下面是一组关于酶的制备及应用的知识，请回答有关问题：

（1）提取细胞内的酶，一般方法是经过_____________________________________制备成粗酶液，提取胰蛋白酶可以直接从______________中提取。

（2）汇源果汁在口感和澄清度上比自制的果汁好是因为生产时使用了________________，工业上通常采用_______________________________________来生产该物质。

（3）清洗衣物上的汗渍、血渍等污物通常使用加_____________________的洗衣粉，使用该种洗衣粉时，最适宜的温度是_______________。

（4）所谓固定化酶就是将___________________，其最大优点是_______________。

Ⅰ.市场上有一种宠物猪，其背部皮毛颜色由一组复等位基因A₁、A₂和A₃控制，且A₁、A₂和A₃之间共显性（即A₁、A₂和A₃任何两个组合在一起，基因均可表达），下图表示各基因与控制酶之间的关系。据此回答以下问题：

（1）上图体现基因控制生物性状的途径之一是                                   。

（2）该宠物猪种群中关于体色共有          种基因型、纯合子有               种。

（3）分析图可知，该宠物猪种群中体色为           的个体一定为纯合子。

（4）现有一头白色公猪，如要确定其基因型可选择多头          色异性个体与之交配（假设后代数量符合统计要求）。预测结果及相应结论：

①                                                                       ；

②                                                                       ；

③                                                                       。

Ⅱ.科学家发现家蝇体内存在一种抗肿瘤蛋白（且具有抗菌能力）。这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。若临床使用发现此蛋白质对肿瘤确良好的疗效，可以通过基因工程技术导入大肠杆菌内进行大量生产。其过程大体如下：

（1）在基因工程中，获取目的基因的方法有                        （至少写出两种）。

（2）酶切此家蝇DNA分子和酶切质粒时，所用的限制酶可以不同，但是产生的粘性末端要满足                条件。

（3）将抗肿瘤基因导入大肠杆菌，并在大肠杆菌细胞内成功表达产生了抗肿瘤蛋白，由于                ，因此在短时间内就能获得大量的抗肿瘤蛋白。

（4）细胞工程也可以将抗肿瘤蛋白临床使用，下面是单克隆抗体制备过程示意图，请据图回答：

①图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是　　　　细胞，要获得能产生抗肿瘤蛋白抗体的杂交瘤细胞至少要经过           次筛选。从小鼠体内提取分离该细胞之前，给小鼠注射的特定的物质是　　　　。

②图中B过程是细胞融合，该过程需要用灭活的　　　　、聚乙二醇或电激等诱导。

Ⅰ.（15分）市场上有一种宠物猪，其背部皮毛颜色由一组复等位基因A₁、A₂和A₃控制，且A₁、A₂和A₃之间共显性（即A₁、A₂和A₃任何两个组合在一起，基因均可表达），下图表示各基因与控制酶之间的关系。据此回答以下问题：

（1）上图体现基因控制生物性状的途径之一是                                  。
（2）该宠物猪种群中关于体色共有         种基因型、纯合子有              种。
（3）分析图可知，该宠物猪种群中体色为          的个体一定为纯合子。
（4）现有一头白色公猪，如要确定其基因型可选择多头         色异性个体与之交配（假设后代数量符合统计要求）。预测结果及相应结论：
①                                                                      ；
②                                                                      ；
③                                                                      。
Ⅱ.（9分）科学家发现家蝇体内存在一种抗肿瘤蛋白（且具有抗菌能力）。这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。若临床使用发现此蛋白质对肿瘤确良好的疗效，可以通过基因工程技术导入大肠杆菌内进行大量生产。其过程大体如下：

（1）在基因工程中，获取目的基因的方法有                       （至少写出两种）。
（2）酶切此家蝇DNA分子和酶切质粒时，所用的限制酶可以不同，但是产生的粘性末端要满足               条件。
（3）将抗肿瘤基因导入大肠杆菌，并在大肠杆菌细胞内成功表达产生了抗肿瘤蛋白，由于               ，因此在短时间内就能获得大量的抗肿瘤蛋白。
（4）细胞工程也可以将抗肿瘤蛋白临床使用，下面是单克隆抗体制备过程示意图，请据图回答：

①图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是　　　　细胞，要获得能产生抗肿瘤蛋白抗体的杂交瘤细胞至少要经过          次筛选。从小鼠体内提取分离该细胞之前，给小鼠注射的特定的物质是　　　　。
②图中B过程是细胞融合，该过程需要用灭活的　　　　、聚乙二醇或电激等诱导。

Ⅰ.（15分）市场上有一种宠物猪，其背部皮毛颜色由一组复等位基因A₁、A₂和A₃控制，且A₁、A₂和A₃之间共显性（即A₁、A₂和A₃任何两个组合在一起，基因均可表达），下图表示各基因与控制酶之间的关系。据此回答以下问题：

（1）上图体现基因控制生物性状的途径之一是                                   。

（2）该宠物猪种群中关于体色共有          种基因型、纯合子有               种。

（3）分析图可知，该宠物猪种群中体色为           的个体一定为纯合子。

（4）现有一头白色公猪，如要确定其基因型可选择多头          色异性个体与之交配（假设后代数量符合统计要求）。预测结果及相应结论：

①                                                                       ；

②                                                                       ；

③                                                                       。

Ⅱ.（9分）科学家发现家蝇体内存在一种抗肿瘤蛋白（且具有抗菌能力）。这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。若临床使用发现此蛋白质对肿瘤确良好的疗效，可以通过基因工程技术导入大肠杆菌内进行大量生产。其过程大体如下：

（1）在基因工程中，获取目的基因的方法有                        （至少写出两种）。

（2）酶切此家蝇DNA分子和酶切质粒时，所用的限制酶可以不同，但是产生的粘性末端要满足                条件。

（3）将抗肿瘤基因导入大肠杆菌，并在大肠杆菌细胞内成功表达产生了抗肿瘤蛋白，由于                ，因此在短时间内就能获得大量的抗肿瘤蛋白。

（4）细胞工程也可以将抗肿瘤蛋白临床使用，下面是单克隆抗体制备过程示意图，请据图回答：

①图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是　　　　细胞，要获得能产生抗肿瘤蛋白抗体的杂交瘤细胞至少要经过           次筛选。从小鼠体内提取分离该细胞之前，给小鼠注射的特定的物质是　　　　。

②图中B过程是细胞融合，该过程需要用灭活的　　　　、聚乙二醇或电激等诱导。

(9分)为扩大可耕地面积，增加粮食产量，沿海滩涂盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐碱基因培育出了耐盐碱水稻新品系。请据图回答下列问题：

图1　转基因操作流程图

表2　几种限制酶识别序列及切割位点表
(1) 获取真核生物的基因通常采用人工合成法，通过图示中①方法合成的耐盐碱基因中是不含____________的，如果要将耐盐碱基因和质粒重组，应该在基因两侧的A和B位置除了接上以上两个结构外还需分别加入____________限制酶识别序列，这样设计的优点有利于质粒和目的基因定向连接。
(2) 过程②采用PCR技术扩增目的基因时，在PCR反应体系需加入引物Ⅰ和引物Ⅱ等物质，若目的基因扩增4代，则共用了引物Ⅰ________个。
(3) 请画出Pst Ⅰ切割DNA形成黏性末端的过程：__________________________。
(4) 图示中将基因表达载体构建完成后没有直接导入农杆菌，而是先将其导入大肠杆菌，目的是____________________。
(5) 在步骤⑤⑥过程中都需用__________________________处理两类细菌。为了确认目的基因通过⑦过程导入植物细胞中后是否成功表达，通常从分子水平进行检测的方法是用____________法。
(6) 假设该抗盐碱基因D，通过基因工程导入水稻后连接到水稻的一条染色体上，则该水稻进行减数分裂的细胞在联会时有________个D基因。

(9分)为扩大可耕地面积，增加粮食产量，沿海滩涂盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐碱基因培育出了耐盐碱水稻新品系。请据图回答下列问题：

图1　转基因操作流程图

表2　几种限制酶识别序列及切割位点表

(1) 获取真核生物的基因通常采用人工合成法，通过图示中①方法合成的耐盐碱基因中是不含____________的，如果要将耐盐碱基因和质粒重组，应该在基因两侧的A和B位置除了接上以上两个结构外还需分别加入____________限制酶识别序列，这样设计的优点有利于质粒和目的基因定向连接。

(2) 过程②采用PCR技术扩增目的基因时，在PCR反应体系需加入引物Ⅰ和引物Ⅱ等物质，若目的基因扩增4代，则共用了引物Ⅰ________个。

(3) 请画出Pst Ⅰ切割DNA形成黏性末端的过程：__________________________。

(4) 图示中将基因表达载体构建完成后没有直接导入农杆菌，而是先将其导入大肠杆菌，目的是____________________。

(5) 在步骤⑤⑥过程中都需用__________________________处理两类细菌。为了确认目的基因通过⑦过程导入植物细胞中后是否成功表达，通常从分子水平进行检测的方法是用____________法。

(6) 假设该抗盐碱基因D，通过基因工程导入水稻后连接到水稻的一条染色体上，则该水稻进行减数分裂的细胞在联会时有________个D基因。

阅读下面材料回答相关问题：
生物的多样性包括遗传多样性：每个物种都是一个独立的基因库，有机体是遗传基因的载体，可以说物种多样性包含遗传多样性，但是遗传多样性又远远超出物种多样性的范围。每一个物种是由许多个体组成，但除了孤雌生殖和一卵双生以外，没有两个个体的基因组是完全相同的．
所有的遗传多样性都发生在分子水平，并且都与核酸的理化性质紧密相连，新的变异是突变的结果，自然界中存在的变异来源于突变的积累，这些突变都经过自然选择，一些中性突变通过随机过程整合到基因组中。  
遗传多样性的测度是比较复杂的，主要包括三个方面．即染色体多态性、蛋白质多态性和DNA多态性。染色体多态性主要从染色体数目、组型及其减数分裂时的行为等方面进行研究：蛋白质的多样性一般通过两种途径分析，一是氨基酸序列分析，一是同工酶或等位酶的电泳分析：DNA多态性则主要通过RFLP(限制片断长度多态性)，DNA指数、PAPD(随机扩增多态性)、PCR(聚合酶链式反应)等进行分析。   
(1)据你所知，遗传多样性超出生物多样性范围的原因是                          。  
(2)根据上面的资料，遗传多样性产生的根本原因是         和            的结果。   
(3)“人类基因组计划”除了弄清基因的组成外，还需对不同人群的基因组成进行研究．并以此了解人类的差别，其本质上是要建立完备的人类                库。  
（4）对濒临灭绝的野生动物进行保护，重要的一条就是保护这濒临灭绝基因，人类可利用这些基因研究                          (可列举2_3条)。

阅读下面材料回答相关问题：

生物的多样性包括遗传多样性：每个物种都是一个独立的基因库，有机体是遗传基因的载体，可以说物种多样性包含遗传多样性，但是遗传多样性又远远超出物种多样性的范围。每一个物种是由许多个体组成，但除了孤雌生殖和一卵双生以外，没有两个个体的基因组是完全相同的．

所有的遗传多样性都发生在分子水平，并且都与核酸的理化性质紧密相连，新的变异是突变的结果，自然界中存在的变异来源于突变的积累，这些突变都经过自然选择，一些中性突变通过随机过程整合到基因组中。  

遗传多样性的测度是比较复杂的，主要包括三个方面．即染色体多态性、蛋白质多态性和DNA多态性。染色体多态性主要从染色体数目、组型及其减数分裂时的行为等方面进行研究：蛋白质的多样性一般通过两种途径分析，一是氨基酸序列分析，一是同工酶或等位酶的电泳分析：DNA多态性则主要通过RFLP(限制片断长度多态性)，DNA指数、PAPD(随机扩增多态性)、PCR(聚合酶链式反应)等进行分析。   

(1)据你所知，遗传多样性超出生物多样性范围的原因是                          。  

(2)根据上面的资料，遗传多样性产生的根本原因是         和            的结果。   

(3)“人类基因组计划”除了弄清基因的组成外，还需对不同人群的基因组成进行研究．并以此了解人类的差别，其本质上是要建立完备的人类                库。  

（4）对濒临灭绝的野生动物进行保护，重要的一条就是保护这濒临灭绝基因，人类可利用这些基因研究                          (可列举2_3条)。

回答有关生物技术的问题。

I、抗体的制备经历了细胞学层面和分子学层面两种合成途径的研究。下列是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图。

（1）在获取抗体之前，需要向健康人体注射特定抗原（如乙肝疫苗），并且每隔一周重复注射一次。免疫学称细胞A为              ，该细胞在人体主要介导                 免疫。

（2）过程①至②抗体的获取称为         　　   　     ，其中①是     　　　          过程，Y细胞称为                。

II、上图中，结构甲的建构可用下图1和2表示。图1表示含有目的基因的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为下表所示。

（3）若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段，其产物长度为                。

（4）若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子中分离出图1及对应的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有

       种不同长度的DNA片段。

（5）上述结构中的建构过程可知，在限制酶作用下得到的产物有多种，生产上多采用

       技术来降低目的基因分离提取的难度，也有利于限制酶的回收和再利用。

（6）若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行拼接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是     。在导入重组质粒后，为了筛选出含有重组质粒的大肠杆菌，一般需要添加      的      （固体/液体）培养基进行培养。在培养前，培养基必须先经过灭菌，所用的方法是              ；采用          的方法接种以获得单菌落后继续筛选。