（多选）在基因工程中，作为基因运输工具的运载体，必须具备的条件有             （    ）

A．能够在宿主细胞中复制，并稳定地保存    

B．具有多个限制酶切点

C．必须是细菌的质粒或噬菌体              

D．具有某些标记基因

作为基因工程中的运载体应具备的条件不包括（）

1. A.
   能够在宿主细胞中复制并稳定地保存
2. B.
   有多个限制酶切点，以便与外源基因连接
3. C.
   都是环状双链DNA分子
4. D.
   都有便于筛选的标记基因

作为基因工程中的运载体应具备的条件不包括（　　）

A．能够在宿主细胞中复制并稳定地保存

B．有多个限制酶切点，以便与外源基因连接

C．都是环状双链DNA分子

D．都有便于筛选的标记基因

A．能够在宿主细胞中复制并稳定地保存

B．有多个限制酶切点，以便与外源基因连接

C．都是环状双链DNA分子

D．都有便于筛选的标记基因

ch1L基因是蓝藻拟核DNA上与叶绿素合成有关的基因。为研究该基因对叶绿素合成的控制，需要构建该种生物缺失ch1L基因的变异株细胞。构建过程如下：

第①步：用PCR技术从蓝藻环状DNA中扩增出ch1L基因片段。

第②步：将ch1L基因与质粒构建形成重组质粒1。

第③步：将重组质粒1中ch1L基因中部0.8kb片段删除，用一段红霉素抗性基因取代之，得到重组质粒2。

第④步：将重组质粒2导入蓝藻细胞，由于改造后的基因与ch1L基因仍有很长的序列相同，所以能准确地与其发生同源重组，产生出缺失ch1L基因的突变株。请根据上述资料，回答下列问题：

（1）第①步用PCR技术扩增DNA片段时用到的耐高温的酶通常是指什么酶？         。

PCR扩增DNA时必须加入引物，引物的实质是          ，其作用是                                。

（2）利用PCR技术扩增DNA一般要经过三十多次循环，每次循环都要经过三个步骤，其中“复性”这一步骤发生的变化是                   。为消除PCR扩增过程当中外源DNA污染造成的影响，应如何设置对照？                       。

（3）构建重组质粒1、2时，为保证成功率，往往使用                        酶

对基因和质粒进行切割，以切出相同的黏性末端，便于连接。此酶的作用是将DNA分子的              键打开。

（4）质粒是基因工程中最常用的运载体，其化学本质是         ，此外还可用噬菌体、动植物病毒作用为运载体。

（5）导入重组质粒2以后，往往还需要进行检测和筛选，可用            制成探针，检测是否导入了重组基因，在培养基中加入              可将变异株细胞筛选出来。

（10分）ch1L基因是蓝藻拟核DNA上与叶绿素合成有关的基因。为研究该基因对叶绿素合成的控制，需要构建该种生物缺失ch1L基因的变异株细胞。构建过程如下：

第①步：用PCR技术从蓝藻环状DNA中扩增出ch1L基因片段。
第②步：将ch1L基因与质粒构建形成重组质粒1。
第③步：将重组质粒1中ch1L基因中部0.8kb片段删除，用一段红霉素抗性基因取代之，得到重组质粒2。
第④步：将重组质粒2导入蓝藻细胞，由于改造后的基因与ch1L基因仍有很长的序列相同，所以能准确地与其发生同源重组，产生出缺失ch1L基因的突变株。请根据上述资料，回答下列问题：
（1）第①步用PCR技术扩增DNA片段时用到的耐高温的酶通常是指什么酶？        。
PCR扩增DNA时必须加入引物，引物的实质是         ，其作用是                               。
（2）利用PCR技术扩增DNA一般要经过三十多次循环，每次循环都要经过三个步骤，其中“复性”这一步骤发生的变化是                  。为消除PCR扩增过程当中外源DNA污染造成的影响，应如何设置对照？                      。
（3）构建重组质粒1、2时，为保证成功率，往往使用                       酶
对基因和质粒进行切割，以切出相同的黏性末端，便于连接。此酶的作用是将DNA分子的             键打开。
（4）质粒是基因工程中最常用的运载体，其化学本质是        ，此外还可用噬菌体、动植物病毒作用为运载体。
（5）导入重组质粒2以后，往往还需要进行检测和筛选，可用           制成探针，检测是否导入了重组基因，在培养基中加入             可将变异株细胞筛选出来。

ch1L基因是蓝藻拟核DNA上与叶绿素合成有关的基因。为研究该基因对叶绿素合成的控制，需要构建该种生物缺失ch1L基因的变异株细胞。构建过程如下：

第①步：用PCR技术从蓝藻环状DNA中扩增出ch1L基因片段。

第②步：将ch1L基因与质粒构建形成重组质粒1。

第③步：将重组质粒1中ch1L基因中部0.8kb片段删除，用一段红霉素抗性基因取代之，得到重组质粒2。

第④步：将重组质粒2导入蓝藻细胞，由于改造后的基因与ch1L基因仍有很长的序列相同，所以能准确地与其发生同源重组，产生出缺失ch1L基因的突变株。请根据上述资料，回答下列问题：

（1）第①步用PCR技术扩增DNA片段时用到的耐高温的酶通常是指什么酶？           。

PCR扩增DNA时必须加入引物，其作用是                                         。

（2）利用PCR技术扩增DNA一般要经过三十多次循环，每次循环都要经过三个步骤，其中“复性”这一步骤发生的变化是                                          。

（3）构建重组质粒1、2时，为保证成功率，往往使用                                  酶对基 因和质粒进行切割，以切出相同的黏性末端，便于连接。此酶的作用是将DNA分子的               键打开。

（4）质粒是基因工程中最常用的运载体，其化学本质是                      ，此外还可用噬菌体、动植物病毒作用为运载体。

（5）导入重组质粒2以后，往往还需要进行检测和筛选，可用                   制成探针，检测是否导入了重组基因，在培养基中加入              可将变异株细胞筛选出来。

（10分）ch1L基因是蓝藻拟核DNA上与叶绿素合成有关的基因。为研究该基因对叶绿素合成的控制，需要构建该种生物缺失ch1L基因的变异株细胞。构建过程如下：

第①步：用PCR技术从蓝藻环状DNA中扩增出ch1L基因片段。

第②步：将ch1L基因与质粒构建形成重组质粒1。

第③步：将重组质粒1中ch1L基因中部0.8kb片段删除，用一段红霉素抗性基因取代之，得到重组质粒2。

第④步：将重组质粒2导入蓝藻细胞，由于改造后的基因与ch1L基因仍有很长的序列相同，所以能准确地与其发生同源重组，产生出缺失ch1L基因的突变株。请根据上述资料，回答下列问题：

（1）第①步用PCR技术扩增DNA片段时用到的耐高温的酶通常是指什么酶？         。

PCR扩增DNA时必须加入引物，引物的实质是          ，其作用是                                。

（2）利用PCR技术扩增DNA一般要经过三十多次循环，每次循环都要经过三个步骤，其中“复性”这一步骤发生的变化是                   。为消除PCR扩增过程当中外源DNA污染造成的影响，应如何设置对照？                       。

（3）构建重组质粒1、2时，为保证成功率，往往使用                        酶

对基因和质粒进行切割，以切出相同的黏性末端，便于连接。此酶的作用是将DNA分子的              键打开。

（4）质粒是基因工程中最常用的运载体，其化学本质是         ，此外还可用噬菌体、动植物病毒作用为运载体。

（5）导入重组质粒2以后，往往还需要进行检测和筛选，可用            制成探针，检测是否导入了重组基因，在培养基中加入              可将变异株细胞筛选出来。

ch1L基因是蓝藻拟核DNA上与叶绿素合成有关的基因。为研究该基因对叶绿素合成的控制，需要构建该种生物缺失ch1L基因的变异株细胞。构建过程如下：

第①步：用PCR技术从蓝藻环状DNA中扩增出ch1L基因片段。

第②步：将ch1L基因与质粒构建形成重组质粒1。

第③步：将重组质粒1中ch1L基因中部0.8kb片段删除，用一段红霉素抗性基因取代之，得到重组质粒2。

第④步：将重组质粒2导入蓝藻细胞，由于改造后的基因与ch1L基因仍有很长的序列相同，所以能准确地与其发生同源重组，产生出缺失ch1L基因的突变株。请根据上述资料，回答下列问题：

（1）第①步用PCR技术扩增DNA片段时用到的耐高温的酶通常是指什么酶？         。

PCR扩增DNA时必须加入引物，引物的实质是          ，其作用是                                。

（2）利用PCR技术扩增DNA一般要经过三十多次循环，每次循环都要经过三个步骤，其中“复性”这一步骤发生的变化是                   。为消除PCR扩增过程当中外源DNA污染造成的影响，应如何设置对照？                       。

（3）构建重组质粒1

2时，为保证成功率，往往使用                       酶

对基因和质粒进行切割，以切出相同的黏性末端，便于连接。此酶的作用是将DNA分子的              键打开。

（4）质粒是基因工程中最常用的运载体，其化学本质是         ，此外还可用噬菌体、动植物病毒作用为运载体。

（5）导入重组质粒2以后，往往还需要进行检测和筛选，可用            制成探针，检测是否导入了重组基因，在培养基中加入              可将变异株细胞筛选出来。

应用基因工程技术可以获得人们需要的生物新品种或新产品。请根据资料和图解回答下列问题：
材料一：蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度，可制成防弹背心、降落伞绳等。蜘蛛丝还可被制成人造韧带和人造肌腱。科学家研究出集中生产蜘蛛丝的方法——培育转基因蜘蛛羊。
材料二：注射疫苗往往会在儿童和部分成年人身上引起痛苦，将疫苗藏身于水果蔬菜中，人们在食用这些转基因植物的同时也获得免疫力，因而无需免疫接种，这一新概念将引起疫苗研究的一场革命。

（1）过程①⑤所需要的工具酶有                   ，构建的乙肝表面抗原蛋白基因表达载体一般由                                  等部分组成。
（2）过程②是将重组质粒导入山羊受体细胞，受体细胞应选择          ，采用最多的也是最有效的导入方法是           ；
过程⑥是将重组质粒导入莴苣受体细胞，受体细胞可为                 ，采用最多的导入方法是                 。
（3）通过①～④过程培育的蜘蛛羊可以作为乳腺生物反应器，从         中提取所需要的蜘蛛丝蛋白。还可以形成膀胱生物反应器，从         中提取所需蛛丝蛋白，简化提取过程。
资料三：PCR技术（聚合酶链式反应）是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，下图表示合成过程，请据图分析回答：

（4）A过程高温使DNA变性解旋，对该过程的原理叙述正确的是:(    )