[选做―现代生物科技专题]（14分）：下图是将人的生长素基因导入细菌B细胞内培育“工程菌”示意图，所用运载体为质粒A，已知细菌B细胞内不含质粒A及其上面的基因，质粒A导入细菌B后，其上的基因得到表达。请回答：

（1）基因工程的操作程序主要包括四个步骤是             、基因表达载体的构建、                和目的基因的检测。

（2）获取目的基因的方法，一是______________________________________________；

二是_______________________________________________。

（3）如何使目的基因和质粒结合形成重组质粒？_______________              。

（4）目前把重组质粒导入细菌时，效率还不高，有的只导入普通质粒A，只有极少数导入的是重组质粒，而大部分根本没有导入质粒。此处可通过如下步骤鉴别得到的细菌是否导入了质粒A或重组质粒：将得到的细菌涂抹在一个含四环素培养基上，能够生长的就导入了，反之则没有。使用这种方法鉴别的原因是____________________。

（5）若把已导入了普通质粒A或重组质粒的细菌放在含氨苄青霉素的培养基上培养，将会发生________      　　　　　　　　　　　　现象。

【生物——现代生物科技专题】2008年1月7日，东北农业大学培育出我国第二代绿色荧光蛋白转基因克隆猪。研究人员是先从一种特殊水母中提取绿色荧光蛋白基因，然后把该基因经过处理后转移到培养的猪胎儿成纤维细胞的基因组中，再把转基因体细胞的细胞核移植到成熟的去核猪卵母细胞中构建成转基因胚胎。再经过手术移植入受体母猪，经过发育最终获得绿色荧光蛋白转基因克隆猪。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图。请据图回答：

⑴过程①和②必需用到的酶是                      。

⑵重组质粒除了带有绿色荧光蛋白基因以外，还必须含有                才能构成一个完整的基因表达载体。

⑶为了获得更多的猪卵母细胞，可通过对母猪注射          的方法，做超数排卵处理，并将所采集到的卵母细胞在体外培养到         期即可通过显微操作将其细胞核去除。

⑷早期胚胎的培养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及          等物质。

⑸如果想同时得到多头绿色荧光蛋白转基因克隆猪，可通过胚胎分割技术得以实现。但应选择              的早期胚胎进行操作，且要注意              ，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。

⑹与一般的繁育良种动物方式相比较，胎移植的优势是                       。

选修3——现代生物科技专题

（1）长期以来，优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈，近年来发展起来的细胞工程和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机，请据图完成下列问题：

①在试管牛和克隆羊的培育过程中都必须用到的生物技术有　　　　 　、 　　 （至少写出二项）。

②和受精有关的过程有：①第一次卵裂开始；②释放第二极体；③顶体反应；④穿越透明带；⑤雌、雄原核的形成；⑥核膜消失，雌、雄原核融合。其正确的顺序为 　　　　　 （填序号）。

③超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射　 　　　 　　　；冲卵实质上是用特定装置，将供体母牛子宫内的 　　　　 冲洗出来。

④从A到E中，适宜于牛的胚胎移植时期有　 　 ；图中标号3为 　　　　 ，它将来可发育为胎膜和胚盘。

⑤动物的早期胚胎移植到同种且　 与供体相同的动物体内，使之继续发育为新个体的技术叫做胚胎移植。

（2）“桑基鱼塘”生态系统能充分利用废弃物中的能量，形成“无废弃物农业”，这主要是遵循生态工程的_________________原理。同时，通过饲养家禽、家畜，栽培食用菌，提高农民经济收入，使保护环境和发展经济相互协调，这又体现了生态工程的_________________原理。

【生物——选修3现代生物科技专题】 

下图为利用生物技术获得生物新品种的过程示意图。据图回答：

   （1）随着科技发展，获取目的基因的方法也越来越多，若乙图中的“抗虫基因”是利用甲图中的方法获取的，该方法称为            。图中①过程与细胞中DNA复制过程相比，该过程不需要        酶。③是在       （填“酶的名称”）作用下进行延伸的。

（2）在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。乙图为获得抗虫棉技术的流程。A过程需要的酶有      、       。图中将目的基因导入植物受体细胞采用的方法是       。C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入     。

（3）离体棉花叶片组织经C、D、E成功地培育出了转基因抗虫植株，此过程涉及的细胞工程技术是            ，该技术的原理是                    。

（4）检测目的基因是否转录出mRNA的具体方法是使用                     与提取出的           做分子杂交。

（5）科学家将植株细胞培养到           ，包上人工种皮，制成了神奇的人工种子，以便更好地大面积推广培养。

【生物——选修3现代生物科技专题】 （15分）
下图为利用生物技术获得生物新品种的过程示意图。据图回答：
  （1）随着科技发展，获取目的基因的方法也越来越多，若乙图中的“抗虫基因”是利用甲图中的方法获取的，该方法称为           。图中①过程与细胞中DNA复制过程相比，该过程不需要       酶。③是在      （填“酶的名称”）作用下进行延伸的。
（2）在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。乙图为获得抗虫棉技术的流程。A过程需要的酶有     、      。图中将目的基因导入植物受体细胞采用的方法是      。C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入    。
（3）离体棉花叶片组织经C、D、E成功地培育出了转基因抗虫植株，此过程涉及的细胞工程技术是           ，该技术的原理是                   。
（4）检测目的基因是否转录出mRNA的具体方法是使用                    与提取出的          做分子杂交。
（5）科学家将植株细胞培养到          ，包上人工种皮，制成了神奇的人工种子，以便更好地大面积推广培养。

[生物——选修3现代生物科技专题] (15分)
2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白(GFP) 方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白(GFP)会发出绿色荧光，可借助荧光跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图表示培育绿色荧光小鼠的基本流程：

请根据上述材料回答下列问题：
(1)上述流程中，作为目的基因的是        。
(2)在培育绿色荧光小鼠的过程中，基因表达载体的构建是核心。一个完整的基因表达    载体至少包括目的基因、启动子、终止子、        基因等部分。
(3)过程①用到的工具酶有        ，过程②采用的方法是        ，过程③利用的生物技术是        。
(4)为迅速增加绿色荧光小鼠的数量，可采用试管动物技术。在这项技术中，首先要做的是体外受精和早期胚胎的培养。哺乳动物的体外受精主要包括          、精子的获取和受精等几个主要步骤。
(5)为提高胚胎的利用率，可采用      技术，应该选择发育良好、形态正常的     或囊胚进行分割。在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将        进行均等分割。

(8分)【生物——现代生物科技专题】2008年1月7日，东北农业大学培育出我国第二代绿色荧光蛋白转基因克隆猪。研究人员是先从一种特殊水母中提取绿色荧光蛋白基因，然后把该基因经过处理后转移到培养的猪胎儿成纤维细胞的基因组中，再把转基因体细胞的细胞核移植到成熟的去核猪卵母细胞中构建成转基因胚胎。再经过手术移植入受体母猪，经过发育最终获得绿色荧光蛋白转基因克隆猪。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图。请据图回答：

⑴过程①和②必需用到的酶是                     。
⑵重组质粒除了带有绿色荧光蛋白基因以外，还必须含有               才能构成一个完整的基因表达载体。
⑶为了获得更多的猪卵母细胞，可通过对母猪注射         的方法，做超数排卵处理，并将所采集到的卵母细胞在体外培养到        期即可通过显微操作将其细胞核去除。
⑷早期胚胎的培养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及         等物质。
⑸如果想同时得到多头绿色荧光蛋白转基因克隆猪，可通过胚胎分割技术得以实现。但应选择             的早期胚胎进行操作，且要注意             ，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
⑹与一般的繁育良种动物方式相比较，胎移植的优势是                      。

【生物——选修3  现代生物科技专题】（15分）

下图表示科学家通过基因工程培育抗虫棉时，从苏云金芽孢杆菌中提取抗虫基因“放入”棉花细胞中与棉花的DNA分子结合起来而发挥作用的过程示意图。请据图回答下列有关问题：

(1)图中科学家在进行①操作时，要用同一种___________  分别切割目的基因和运载体，运载体的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端就可通过__________（键名）而结合，遵循               。

(2)在获得目的基因的过程中，PCR技术相当重要。PCR扩增反应需要在一定的缓冲溶液中加入DNA模板、分别与两条模板链相结合的两种        、四种脱氧核苷酸和          的DNA聚合酶。

(3)图中的III是导入了目的基因的受体细胞，经培养、筛选最终获得一株有抗虫特性的转基因植株。经分析，该植株含有一个携带目的基因的DNA片段，因此可以把它看作是杂合子。理论上，在该转基因植株自交产生的F₁中，仍具有抗虫特性的植株占总数的              ，原因是_               

                                                                。

(4)将上述抗虫棉植株的后代种子种植下去后，往往有很多植株不再具有抗虫性，原因是_            

                                 ，要想获得纯合体，常采用的方法是________ _    __。

(5)科学家最初在做抗虫棉实验时，虽然用一定的方法已检测出棉花的植株中含有抗虫基因，但让棉铃虫食用棉的叶片时，棉铃虫并没有被杀死，这说明                 。科学家在研究的基础上又一次对棉花植株中的抗性基因进行了修饰，然后再让棉铃虫食用棉的叶片，结果食用的第2 天棉铃虫就死亡了。