植物叶肉细胞原生质体的分离和培养的主要过程可用下图所示图解简单表示：

(1)原生质体的结构包括___________、___________、______________三部分构成。

(2)培育胚状体利用了________________这一项生物技术，培养基中除了含有一定的营养外，还必须含有细胞分裂素、生长素等植物激素，还需要对培养基进行严格的________。

(3)获得原生质体后，需要对其活力进行检查，下列哪些实验最合适（   ）

A．观察原生质体的结构是否完整           B．观察细胞质的流动

C．观察细胞有丝分裂                     D．观察叶绿体数目的多少

(4)一般在培养基上培养24～48小时后，大部分原生质体已再分生出细胞壁。可以取样，利用25％的蔗糖溶液以及其他用具，通过______________________实验来鉴别细胞壁是否已经再生。

(5)愈伤组织再分化形成的胚状体再继续培养，则可培育出完整的植株，这体现了____     __。

(6)从叶片的叶肉细胞到获得胚状体的过程中，需要经过（   ）

①无丝分裂  ②有丝分裂   ③减数分裂  ④原代培养    ⑤传代培养  ⑥植物体细胞杂交    ⑦细胞融合  ⑧脱分化     ⑨再分化

A．①④⑤⑦⑧   B. ②④⑤⑥⑧⑨     C．②⑧⑨     D．③⑥⑧⑨

 (7)从图解可知，可在避光条件下进行的是_______ (用字母a～e回答)阶段，若为了获得三七的细胞产物，则只需培养到________。若为了获得三七的人工种子，则需要培养到___________。

（10分）长期以来 ,香蕉生产遭受病害的严重威胁 ,制约了其发展。目前 ,随着转基因抗病香蕉基因工程技术的日趋成熟 ,为培育抗病香蕉品种开辟了新途径。转基因抗病香蕉的培育过程如图所示，质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答：

(1)构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶              ，对           进行切割。

(2)培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有                ，作为标记基因。

（3）能使抗病基因在香蕉细胞中特异性表达的调控序列是：         (填字母序号)。

A启动子   B终止子  C 复制原点   D标记基因

（4）将目的基因导入植物细胞常用方法有多种，图中所示方法为               。

（5）欲检测目的基因是否表达成功，可采用的技术              (填字母序号)。

A. 核酸分子杂交        B. 基因序列分析    C. 抗原-抗体杂交   D. PCR

(6)利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成转基因植株。香蕉组织培养的培养基中除了含有一定的营养物质外还必须含有                    等植物激素，它们会在          （填图中标号）阶段发挥作用，同时      （填图中标号）阶段还需要给予一定光照。

（7）从香蕉组织块到获得转基因抗病香蕉试管苗的过程中，需经过        。(填数字)

①无丝分裂    ②有丝分裂   ③减数分裂   ④ 原代培养   ⑤ 传代培养

⑥ 植物体细胞杂交   ⑦ 细胞融合     ⑧ 脱分化      ⑨ 再分化

下列有关细胞工程的叙述中正确的是

A．欲获得人工种子，需培养至愈伤组织阶段   

B．胡萝卜的韧皮部细胞的全能性比人的生发层细胞更容易表达出来

C．在进行动物细胞培养时，遗传物质的改变发生在原代培养过程中     

D．脱分化过程主要是有丝分裂，仅有极少量细胞进行减数分裂

（1）降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如下图所示。在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：

①上述制备该新型降钙素，运用的现代生物工程技术是               。
②Klenow酶是一种           酶，合成的双链DNA有           个碱基对。
③获得的双链DNA经EcoRⅠ（识别序列和切割位点-G^↓AATTC-）和BamHⅠ（识别序列和切割位点-G^↓GATCC-）双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。
A:设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是                                             。
B:要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有           。
④经DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是                                            。
(2)科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆(如下图所示)，请结合图示回答下列问题。

①在进行细胞培养时，要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分离，形成单个细胞，这个过程中需要利用________酶处理。
②形成重组细胞时应选用________期的卵母细胞，并去掉其细胞核的原因是____________
__________________________________。
③如果重组细胞为贴附性细胞，则在进行原代培养时，会表现出_______和________等特点。
④在胚胎移植技术的基本程序中，冲卵以后，要对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应该发育到         或者囊胚阶段。
⑤上图中所示的生物技术包括有核移植、________、________等。转基因奶牛的克隆成功，说明了动物________具有全能性。

（10分）植物叶肉细胞原生质体的分离和培养的主要过程可用下图所示图解简单表示：

（1）原生质体的结构包括细胞膜、细胞质、__________三部分构成。

（2）培育胚状体利用了________________技术。这一项生物技术，培养

基中除了含有一定的营养外，还必须含有植物激素，还需要对培养基进行严格的_____。

（3）获得原生质体后，需要对其活力进行检查，下列用哪些实验检测最合适________。

A．观察原生质体的结构是否完整     

B．观察细胞质的流动

C．观察细胞有丝分裂            

D．观察叶绿体数目的多少

（4）一般在培养基上培养24～48小时后，大部分原生质体已再分生出细胞壁。可以取样，利用25％的蔗糖溶液以及其他用具，通过_________实验来鉴别细胞壁是否已经再生。

（5）愈伤组织再分化形成的胚状体再继续培养，则可培育出完整的植株，这体现了____  。

（6）从叶片的叶肉细胞到获得胚状体的过程中，需要经过______         。

①无丝分裂     ②有丝分裂       ③减数分裂    ④原代培养  ⑤传代培养

⑥植物体细胞杂交    ⑦细胞融合      ⑧脱分化      ⑨再分化

A．①④⑤⑦⑧       B. ②④⑤⑥⑧⑨    C．②⑧⑨       D．③⑥⑧⑨

（7）从图解可知，需要在培养基中加入激素调整细胞分裂分化的是_______ （用字母a～e

回答）阶段，若为了获得三七的细胞产物，则只需培养到________。

（8）如果愈伤组织是棉花叶肉细胞培养产生的，通过基因工程要获取抗虫棉，目的基因导

入棉花愈伤组织细胞常用的方法是             法。