| PCR技术是在生物体外复制特定DNA片段的技术,该技术的操作步骤依次是 |
A.高温变性、中温延伸、低温复性 B.高温变性、低温复性、中温延伸 C.中温延伸、高温变性、低温复性 D.中温延伸、低温复性、高温变性 |
科目:高中生物 来源:同步题 题型:单选题
科目:高中生物 来源:0103 模拟题 题型:读图填空题
科目:高中生物 来源: 题型:
PCR技术是将某一特定DNA片段在体外酶的作用下,复制出许许多多相同片段的一种方法,利用它能快速而特异地扩增任何要求的目的基因或DNA分子片段。它的基本过程如下:
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[注图中“▄”表示每次扩增过程中需要的引物(用P代表)。每个引物含20个脱氧核苷酸,并分别与DNA片段两端碱基互补,其作用是引导合成DNA子链]请据图分析回答:
(1)PCR技术的原理是模拟生物体内__________________的过程。
(2)PCR扩增过程中对DNA片段进行高温加热处理,其目的是 ,其作用相当于细胞内__________酶的作用.
(3)在③适温延伸过程中,必需加一特定的DNA聚合酶,从图示中可判断,该酶与一般人体细胞中的DNA聚合酶相比,最主要的特点是______________。
(4)假如引物都用3H标记,从理论上计算,DNA片段经3次扩增所得的8个DNA分子中,含有3H 标记的DNA分子占 %。
(5)假定DNA片段含200对脱氧核苷酸,经3次扩增,从理论上计算,除需要引物14个外,还需要游离的脱氧核苷酸 个。
科目:高中生物 来源: 题型:
PCR技术是将某一特定DNA片段在体外酶的作用下,在高温环境中复制出许许多多相同片段的一种方法,利用它能快速而特异地扩增任何要求的目的基因或DNA分子片段。下列表1和表2分别表示用PCR扩增固氮基因的反应体系及反应条件。
表1
| PCR反应体系 | 50 μL |
| 缓冲液 | 5 μL |
| 脱氧核苷酸 | 1 μL |
| 引物A | 0.5 μL |
| 引物B | 0.5 μL |
| DNA聚合酶 | 0.5 μL |
| 模板DNA | 1~2 μL |
| 加去离子水补足至50 μL |
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表2
| 反应条件 | 温度 | 时间 |
| 变性 | 95 ℃ | 30 s |
| 复性 | 55 ℃ | 30 s |
| 延伸 | 72 ℃ | 1 min |
| 30个循环后 | 适宜 | 5~10 min |
| 保温 | 4 ℃ | 2 h |
(1)PCR技术的原理是模拟生物体内____________的过程。从上表中可得出,PCR技术与DNA复制相比较,主要区别之一是_____________________________________。此外,从反应条件看,所使用的DNA聚合酶应具有________的特点。
(2)PCR扩增过程中对DNA片段进行高温加热处理,其目的是____________________________________,其作用相当于细胞内________酶的作用。每次循环都需要2种引物的主要原因是________________________________________。
(3)下图为第1轮循环产生的产物。请绘出以a链和b链为模板经PCR扩增的产物。
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科目:高中生物 来源:2007年饶平二中高三级生物科适应性综合测试 题型:022
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科目:高中生物 来源: 题型:
PCR技术是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术,如图表示合成过程,请据图分析回答问题。
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(1)A过程高温使DNA变性解旋,对该过程的原理叙述,正确的是( )。
A.该过程用耐高温的解旋酶破坏氢键
B.该过程用限制酶破坏磷酸二酯键
C.该过程不需要解旋酶的作用
D.该过程与人体细胞的过程完全相同
(2)C过程要用到的酶是________,这种酶在高温下仍保持活性,因此在PCR扩增时可以加入________次,________(需要、不需要)再添加。PCR反应除提供酶外,还需要满足的基本条件有__________________________________________________________________。
(3)如果把模板DNA的两条链用15N标记,游离的脱氧核苷酸不做标记,控制“95 ℃~55 ℃~72 ℃”温度循环3次,则在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占________。
科目:高中生物 来源:安徽省期中题 题型:单选题
科目:高中生物 来源:海南省期中题 题型:读图填空题
科目:高中生物 来源: 题型:
PCR(多聚酶链式反应)技术是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术,下图表示合成过程,请据图分析回答:
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(1)A过程高温使DNA变性解旋,对该过程的原理叙述正确的是( )
A.该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键
B.该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键
C.该过程不需要解旋酶的作用
D.该过程与人体细胞的过程完全相同
(2)C过程要用到的酶是________。这种酶在高温下仍保持活性,因此在PCR扩增时可以________加入,________________________(需要/不需要)再添加。PCR反应除提供酶外,还需要满足的基本条件有________________________________________________________。
(3)如果把模板DNA的两条链用N15标记,游离的脱氧核苷酸不做标记,控制“95 ℃-55 ℃-72 ℃”温度循环3次,则在形成 的子代DNA中含有N15标记的DNA占________。
(4)如果模板DNA分子共有a个碱基对,其中含有胞嘧啶m个,则该DNA复制10次,需要加入胸腺嘧啶脱氧核苷酸__________个。
(5)PCR中由碱基错配引起的变异属于______________________________________。
假设对一个DNA进行扩增,第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配,则扩增若干次后检测所用DNA的扩增片段,与原DNA相应片段相同的占________。
科目:高中生物 来源: 题型:
PCR(多聚酶链式反应)技术是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术,下图表示合成过程,请据图分析回答:
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(1)A过程高温使DNA变性解旋,对该过程的原理叙述正确的是( )
A.该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键
B.该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键
C.该过程不需要解旋酶的作用
D.该过程与人体细胞的过程完全相同
(2)C过程要用到的酶是________。这种酶在高温下仍保持活性,因此在PCR扩增时可以________加入,________________________(需要/不需要)再添加。PCR反应除提供酶外,还需要满足的基本条件有________________________________________________________。
(3)如果把模板DNA的两条链用N15标记,游离的脱氧核苷酸不做标记,控制“95 ℃-55 ℃-72 ℃”温度循环3次,则在形成 的子代DNA中含有N15标记的DNA占________。
(4)如果模板DNA分子共有a个碱基对,其中含有胞嘧啶m个,则该DNA复制10次,需要加入胸腺嘧啶脱氧核苷酸__________个。
(5)PCR中由碱基错配引起的变异属于______________________________________。
假设对一个DNA进行扩增,第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配,则扩增若干次后检测所用DNA的扩增片段,与原DNA相应片段相同的占________。
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