操作程序中，图中①②表示        ，⑦表示       ，⑧表示          ，⑩表示目的基因的检测与鉴定。不能利用人的唾液腺细胞来完成①过程的原因是          。

   （2）过程②必需的酶是         酶。过程③是DNA受热             后解链为单链，③④⑤表示的PCR技术需要的条件有：模板DNA、四种脱氧核苷酸、          、       、稳定的缓冲液和严格的温度控制设备。

   （3）在利用A和B获得C的过程中，必须用      切割A和B，使它们产生             ，再加入          ，才可以形成C。

   （4）基因工程是否成功可以在不同水平层次上进行检测。在DNA水平上检测的方法是     。在蛋白质水平上进行检测的方法是从大肠杆菌中提取蛋白质，进行             ，观察是否产生杂交带。

   （5）为使过程⑧更易进行，可用Ca²⁺处理D，使其成为       细胞。

 

下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图。据图作答。

（1）图中细胞1是        细胞。过程②、④需要的酶分别是                    。
（2）与人细胞中胰岛素基因相比，过程②获得的目的基因不含有非编码区和         。
（3）若A中共有a个碱基对，其中鸟嘌呤有b个，则③④⑤过程连续进行4次，至少需要提供胸腺嘧啶         个。
（4）图中B的基本组成单位有     种；基因工程的核心步骤是       （填图中序号）。
（5）便于重组DNA的鉴定和选择，图中C的组成必须有             ；为使过程⑧更易进行，可用        处理大肠杆菌。
（6）过程⑨得到使外源基因高效率表达的菌类细胞株系称为           ；若过程⑨发生了变异，则此变异为           。过程⑩得到的人胰岛素需要体外加工才具有生物活性，原因是大肠杆菌                    。

下图是利用生物工程技术生产人生长激素的示意图。质粒上的Amp^r表示青霉素抗性基因，Tet^r表示四环素抗性基因，限制酶PstI、EcoR I和Hind Ⅲ切割形成的末端均不相同。据图回答：

（1）将人生长激素基因导入小鼠体内来生产生长激素。图中对供体雌鼠甲用促性腺激素处理一段时间后与雄鼠乙交配，然后通过手术的方法从雌鼠甲的___________中取出受精卵。图中早期胚胎应保证发育到____________________阶段，才能进行后续过程的操作。
（2）①过程不能利用人的皮肤细胞，其原因是_____________________________。
（3）为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，切割质粒时应选用的酶是                 。
（4）大肠杆菌细胞内应不含          基因，以利于筛选出含重组质粒的受体菌。
（5）如果从限制酶Pst I、EcoR I和HindⅢ任选两种酶对质粒进行切割，均会将质粒切成两段，则形成的DNA片段有________种，其中含有完整四环素抗性基因的DNA片段占___________。
（6）按照图示的操作，将三角瓶中的大肠杆菌先接种到甲培养基上，然后分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置，一段时间后，菌落的生长状况如乙、丙图所示。据图分析丙培养基中含人生长激素基因的菌落有_____个。

)下图是利用基因工程办法生产人白细胞干扰素的基本过程图，据图回答：

（1）一般将受体大肠杆菌用＿＿＿＿处理，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，这种细胞称为＿＿＿＿＿＿＿＿。

（2）②物质是从大肠杆菌分离出的＿＿＿＿。其化学本质是＿＿＿＿，它必须能在宿主细胞中＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（3）③过程表明目的基因＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（4）进行基因工程操作一般要经过的四个步骤是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿ 、＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。

（1）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？_________，为什么？_________________。

（2）过程②、③必需的酶分别是__________、__________。

（3）为使过程⑧更易进行，可用__________（药剂）处理D等。

（4）图中的B起到运载体的作用，基因工程中，B应具备的条件是_________________。

（5）构建C需用到的酶______________________________。

（6）获取目的基因，除人工合成外，还可用____________________方法。

（7）若酶均点为AATT，胰岛素基因中无此序列，但其两端有此序列。质粒中有抗青霉素基因（该基因内有AATT序列）和抗四环素基因（不含AATT序号），则将受体细菌先放在含__________素的培养基上培养，然后将能在此培养基上生长的细菌再接种到含__________素的培养基上培养，__________（能／不能）生长的细菌可能含有目的基因。

下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答：

(1)能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？__________________。为什么？________________________________________________________________________。

(2)过程②③必需的酶分别是______、_______；过程⑥所用的酶是_______；过程⑦所用的酶是_______。

(3)取自大肠杆菌的物质B，其名称是______，在基因工程中起____的作用。B上通常带有某些标记基因，其作用是________________________________________________。

(4)为使⑧更易进行，可用___________处理D，以增大其通透性。

(5)图中的B应该符合的条件为__________________________________。

能起到B的作用的有_______________________________________________，

图中的D是基因工程中的_______细胞，能作为这种细胞的有_____________等。

 

下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图回答：

(1)人的胰岛素基因能导入大肠杆菌体内并表达，原因是_________________________。

(2)②③过程必需的酶分别是____________________________。

(3)③④过程称为__________，此过程也可在体外利用________技术进行。

(4)简述利用A、B获得C的过程：_____________________________________。

(5)构建______(填字母)是基因工程的核心，其目的是_____________________________。完成⑧过程常用________处理细胞