2.实验中NaCl的物质的量浓度为2 mol/L和0.14 mol/L 对DNA有何影响? 查看更多

 

题目列表(包括答案和解析)

阅读下列实验原理,分析、设计有关问题:

实验原理:

①核酸在较为剧烈的化学、物理和酶的因素的影响下很容易降解。在制备DNA时要加入DNA酶的抑制剂柠檬酸钠,以除去Mg离子,防止DNA酶的激活。

②核酸中的DNA和RNA在生物体内均以核蛋白的形式存在,DNA核蛋白在1 mol/L NaCl溶液中溶解度很大,但在0.14 mol/L NaCl溶液中的溶解度很低;而RNA核蛋白溶于0.14 mol NaCl溶液。

③用苯酚处理,可使蛋白质变性,且留在苯酚层内;在DNA溶液中加入25倍体积为95%的酒精,可将DNA分离出来。此时DNA十分粘稠,可用玻璃棒搅成团取出。

④DNA在强酸环境下,水解产生脱氧核糖等小分子物质,它与二苯胺酸性溶液反应,能生成蓝色化合物。

提供的试剂与器材:

柠檬酸钠溶液、石英砂、0.14 mol/L NaCl溶液、1 mol/L NaCl溶液、苯酚、95%酒精、二苯胺试剂、浓硫酸、花椰菜、研钵、烧杯、漏斗、玻璃棒、量筒、石棉网、酒精灯、吸管、试管等。

思考与设计:

(1)分程序设计具体的操作步骤,提取新鲜花椰菜细胞中的DNA。

(2)设计实验证明提取物确实为DNA。

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下图示以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取与鉴定的操作程序,请分析回答:
(1)步骤一中,向鸡血细胞液中加入_________并搅拌,可使鸡血细胞破裂。
(2)步骤二:过滤后收集含有DNA的___________。
(3)步骤三、四的操作原理是____________,步骤四通过向溶液中加入________调节NaCl溶液物质的量浓度为_______mol/L时,DNA将会析出,过滤去除溶液中的杂质。
(4)步骤七:向步骤六过滤后的______中,加入等体积的冷却的_______________,静置2~3min,溶液中会出现_______色丝状物,这就是粗提取的DNA。
(5)步骤七:DNA遇____________试剂,沸水浴5min,冷却后,溶液呈___________色。

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19.DNA在NaCl溶液中的溶解度有二重性,随着NaCl溶液浓度的变化而变化。

(1)

请在下列不同浓度的NaCl溶液中选出能使DNA溶解度最高的一种是

[  ]

A.

0.14 mol/L

B.

2 mol/L

C.

0.15 mol/L

D.

0.3 mol/L

(2)

DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些物质却可以溶于酒精溶液,利用这一原理可以________,可以推测溶于酒精中的物质可能有________。

(3)

利用DNA遇________呈蓝色的特性,将该物质作为鉴定________的试剂。其实验过程要点是向放有________的试管中加入4 mL的________。混合均匀后,将试管置于________5 min,待试管________,观察试管中溶液颜色的变化,这个实验也说明DNA耐________温。

(4)

PCR一般要经历三十多次循环,每次循环可分为________、________、________三个步骤。DNA的羟基(-OH)末端称为________。PCR技术与细胞内DNA复制在解旋时原理不同:细胞内复制利用________使双链间氢键断裂,而PCR技术利用________原理,使双链氢键断裂,DNA的合成方向总是从子链的________端向________端延伸。

(5)

一个由32P标记的DNA分子,放在未标记的环境中培养,复制5次后,标记的DNA分子占DNA分子总数的________。假定DNA片段含200对脱氧核苷酸,经3次扩增,从理论上计算需要________个游离脱氧核苷酸,若某样品DNA中共有3000个碱基对,其碱基数量满足:(A+T)∶(G+C)=1/2,现欲得到1000个拷贝(与样品相同的DNA),至少需要向试管中加入________个腺嘌呤脱氧核苷酸。

(6)

DNA扩增过程中,DNA片段经若干次扩增,与其数目的理论值变化相符的图是

[  ]

A.

B.

C.

D.

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下图示以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取与鉴定的操作程序,请分析回答:

(1)步骤一中,向鸡血细胞液中加入________并搅拌,可使鸡血细胞破裂。

(2)步骤二:过滤后收集含有DNA的________。

(3)步骤三、四的操作原理是________,步骤四通过向溶液中加入________调节NaCl溶液物质的量浓度为________mol/L时,DNA将会析出,过滤去除溶液中的杂质。

(4)步骤七:向步骤六过滤后的________中,加入等体积的冷却的________,静置2-3 min,溶液中会出现________色丝状物,这就是粗提取的DNA。

(5)步骤七:DNA遇________试剂,沸水浴5 min,冷却后,溶液呈________色。

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以下是有关DNA粗提取实验的材料:

A.核酸极不稳定,在较为剧烈的化学、物理因素和酶的作用下很容易降解。在制备

DNA时要加入DNA酶的抑制剂——柠檬酸钠,以除去Mg,防止DNA酶的激活。

B.核酸中的DNA和RNA在生物体内均以核蛋白的形式存在,DNA核蛋白在1 mol/L

NaCl溶液中溶解度很大,但在0.14 mol/L NaCl溶液中的溶解度很低;而RNA核

蛋白溶于0.14 mol/L NaCl溶液。

C.用苯酚处理,可使蛋白质变性,且留在苯酚层内;在DNA溶液中加入2.5倍体积、

浓度为95%的酒精,可将DNA分离出来;此时DNA十分黏稠,可用玻璃棒搅成

团取出。

D.DNA在强酸环境下,水解产生脱氧核糖等小分子物质,它与二苯胺酸性溶液反应,

能生成蓝色化合物。

E.实验材料与器械:柠檬酸钠溶液、石英砂、0.14 mol/L NaCl溶液、1 mol/L NaCl

溶液、蒸馏水、苯酚、95%酒精、二苯胺试剂、浓硫酸、花椰菜、研钵、烧杯、

漏斗、玻璃棒、量筒、石棉网、酒精灯、吸管、试管等。

F.实验步骤:研磨的匀浆→过滤的滤液→滤液稀释6倍→离心处理的沉淀物→沉淀物

再溶解→加苯酚静置后去上清液→提取出DNA→DNA鉴定。

 

据以上材料回答下列问题:

(1)研磨时,取10 g花椰菜,加入适量的石英砂、________和________。

(2)将滤液稀释6倍,其目的是__________________________________________。

(3)取沉淀物,置于2 mL 1 mol/L NaCl溶液中,使DNA核蛋白再次溶解,再加入2 mL

苯酚充分震荡后静置,待其分层后弃其上层的苯酚。该步骤的目的是除去________。

(4)如何将剩余溶液中的DNA提取出来?

(5)如何证明提取物是DNA分子?

 

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