PCR实验中使用的微量离心管、缓冲溶液以及蒸馏水使用前必须进行的关键步骤是

1. A.
   反复洗涤
2. B.
   用酒精擦洗
3. C.
   高压灭菌
4. D.
   在-20℃储存

PCR实验中使用的微量离心管、缓冲溶液以及蒸馏水使用前必须进行的关键步骤是

[　　]

下列操作过程的叙述中错误的是(　　)

A．PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌

B．PCR所用的缓冲液和酶应分装成小份，并在－20 ℃储存

C．PCR所用的缓冲液和酶从冰箱拿出之后，迅速融化

D．在微量离心管中添加反应成分时，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头都必须更换

下列操作过程的叙述中错误的是

(　　)

A．PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌

B．PCR所用的缓冲液和酶应分装成小份，并在－20℃储存

C．PCR所用的缓冲液和酶从冰箱拿出之后，迅速融化

D．在微量离心管中添加反应成分时，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头都必须更换

下列操作过程的叙述中错误的是(　　)

A．PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌

B．PCR所用的缓冲液和酶应分装成小份，并在－20 ℃储存

C．PCR所用的缓冲液和酶从冰箱拿出之后，迅速融化

D．在微量离心管中添加反应成分时，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头都必须更换

在生物技术实践过程中，往往需要注意某些实验步骤的操作，请将下列实验中的注意事项填写完整：

（1）在腐乳的制作时，用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用           消毒。

（2）在“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”课题中，往往需要稀释土壤溶液，为了避免杂菌污染，此过程每一步都要在           旁操作。

（3）在提取植物细胞的DNA时，需要先用洗涤剂溶解           。

（4）在花药离体培养中剥离花药时，要彻底去除           ，因为与其相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。

（5）为避免外源DNA等因素的污染，PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液和蒸馏水等在使用前必须进行           。

（6）在固定化酵母细胞中加热溶解海藻酸钠时，最好采用           的方法。

（7）在血红蛋白的提取和分离中，若红细胞的洗涤次数过少，将无法除去           。

（8）胡萝卜素提取的萃取过程应采用           加热，因为有机溶剂都是易燃物。

在生物技术实践过程中，往往需要注意某些实验步骤的操作，请将下列实验中的注意事项填写完整：

⑴在腐乳的制作时，用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用????????? 消毒；在血红蛋白的提取和分离中，若红细胞的洗涤次数过少，将无法除去????????? 。

⑵在提取植物细胞的DNA时，需要先用洗涤剂溶解???????? 。在花药离体培养中剥离花药时，要彻底去除????????? ，因为与其相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。

⑶在“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”课题中，往往需要稀释土壤溶液，为了避免杂菌污染，此过程每一步都要在????????? 旁操作。在固定化酵母细胞中加热溶解海藻酸钠时，最好采用????????? 的方法。胡萝卜素提取的萃取过程应采用????????? 加热，因为有机溶剂都是易燃物。

⑷为避免外源DNA等因素的污染，PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液和蒸馏水等在使用前必须进行?????????? 。

圆褐固氮菌是自生固氮菌，为经济有效地提高农作物产量，人们一直在努力研究、寻找固氮基因。对基因的研究常常因研究样品中DNA含量太低而难以进行，PCR技术有效地解决了这个问题。如今对基因的深入研究使人类跨入了蛋白组研究时代，从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的蛋白质是该研究要做的基本工作之一。

（1）某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌样品和酵母菌样品混在一起，已知青霉素会影响固氮菌的生长繁殖，但不影响真菌的生长繁殖。请填空完成分离这两种菌的主要实验步骤：

①分别配置                的培养基和             的培养基，分别分成两份，依次标上A、a、B、b备用；

②分别向A、B培养基接种             ；

③把接种后的培养基放在恒温箱中3d—4d；

④从A、B培养基上生长的       中挑取生长良好的菌株，分别接种到        中；

⑤                                  。

（2）用基因工程技术从经过分离、提纯的圆褐固氮菌中获取固氮基因，然后进行PCR扩增。下列表1和表2分别表示用PCR扩增固氮基因的反应体系及反应条件。

①从上表中可得出，PCR技术与DNA复制相比较，主要区别之一是               。

此外，从反应条件看，所使用的DNA聚合酶应具有__________的特点。每次循环都需要2种引物的主要原因是_______________           ________________。

②下图为第1轮循环产生的产物。请绘出以a链和b链为模板经PCR扩增的产物。

（3）在对固氮基因产物的生产研究中，需要从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的蛋白质。下图表示蛋白质提取和分离实验涉及的相关原理。

①图甲表示相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶色谱法分离的过程。试管中收集到的液体最先出现的是相对分子质量较大的蛋白质，原因是                            。

②图乙所示实验模拟电泳现象，U型管左侧的颜色逐渐变深，原因是            。