用来治疗糖尿病的胰岛素，过去主要靠从动物体器官、组织中提取，但因受原料限制，无法推广。现在，可以用发酵工程的方法来生产胰岛素。若用大肠杆菌发酵来生产胰岛素，并结合基因工程，写出其生产过程：

(1)构建转入人胰岛素基因的工程菌。

①提取目的基因：用胰岛素基因探针从人的胰岛细胞中获取             ，再用      法制备人的胰岛细胞目的基因。

②目的基因与运载体结合：从大肠杆菌的细胞中提取       ，并用      酶切割质粒，使其露出               。用同一种酶切割目的基因使其产生相同的               ，再将目的基因插人质粒切口处，加入适量的               酶，这样就形成了一个               和               的重组DNA。

③将目的基因导人受体细胞：将大肠杆菌用          处理，以增大               的通透性，让重组DNA进人大肠杆菌体内。

④目的基因的检测和表达：在用一定的方法检测出目的基因已导人大肠杆菌细胞内，并            后，再对该种大肠杆菌扩大培养。

(2)发酵生产。如图为发酵罐，回答：（括号中填数字,如[1]）

①配制适合大肠杆菌的培养基，调整        ，然后对培养基进行             处理并装入发酵罐，将上述大肠杆菌接种于发酵罐发酵

②若经检测若发现放料口排出的旧培养基中微生物细胞形态多样，甚至出现畸形，则此时微生物的生长处于     期，加料口[   ]添加新培养基的速度应该适当     ，并从[   ]以适当速度通入     

③若该装置阶段发酵的目的是为扩大培养生产酵母菌菌种，则应尽可能延长         期，采取的主要措施为：加料口放料的速度都           ，通人的无菌空气成分中应           ，搅拌的速度适当             

④影响发酵过程中温度变化的因素是                

⑤发酵过程中pH变化的原因是                     

⑥搅拌器搅拌的作用是                          

(3)发酵完毕后，从培养基中            并             胰岛素，经过一定的加工成为药用胰岛素，经           合格后，可投入使用。

27.   (13分)如图为果蝇体细胞染色体及部分基因位置的示意图,请回答下列问题：

（1)果蝇的体细胞内有______个染色体组，一个卵细胞内的染色体组成可表示为______ (用图中序号表示）。

(2)果蝇产生色素必需有显性基因A(位于常染色体上），而位于X染色体上的显性基因B 使得色素呈紫色，该基因为隐性时眼色为红色。果蝇不能产生色素时眼色为白色。现将 2个纯合品系白眼雌果蝇和红眼雄果蝇杂交，F1全为紫眼,则雌雄亲本的基因型分别为______、______让F1雌雄个体相互交配得到F2,F2雄性个体中紫眼:红眼：白眼为______

(3)实验得知,基因（C、c)与(D、d)位于III号染色体上,基因型为dd的个体胚胎致死。两对等位基因功能互不影响，且在减数分裂过程不发生交叉互换。这两对等位基因______(遵循/不遵循）自由组合定律。以基因型如上图所示的雌雄果蝇为亲本进行自由交配,后 代中基因型为CcDd个体所占比例为______。

(4)多一条IV号染色体的三体果蝇可以正常生活且能正常减数分裂，但性状和正常个体不同,可用于遗传学研究。果蝇的正常眼对无眼是显性，由常染色体上一对等位基因（E和 e)控制。现利用无眼果蝇与纯合的正常眼IV号染色体三体果蝇交配,探究无眼基因是否 位于IV号染色体上。实验思路如下：

首先用无眼果蝇与纯合正常眼三体果蝇杂交，得F1;然后将F1中三体果蝇与______果蝇交配,得F2,观察并统计F2的表现型及比例。若F2中正常眼：无眼为1：1,则说明______。

27.   (13分)如图为果蝇体细胞染色体及部分基因位置的示意图,请回答下列问题：

（1)果蝇的体细胞内有______个染色体组，一个卵细胞内的染色体组成可表示为______ (用图中序号表示）。

(2)果蝇产生色素必需有显性基因A(位于常染色体上），而位于X染色体上的显性基因B 使得色素呈紫色，该基因为隐性时眼色为红色。果蝇不能产生色素时眼色为白色。现将 2个纯合品系白眼雌果蝇和红眼雄果蝇杂交，F₁全为紫眼,则雌雄亲本的基因型分别为______、______让F₁雌雄个体相互交配得到F₂,F₂雄性个体中紫眼:红眼：白眼为______

(3)实验得知,基因（C、c)与(D、d)位于III号染色体上,基因型为dd的个体胚胎致死。两对等位基因功能互不影响，且在减数分裂过程不发生交叉互换。这两对等位基因______(遵循/不遵循）自由组合定律。以基因型如上图所示的雌雄果蝇为亲本进行自由交配,后 代中基因型为CcDd个体所占比例为______。

(4)多一条IV号染色体的三体果蝇可以正常生活且能正常减数分裂，但性状和正常个体不同,可用于遗传学研究。果蝇的正常眼对无眼是显性，由常染色体上一对等位基因（E和 e)控制。现利用无眼果蝇与纯合的正常眼IV号染色体三体果蝇交配,探究无眼基因是否 位于IV号染色体上。实验思路如下：

首先用无眼果蝇与纯合正常眼三体果蝇杂交，得F₁;然后将F₁中三体果蝇与______果蝇交配,得F₂,观察并统计F₂的表现型及比例。若F₂中正常眼：无眼为1：1,则说明______。

(13分)如图为呼吸作用装置示意图，在A瓶中放一些湿棉花，上面放数粒已萌发的种子；在B瓶中放一些干棉花，上面放数粒干的种子。瓶内各吊一小杯NaOH溶液，塞上带温度计的软木塞。实验时间为48小时。请根据图回答问题：

（1）48小时后,两温度计中，温度相对较高的是               ，原因是                          。

（2）观察导管中的液面，明显上升的是A瓶。这是因为                                              。

（3）若预先在两锥形瓶内各放一只小鼠，则生活时间较长的是                  瓶内的小鼠。其原因是                            。

（4）如预先在两锥形瓶内放入一小杯鲜奶（内混有少量的乳酸菌），则先变酸的应该是___________瓶中的。其原因是                           。

（5）呼吸作用释放的CO₂和吸收的O₂的体积之比（CO₂/ O₂）称为呼吸商（简称RQ）。某同学将m克萌发的种子放入氧气充足的某密闭装置中，保持装置内气体的温度和压强不变，经t小时后测定装置中的气体体积，变化了A毫升（规定：增加体积为负值，减少体积为正值）。若在另一相同装置中放入碱液，经t小时后，测定气体体积，与实验开始时相比减少了B毫升。该同学测定的萌发中的种子RQ=                 。

(15分)如图为利用生物技术获得生物新品种的过程示意图。据图回答:

(1)随着科技发展，获取目的基因的方法也越来越多，若乙图中的“抗虫基因”是利用甲图中的方法获取的，该方法称为　            。图中①过程与细胞中DNA复制过程相比，该过程不需要　　    酶。③是在　　    (填“酶的名称”)作用下进行延伸的。 

(2)在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kanR)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。乙图为获得抗虫棉技术的流程。A过程需要的酶有　  　、　　       。图中将目的基因导入植物受体细胞采用的方法是　  　     。C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入          。 

(3)离体棉花叶片组织经C、D、E成功地培育出了转基因抗虫植株，此过程涉及的细胞工程技术是         ，该技术的原理是                。 

(4)检测目的基因是否转录出mRNA的具体方法是使用           与提取出的      做分子杂交。 

(5)科学家将植物细胞培养得到          ，包上人工种皮，制成了神奇的人工种子，以便更好地大面积推广培养。