将细菌A接种于固体培养基上，出现菌落，用一定剂量的紫外线处理A，得到突变种a₁，并接种于培养中，不出现菌落，但添加营养物质甲后，出现菌落；用另一剂量的紫外线处理A，得到突变种a₂接种于培养基中，不出现菌落，但添加营养物质乙后，出现菌落；若将a₁和a₂一同接种于培养基上，数日后出现菌落。下列说法正确的是   （    ）

       A．细菌a₁和a₂分别培养，均不能生长是因为紫外线处理导致细菌A发生了基因突变，从而无法合成营养物质甲或乙

       B．物质甲和乙均是细菌A在代谢过程中产生的次级代谢产物

       C．在实验中添加的物质甲或乙是作为生长因子添加到培养基中的

D．a₁和a₂一同接种于培养基上，出现菌落是因为细菌a₁能合成营养物质乙，细菌a₂能合成营养物质甲

将细菌A接种于固体培养基上，出现菌落，用一定剂量的紫外线处理A，得到突变种a₁，并接种于培养中，不出现菌落，但添加营养物质甲后，出现菌落；用另一剂量的紫外线处理A，得到突变种a₂接种于培养基中，不出现菌落，但添加营养物质乙后，出现菌落；若将a₁和a₂一同接种于培养基上，数日后出现菌落。下列说法正确的是

1. A.
   细菌a₁和a₂分别培养，均不能生长是因为紫外线处理导致细菌A发生了基因突变，从而无法合成营养物质甲或乙
2. B.
   物质甲和乙均是细菌A在代谢过程中产生的次级代谢产物
3. C.
   在实验中添加的物质甲或乙是作为生长因子添加到培养基中的
4. D.
   a₁和a₂一同接种于培养基上，出现菌落是因为细菌a₁能合成营养物质乙，细菌a₂能合成营养物质甲

将细菌A接种于固体培养基上，出现菌落，用一定剂量的紫外线处理A，得到突变种a₁，并接种于培养中，不出现菌落，但添加营养物质甲后，出现菌落；用另一剂量的紫外线处理A，得到突变种a₂接种于培养基中，不出现菌落，但添加营养物质乙后，出现菌落；若将a₁和a₂一同接种于培养基上，数日后出现菌落。下列说法正确的是   （    ）

       A．细菌a₁和a₂分别培养，均不能生长是因为紫外线处理导致细菌A发生了基因突变，从而无法合成营养物质甲或乙

       B．物质甲和乙均是细菌A在代谢过程中产生的次级代谢产物

       C．在实验中添加的物质甲或乙是作为生长因子添加到培养基中的

D．a₁和a₂一同接种于培养基上，出现菌落是因为细菌a₁能合成营养物质乙，细菌a₂能合成营养物质甲

将细菌A接种于固体培养基上，出现菌落，用一定剂量的紫外线处理A，得到突变种a₁，并接种于培养中，不出现菌落，但添加营养物质甲后，出现菌落；用另一剂量的紫外线处理A，得到突变种a₂接种于培养基中，不出现菌落，但添加营养物质乙后，出现菌落；若将a₁和a₂一同接种于培养基上，数日后出现菌落。下列说法正确的是

A．细菌a₁和a₂分别培养，均不能生长是因为紫外线处理导致细菌A发生了基因突变，从而无法合成营养物质甲或乙

B．物质甲和乙均是细菌A在代谢过程中产生的次级代谢产物

C．在实验中添加的物质甲或乙是作为生长因子添加到培养基中的

D．a₁和a₂一同接种于培养基上，出现菌落是因为细菌a₁能合成营养物质乙，细菌a₂能合成营养物质甲

将细菌A接种于固体培养基上，出现菌落，用一定剂量的紫外线处理A，得到突变种a₁，并接种于培养中，不出现菌落，但添加营养物质甲后，出现菌落；用另一剂量的紫外线处理A，得到突变种a₂接种于培养基中，不出现菌落，但添加营养物质乙后，出现菌落；若将a₁和a₂一同接种于培养基上，数日后出现菌落。下列说法正确的是                               （   ）

(11分)“树橘柚者，食之则甘，嗅之则香”，每年的10月，正是柑橘大量上市的季节。橘子全身都是宝：不仅果肉的营养价值高，药用价值较高，其皮、核、络、叶都是“地道药材”。请回答下列问题。

(1)江南某橘子盛产地想建立一个大型的果酒、果醋加工厂，需要的发酵菌种是_________和________。分离纯化这两种微生物的常用方法是：将10³-10⁷倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上，用______将菌液铺平。这种接种方法称为______。

(2) 提取桔皮的胡萝卜素过程中，萃取加热时需安装冷凝回流装置，其目的是________________________________________________________________________。

(3)四川一果汁加工厂在制作橘子汁的过程中发现果汁有些浑浊，为提高出汁率，可加入适量的________________使果汁变得澄清。

(4) 培养外植体的培养基中常用的凝固剂是________________。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值____________(填“高”或“低”)时，有利于芽的分化。对培养基彻底灭菌时，应采取的灭菌方法是______________________________________________。

(5)为了检测其中某种菌对于抗生素的敏感性，取该单菌落适当稀释，接种于固体培养基表面，使其均匀生长，布满平板。将分别含有A、B两种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A       ；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该病菌对抗生素B       ；

I.近期，思念、三全、湾仔码头等企业生产的速冻食品相继检出金黄色葡萄球菌超标，“细菌门”事件引起公众的普遍关注。请回答下列问题：

(1)某小组欲检测果汁类食品中是否含有金黄色葡萄球菌。经查资料：葡萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂，在含卵黄的固体培养基上形成的菌落周围会出现特有的乳白色的乳浊环。请完成下列实验

步骤：

①配制培养基：称取适量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl琼脂等，加入蒸馏水，搅拌加热至完全溶解后调节___________，分装到锥形瓶后___________，在无菌状态下加入卵黄液（100 mL10%灭菌NaCl溶液中加一个鸡蛋黄，振荡均匀）摇匀，立即倒平板。

②接种：取待检果汁2.5mL加入到22.5 mL的灭菌生理盐水中，制成接种样液。

实验组：将接种样液用___________法接种在含卵黄的固体培养基上。

对照组：将________用同样的方法接种在含卵黄的固体培养基上或不接种作空白对照。

将上述接种后的培养皿同时放在36 ⁰C的恒温箱中培养48h

③观察：观察培养基表面 _______________________________________________________

(2)葡萄球菌能耐受高浓度的NaCl,所以在配制培养基时加入高浓度的NaCl可以将它分离出来。此培养基属于___________ 培养基。

(3)要统计每克果汁样品中活菌数目，宜采用___________法接种，根据果汁样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的___________就能大约推测出样品中活菌数。

Ⅱ．某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌样品和酵母菌样品混在一起，已知青霉素会影响固氮菌的生长繁殖，但不影响真菌生长繁殖。请填空完成分离这两种菌的主要实验步骤：

(1)分别配置_____________的培养基和__________的培养基，分别分成两份，依次标上A、a、B、b备用；

(2)分别向A、B培养基接种___________；

(3)把接种后的培养基放在恒温箱中3d～4d；

(4)从A、B培养基上生长的菌落中挑取生长良好的菌株，分别接种到__________中；

(5)____________________________________________________________________________。

请回答下列在生物技术实践过程中，对某些实验步骤的操作中的相关问题：

(1)在腐乳的制作时，用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用????????? 消毒；在提取植物细胞的DNA时，需要先用洗涤剂溶解???????? 。

(2)葡萄皮、籽中含有原花青素、葡萄皮红素和大量葡萄风味物质等，这些物质易溶于乙醇、乙酸乙酯中，因此常采用______法来分离提取，还可以用???????????? 和?????????? 等提取植物芳香油的方法。

(3)为了检测某致病菌对于抗生素的敏感性，取该单菌落适当稀释，接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。将分别含有A，B，C三种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A_______（填“敏感”或“不敏感”）；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B_____（填“敏感”或“不敏感”）；含C滤纸片周围的透明圈比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是____________________________。

(4)用来判断某选择培养基是否起到了选择分解纤维素的细菌作用，要设置的对照是（?? ）

A．未接种的选择培养基

B．未接种的牛肉膏蛋白胨培养基

C．接种了的牛肉膏蛋白胨培养基

D．接种了的选择培养基

（15分）纤维素酶对于能否实现乙醇工业化生产、处理服装面料等具有重要的意义，研究者初步筛选到能合成纤维素酶的菌株MC-1，以下是该菌株的鉴定过程。

（1）为了获得能合成纤维素酶的单菌落，可采用           法将初筛菌液接种在固体培养基上，这种培养基属于       培养基。

（2）关于制备固体培养基的叙述，错误的是             

A．制作固体培养基时可以加入琼脂。

B．操作的顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌。

C．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板。

D．待平板冷却凝固约5-10min后将平板倒过来放置。

（3）实验过程中如何防止其他微生物的污染？                         。

5）分离获得了具有较高纤维素酶活性的菌株MC-1，为了在此基础上获得纤维素酶活性更高的菌株，最可行的做法是                                。

（6）某同学在培养过程中发现培养基上感染了几种细菌。若在以尿素为唯一氮源的培养基中加入________指示剂培养几种菌后，指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的菌；若在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入________染料，培养后，培养基中出现透明圈，就可以鉴定其中含有纤维素分解菌。

27. （16分）临床试用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题：

（1）为了从样本中获取致病菌菌落，可用______   _法或_______  __法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。

（2）取该单菌落，用______   法接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。

（3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A，B，C，D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A_______；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B_____；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明____               ____；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的________。

（4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选择抗生素_______。