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PCR技术是在生物体外复制特定DNA片段的技术,该技术的操作步骤依次是

A.高温变性、中温延伸、低温复性
B.高温变性、低温复性、中温延伸
C.中温延伸、高温变性、低温复性
D.中温延伸、低温复性、高温变性
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科目:高中生物 来源:同步题 题型:单选题

PCR技术是在生物体外复制特定DNA片段的技术,该技术的操作步骤依次是
[     ]
A.高温变性、中温延伸、低温复性
B.高温变性、低温复性、中温延伸
C.中温延伸、高温变性、低温复性
D.中温延伸、低温复性、高温变性

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科目:高中生物 来源:0103 模拟题 题型:读图填空题

PCR技术是将某一特定DNA片段在体外酶的作用下,复制出许许多多相同片段的一种方法,利用它能快速而特异地扩增任何要求的目的基因或DNA分子片段。它的基本过程如下:
[注图中“▄”表示每次扩增过程中需要的引物(用P代表)。每个引物含20个脱氧核苷酸,并分别与DNA片段两端碱基互补,其作用是引导合成DNA子链]请据图分析回答:
(1)PCR技术的原理是模拟生物体内______________________的过程。
(2)PCR扩增过程中对DNA片段进行高温加热处理,其目的是_________,其作用相当于细胞内_________酶的作用.
(3)在③适温延伸过程中,必需加一特定的DNA聚合酶,从图示中可判断,该酶与一般人体细胞中的DNA聚合酶相比,最主要的特点是_________________________。
(4)假如引物都用3H标记,从理论上计算,DNA片段经3次扩增所得的8个DNA分子中,含有3H 标记的DNA分子占__________%。
(5)假定DNA片段含200对脱氧核苷酸,经3次扩增,从理论上计算,除需要引物14个外,还需要游离的脱氧核苷酸________________个。

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科目:高中生物 来源: 题型:

PCR技术是将某一特定DNA片段在体外酶的作用下,复制出许许多多相同片段的一种方法,利用它能快速而特异地扩增任何要求的目的基因或DNA分子片段。它的基本过程如下:

[注图中“▄”表示每次扩增过程中需要的引物(用P代表)。每个引物含20个脱氧核苷酸,并分别与DNA片段两端碱基互补,其作用是引导合成DNA子链]请据图分析回答:

(1)PCR技术的原理是模拟生物体内__________________的过程。

(2)PCR扩增过程中对DNA片段进行高温加热处理,其目的是                     ,其作用相当于细胞内__________酶的作用.

(3)在③适温延伸过程中,必需加一特定的DNA聚合酶,从图示中可判断,该酶与一般人体细胞中的DNA聚合酶相比,最主要的特点是______________。

(4)假如引物都用3H标记,从理论上计算,DNA片段经3次扩增所得的8个DNA分子中,含有3H 标记的DNA分子占         %。

(5)假定DNA片段含200对脱氧核苷酸,经3次扩增,从理论上计算,除需要引物14个外,还需要游离的脱氧核苷酸           个。

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科目:高中生物 来源: 题型:

PCR技术是将某一特定DNA片段在体外酶的作用下,在高温环境中复制出许许多多相同片段的一种方法,利用它能快速而特异地扩增任何要求的目的基因或DNA分子片段。下列表1和表2分别表示用PCR扩增固氮基因的反应体系及反应条件。

表1

PCR反应体系

50 μL

缓冲液

5 μL

脱氧核苷酸

1 μL

引物A

0.5 μL

引物B

0.5 μL

DNA聚合酶

0.5 μL

模板DNA  

1~2 μL

加去离子水补足至50 μL

 

       表2

反应条件

温度

时间

变性

95 ℃

30 s

复性

55 ℃

30 s

延伸

72 ℃

1 min

30个循环后

适宜

5~10 min

保温

4 ℃

2 h

 

(1)PCR技术的原理是模拟生物体内____________的过程。从上表中可得出,PCR技术与DNA复制相比较,主要区别之一是_____________________________________。此外,从反应条件看,所使用的DNA聚合酶应具有________的特点。

(2)PCR扩增过程中对DNA片段进行高温加热处理,其目的是____________________________________,其作用相当于细胞内________酶的作用。每次循环都需要2种引物的主要原因是________________________________________。

(3)下图为第1轮循环产生的产物。请绘出以a链和b链为模板经PCR扩增的产物。

 

 

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科目:高中生物 来源:2007年饶平二中高三级生物科适应性综合测试 题型:022

PCR技术是把某一DNA片段在体外酶的作用下,合成许许多多相同片段的一种方法,利用它能快速而特异的扩增任何要求的目的或DNA分子片段;电泳技术则是在外电场作用下,利用分子携带的净电荷不同,把待测分子的混合物放在一定的介质(如琼脂糖凝胶)中进行分离和分析的实验技术,利用它可分离氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等物质和作亲子法学鉴定。下图中A~D是电泳装置及相应电泳结果。

请回答:

(1)

电泳与叶绿体色素分离采用的纸层析法比较,后者使用的介质是________。电泳过程中分子的迁移速率除与本身所带净电荷的多少有关外,你认为还受什么因素影响(至少列出一种)?________。

(2)

PCR技术能把某一DNA片段进行扩增,是依据什么原理?________。

(3)

图C是把含有21个氨基酸的多肽进行水解,得到的氨基酸混合物进行电泳的结果,故可推知该多肽是由________种氨基酸构成的。

(4)

图D通过提取某小孩和其母亲,以及待测定四位男性的DNA,分别由酶处理后,生成含有若干DNA片段,并已进行扩增得到的混合物,然后进行电泳所得到的一组DNA指纹图谱,请分析:谁是该小孩真正生物学上的父亲?为什么?

(5)

下面是PCR的反应体系及反应条件,请据此回答:

①请指出DNA分子复制所需的条件是:________________________________

与细胞核中DNA分子复制相比,95℃条件下变性30s的目的是:________

反应体系中的缓冲液相当于细胞中的________

②如果有反应体系中加入模板DNA分子100个,则经过30个循环后,DNA分子的数量将达到________个。

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科目:高中生物 来源: 题型:

PCR技术是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术,如图表示合成过程,请据图分析回答问题。

(1)A过程高温使DNA变性解旋,对该过程的原理叙述,正确的是(  )。

A.该过程用耐高温的解旋酶破坏氢键

B.该过程用限制酶破坏磷酸二酯键

C.该过程不需要解旋酶的作用

D.该过程与人体细胞的过程完全相同

(2)C过程要用到的酶是________,这种酶在高温下仍保持活性,因此在PCR扩增时可以加入________次,________(需要、不需要)再添加。PCR反应除提供酶外,还需要满足的基本条件有__________________________________________________________________。

(3)如果把模板DNA的两条链用15N标记,游离的脱氧核苷酸不做标记,控制“95 ℃~55 ℃~72 ℃”温度循环3次,则在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占________。

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科目:高中生物 来源:安徽省期中题 题型:单选题

多聚酶链式反应(PCR技术)是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术,由高温变性、低温复性及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增。下列关于PCR技术叙述不正确的是
[     ]
A.原理与细胞内DNA复制的原理相同
B.需要引物、四种脱氧核苷酸、能量、解旋酶、Taq酶
C.需要精确的控制温度
D.可以在PCR扩增仪自动完成

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科目:高中生物 来源:海南省期中题 题型:读图填空题

PCR技术(聚合酶链式反应)是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术,下图表示合成过程,请据图分析回答:  
(1)A过程高温使DNA变性解旋,对该过程的原理叙述正确的是:_________。
A.该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键  B.该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键
C.该过程不需要解旋酶的作用  D.该过程与人体细胞的过程完全相同
(2)从图中可知,催化C过程的酶是________,它与正常细胞内的酶区别是_____;PCR反应除提供酶、DNA模板、通过控制温度使DNA复制在体外反复进行外,还需要满足的两个基本条件是__________。
(3)如果把模板DNA的两条链用15N标记,游离的脱氧核苷酸不做标记,控制“94℃—55℃—72℃”温度循环3次,则在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占_________。如果模板DNA分子共有a个碱基对,其中含有胞嘧啶m个,则该DNA复制10次,需要加入胸腺嘧啶脱氧核苷酸___________个。

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科目:高中生物 来源: 题型:

PCR(多聚酶链式反应)技术是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术,下图表示合成过程,请据图分析回答:

(1)A过程高温使DNA变性解旋,对该过程的原理叙述正确的是(  )

A.该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键

B.该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键

C.该过程不需要解旋酶的作用

D.该过程与人体细胞的过程完全相同

(2)C过程要用到的酶是________。这种酶在高温下仍保持活性,因此在PCR扩增时可以________加入,________________________(需要/不需要)再添加。PCR反应除提供酶外,还需要满足的基本条件有________________________________________________________。

(3)如果把模板DNA的两条链用N15标记,游离的脱氧核苷酸不做标记,控制“95 ℃-55 ℃-72 ℃”温度循环3次,则在形成 的子代DNA中含有N15标记的DNA占________。

(4)如果模板DNA分子共有a个碱基对,其中含有胞嘧啶m个,则该DNA复制10次,需要加入胸腺嘧啶脱氧核苷酸__________个。

(5)PCR中由碱基错配引起的变异属于______________________________________。

假设对一个DNA进行扩增,第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配,则扩增若干次后检测所用DNA的扩增片段,与原DNA相应片段相同的占________。

 

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科目:高中生物 来源: 题型:

PCR(多聚酶链式反应)技术是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术,下图表示合成过程,请据图分析回答:

(1)A过程高温使DNA变性解旋,对该过程的原理叙述正确的是(  )

A.该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键

B.该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键

C.该过程不需要解旋酶的作用

D.该过程与人体细胞的过程完全相同

(2)C过程要用到的酶是________。这种酶在高温下仍保持活性,因此在PCR扩增时可以________加入,________________________(需要/不需要)再添加。PCR反应除提供酶外,还需要满足的基本条件有________________________________________________________。

(3)如果把模板DNA的两条链用N15标记,游离的脱氧核苷酸不做标记,控制“95 ℃-55 ℃-72 ℃”温度循环3次,则在形成 的子代DNA中含有N15标记的DNA占________。

(4)如果模板DNA分子共有a个碱基对,其中含有胞嘧啶m个,则该DNA复制10次,需要加入胸腺嘧啶脱氧核苷酸__________个。

(5)PCR中由碱基错配引起的变异属于______________________________________。

假设对一个DNA进行扩增,第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配,则扩增若干次后检测所用DNA的扩增片段,与原DNA相应片段相同的占________。

 

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