40．【生物—选修3：现代生物科技专题】（15分）

       使用DNA重组技术，把天然或人工合成的遗传物质定向插入细菌、酵母菌或哺乳动物细胞中，使之充分表达，经纯化后而制得的疫苗称为基因工程疫苗。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面A蛋白为主要抗原，其基因工程疫苗生产流程如图30。请回答：

       （1）过程①表示             。

（2）可能利用               技术扩增获得A基因。使用该技术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列来合成           。还需要有耐热的         酶。扩增时DNA解链的温度应控制在        ℃。而互补链延伸时的温度应控制在           ℃。

（3）过程③构建A基因重组载体时，除了A基因外，还必须有      、     和      基因等。这一过程需要使用            和               这两种工具酶。

（4）过程④中选用大肠杆菌作为受体细胞，最常见的转化方法是：用              处理，得到          细胞，再将经过处理的细胞与溶有A基因重组表达载体的缓冲溶液混合，并控制在一定的温度使之完成转化。

（5）可用             技术检测受体细胞菌的DNA上是否插入了A基因，要检测A基因是否成功表达还需检测受体细菌                   。

（选修三）2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白（GFP）方面作出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。GFP基因可作为目的基因用于培育绿色荧光小鼠，图中表示培育绿色荧光小鼠的基本流程：

请根据上述材料回答下列问题。

（1）培育绿色荧光小鼠的过程用到了哪些现代生物技术？

（2）用于培育绿色荧光小鼠的基因表达载体的组成必须有启动子、终止子和　　　。图中过程②常用的方法是　　　　；在进行过程④前，利用　　　　技术可以获得数目更多且基因型相同的绿色荧光小鼠。

（3）GFP基因与目的基因一起构建到载体上不影响目的基因表达，也不影响由目的基因控制合成的蛋白质的结构与功能，且对细胞无毒性作用，因此GFP基因可以作为基因表达载体上的　　　　　。

（4）目前科学家通过　　　　工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等，该工程是直接改造GFP分子还是改造GFP基因？　　　　。请写出该工程的基本流程：