本原理如上图所示。如果利用基因敲除的方法，将目的基因转入小鼠胚胎干细胞，经过一系列过程可获得目的基因稳定遗传的转基因小鼠。请回答下列问题：

(1)若要切割某DNA片断，如图1所示，该限制酶能识别的碱基序列是               ，  切点在            之间。

(2)将目的基因转入小鼠胚胎干细胞后，胚胎干细胞能够发育成转基因小鼠，所依据的生物学原理是         。胚胎干细胞在体外培养的条件下可以增殖而不发生           ，培养的环境条件除了充足的营养、充足的气体、适宜的温度和酸碱度外，还必须有的是             。胚胎干细胞还可通过体外定向诱导，培育出人造                 。

(3)从胚胎干细胞转化到获得目的基因纯合子，配合基因检测，最少需要       代。育种过程是：检测目的基因→                    →从中选出目的基因纯合的个体。

基因敲除是应用DNA重组原理发展起来的一门新兴技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA重组原理，用设计好的DNA片段替代动物细胞内的基因片段，从而达到基因敲除的目的。在后基因组时代，研究的重点是利用转基因动物或基因敲除的动物研究基因的功能，运用基因重组进行基因敲除依然是构建基因敲除动物模型中最普遍的使用方法，其基本原理如下图所示。请回答下列问题：

（1）在把目的基因导入受体细胞前，应选择一个合适的　　　　　　与之结合，在这一过程中所需要的工具酶是限制性内切酶和　　　　　　      　。
（2）如果要获得一只含目的基因的小鼠，则一般是通过病毒感染或显微注射技术将目的基因导入受体细胞，选择的受体细胞应该是                  。
（3）在此类基因操作中，通常可以用水母的发光蛋白作为标记物。水母发光蛋白有发光环，能在一定条件下发出荧光，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记，在转基因技术中，这种蛋白质的作用是（   ）

A．促使目的基因导入受体细胞中	B．促使目的基因在寄主细胞中复制
C．使目的基因的转移容易被检测出来	D．使目的基因容易表达成功

（4）按上述操作获得的转基因小鼠是杂合子，如果想获得一个目的基因纯合的个体，以研究该种动物体内靶基因的功能，应该如何进行下一步实验？                                  
                                                                                 

基因敲除是应用DNA重组原理发展起来的一门新兴技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA重组原理，用设计好的DNA片段替代动物细胞内的基因片段，从而达到基因敲除的目的。在后基因组时代，研究的重点是利用转基因动物或基因敲除的动物研究基因的功能，运用基因重组进行基因敲除依然是构建基因敲除动物模型中最普遍的使用方法，其基本原理如下图所示。请回答下列问题：

（1）在把目的基因导入受体细胞前，应选择一个合适的　　　　　　与之结合，在这一过程中所需要的工具酶是限制性内切酶和　　　　　　　。

（2）如果要获得一只含目的基因的小鼠，则一般是通过病毒感染或显微注射技术将目的基因导入受体细胞，选择的受体细胞应该是         。

（3）在此类基因操作中，通常可以用水母的发光蛋白作为标记物。水母发光蛋白有发光环，能在一定条件下发出荧光，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记，在转基因技术中，这种蛋白质的作用是（    ）

A．促使目的基因导入受体细胞中        B．促使目的基因在寄主细胞中复制

C．使目的基因的转移容易被检测出来    D．使目的基因容易表达成功

（4）按上述操作获得的转基因小鼠是杂合子，如果想获得一个目的基因纯合的个体，以研究该种动物体内靶基因的功能，应该如何进行下一步实验？

 

 

 

基因敲除是应用DNA重组原理发展起来的一门新兴技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA重组原理，用设计好的DNA片段替代动物细胞内的基因片段，从而达到基因敲除的目的。在后基因组时代，研究的重点是利用转基因动物或基因敲除的动物研究基因的功能，运用基因重组进行基因敲除依然是构建基因敲除动物模型中最普遍的使用方法，其基本原理如下图所示。请回答下列问题：

（1）在把目的基因导入受体细胞前，应选择一个合适的　　　　　　与之结合，在这一过程中所需要的工具酶是限制性内切酶和　　　　　　       　。

（2）如果要获得一只含目的基因的小鼠，则一般是通过病毒感染或显微注射技术将目的基因导入受体细胞，选择的受体细胞应该是                   。

（3）在此类基因操作中，通常可以用水母的发光蛋白作为标记物。水母发光蛋白有发光环，能在一定条件下发出荧光，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记，在转基因技术中，这种蛋白质的作用是（    ）

A．促使目的基因导入受体细胞中     B．促使目的基因在寄主细胞中复制

C．使目的基因的转移容易被检测出来 D．使目的基因容易表达成功

（4）按上述操作获得的转基因小鼠是杂合子，如果想获得一个目的基因纯合的个体，以研究该种动物体内靶基因的功能，应该如何进行下一步实验？                                  

                                                                                 

 

基因敲除是应用DNA重组原理发展起来的一门新兴技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA重组原理，用设计好的DNA片段替代动物细胞内的基因片段，从而达到基因敲除的目的。在后基因组时代，研究的重点是利用转基因动物或基因敲除的动物研究基因的功能，运用基因重组进行基因敲除依然是构建基因敲除动物模型中最普遍的使用方法，其基本原理如下图所示。请回答下列问题：

（1）在把目的基因导入受体细胞前，应选择一个合适的　　　　　　与之结合，在这一过程中所需要的工具酶是限制性内切酶和　　　　　　       　。

（2）如果要获得一只含目的基因的小鼠，则一般是通过病毒感染或显微注射技术将目的基因导入受体细胞，选择的受体细胞应该是                   。

（3）在此类基因操作中，通常可以用水母的发光蛋白作为标记物。水母发光蛋白有发光环，能在一定条件下发出荧光，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记，在转基因技术中，这种蛋白质的作用是（    ）

A．促使目的基因导入受体细胞中     B．促使目的基因在寄主细胞中复制

C．使目的基因的转移容易被检测出来 D．使目的基因容易表达成功

（4）按上述操作获得的转基因小鼠是杂合子，如果想获得一个目的基因纯合的个体，以研究该种动物体内靶基因的功能，应该如何进行下一步实验？                                  

                                                                                 

基因敲除是应用DNA重组原理发展起来的一门新兴技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA重组原理，用设计好的DNA片段替代动物细胞内的基因片段，从而达到基因敲除的目的。在后基因组时代，研究的重点是利用转基因动物或基因敲除的动物研究基因的功能，运用基因重组进行基因敲除依然是构建基因敲除动物模型中最普遍的使用方法，其基本原理如下图所示。请回答下列问题：

（1）在把目的基因导入受体细胞前，应选择一个合适的　　　　　　与之结合，在这一过程中所需要的工具酶是限制性内切酶和　　　　　　　。

（2）如果要获得一只含目的基因的小鼠，则一般是通过病毒感染或显微注射技术将目的基因导入受体细胞，选择的受体细胞应该是         。

（3）在此类基因操作中，通常可以用水母的发光蛋白作为标记物。水母发光蛋白有发光环，能在一定条件下发出荧光，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记，在转基因技术中，这种蛋白质的作用是（    ）

A．促使目的基因导入受体细胞中        B．促使目的基因在寄主细胞中复制

C．使目的基因的转移容易被检测出来    D．使目的基因容易表达成功

（4）按上述操作获得的转基因小鼠是杂合子，如果想获得一个目的基因纯合的个体，以研究该种动物体内靶基因的功能，应该如何进行下一步实验？

基因敲除是应用DNA重组原理发展起来的一门新兴技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA重组原理，用设计好的DNA片段替代动物细胞内的基因片段，从而达到基因敲除的目的。在后基因组时代，研究的重点是利用转基因动物或基因敲除的动物研究基因的功能，运用基因重组进行基因敲除依然是构建基因敲除动物模型中最普遍的使用方法，其基本原理如下图所示。请回答下列问题：

（1）在把目的基因导入受体细胞前，应选择一个合适的　　　　　　与之结合，在这一过程中所需要的工具酶是限制性内切酶和　　　　　　　。
（2）如果要获得一只含目的基因的小鼠，则一般是通过病毒感染或显微注射技术将目的基因导入受体细胞，选择的受体细胞应该是        。
（3）在此类基因操作中，通常可以用水母的发光蛋白作为标记物。水母发光蛋白有发光环，能在一定条件下发出荧光，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记，在转基因技术中，这种蛋白质的作用是（   ）

A．促使目的基因导入受体细胞中	B．促使目的基因在寄主细胞中复制
C．使目的基因的转移容易被检测出来	D．使目的基因容易表达成功

（4）按上述操作获得的转基因小鼠是杂合子，如果想获得一个目的基因纯合的个体，以研究该种动物体内靶基因的功能，应该如何进行下一步实验？