（16分）请回答下列问题：
Ⅰ.疫苗对预防传染病具有重要意义。以下是制备禽流感疫苗的方案之一：

（1）此种方案中应用了         技术。步骤①所代表的过程是         ，需要       酶。步骤②需使用              酶和               酶。步骤③可用          处理大肠杆菌，以增加大肠杆菌细胞壁的通透性。以上①②③④步骤中涉及碱基互补配对的步骤是          
     。检验Q蛋白的免疫反应特性，可用 Q蛋白与禽流感康复的鸡的血清中的           进行特异性反应试验。
（2）对于现在很多国家大范围流行的甲型H1N1流感，有人建议接种人流感疫苗，接种人流感疫苗能够预防甲型H₁N₁流感的条件之一是：甲型H1N1病毒和人流感病毒具有相同的       。
（3）下面是在上述过程中用到的四种不同质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，amp为氨苄青霉素抗性基因，tet为四环素抗性基因，箭头表示同一种限制性内切酶的酶切位点。下列有关叙述正确的是（    ）
_{w.@w.w.k.&s.5*u.c.o~m}
A．基因amp和tet是一对等位基因，常作为基因工程中的标记基因
B．质粒指细菌细胞中能自我复制的小型环状的DNA和动植物病毒的DNA
C．限制性内切酶的作用部位是DNA分子中特定的两个核苷酸之间的氢键
D．用质粒4将目的基因导入大肠杆菌，该菌不能在含四环素的培养基上生长
（4）目前临床上对乙肝病毒（HBV）感染的检测主要有两类：血清标志物检测和病毒核酸检测。后者检测方法是利用DNA分子杂交的原理，直接检查血液中的      ，该方法具有更高的特异性和敏感性。
Ⅱ. 下图是生活在适宜环境中的C₃植物光合作用部分过程图解，其中A、B、C表示三种化合物，a、b表示两个生理过程。

（1）该过程发生的场所在叶绿体的         。
（2）C物质既可以作为b过程的还原剂，又为b过程进行提供           。
（3）形成ATP和C物质时需要的能量是由                       将光能转换成的电能。
（4）若将植物突然转移到高温、强光照、干燥的环境中，叶片气孔将逐渐关闭，此时叶肉细胞内B物质含量的变化是               。
（5）将该植物的一叶片置于恒温的密闭小室内，在适宜的CO₂浓度、光照条件下测定叶片光合作用的强度（以CO₂的吸收速率表示），测定结果如下图，若降低光照强度后重新测定，请在原图中用虚线表示出最可能的测定结果（注：参考原曲线中的a、b点标出新曲线中的a’b’点）。_{w.@w.w.k.&s.5*u.c.o~m}

请回答下列问题：

Ⅰ.疫苗对预防传染病具有重要意义。以下是制备禽流感疫苗的方案之一：

（1）此种方案中应用了          技术。步骤①所代表的过程是          ，需要        酶。步骤②需使用               酶和                酶。步骤③可用           处理大肠杆菌，以增加大肠杆菌细胞壁的通透性。以上①②③④步骤中涉及碱基互补配对的步骤是          

      。检验Q蛋白的免疫反应特性，可用 Q蛋白与禽流感康复的鸡的血清中的            进行特异性反应试验。

（2）对于现在很多国家大范围流行的甲型H1N1流感，有人建议接种人流感疫苗，接种人流感疫苗能够预防甲型H₁N₁流感的条件之一是：甲型H1N1病毒和人流感病毒具有相同的        。

（3）下面是在上述过程中用到的四种不同质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，amp为氨苄青霉素抗性基因，tet为四环素抗性基因，箭头表示同一种限制性内切酶的酶切位点。下列有关叙述正确的是（     ）

_{w.@w.w.k.&s.5*u.c.o~m}

A．基因amp和tet是一对等位基因，常作为基因工程中的标记基因

B．质粒指细菌细胞中能自我复制的小型环状的DNA和动植物病毒的DNA

C．限制性内切酶的作用部位是DNA分子中特定的两个核苷酸之间的氢键

D．用质粒4将目的基因导入大肠杆菌，该菌不能在含四环素的培养基上生长

（4）目前临床上对乙肝病毒（HBV）感染的检测主要有两类：血清标志物检测和病毒核酸检测。后者检测方法是利用DNA分子杂交的原理，直接检查血液中的       ，该方法具有更高的特异性和敏感性。

Ⅱ. 下图是生活在适宜环境中的C₃植物光合作用部分过程图解，其中A、B、C表示三种化合物，a、b表示两个生理过程。

（1）该过程发生的场所在叶绿体的          。

（2）C物质既可以作为b过程的还原剂，又为b过程进行提供            。

（3）形成ATP和C物质时需要的能量是由                        将光能转换成的电能。

（4）若将植物突然转移到高温、强光照、干燥的环境中，叶片气孔将逐渐关闭，此时叶肉细胞内B物质含量的变化是                。

（5）将该植物的一叶片置于恒温的密闭小室内，在适宜的CO₂浓度、光照条件下测定叶片光合作用的强度（以CO₂的吸收速率表示），测定结果如下图，若降低光照强度后重新测定，请在原图中用虚线表示出最可能的测定结果（注：参考原曲线中的a、b点标出新曲线中的a’b’点）。_{w.@w.w.k.&s.5*u.c.o~m}

（6分）请回答下列有关温度与酶活性的问题：
（1）温度对唾液淀粉酶活性影响的实验：
将盛有2mL唾液淀粉酶溶液的试管和盛有2mL可溶性淀粉溶液的试管编为一组，共四组。在0℃、20℃、37℃和100℃水浴中各放入一组，维持各自的温度5min。然后，将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中，摇匀后继续放回原来的温度下保温。
把                              的时间作为本实验的起始时间记录下来。再每隔一分钟，取一滴混合液滴在盛有碘液的点滴板上进行观察，记录每种混合液蓝色消失的时间。通过比较混合液中        消失所需时间的长短来推知酶的活性。预计        温度下混合液因其中的酶失去活性蓝色不会消失。
（2）科研人员通过蛋白质工程来设计改变酶的构象。在研究溶菌酶的过程中，得到了多种突变酶，测得酶50%发生变性时的温度（Tm），部分结果见下表：

请回答下列（1）、（2）小题。
（1）已知放线菌素D是RNA合成抑制剂。右图是根据海胆受精卵在有放线菌素D和无放线菌素D存在情况下培养时，对¹⁴C标记的缬氨酸参与蛋白质合成的实验结果绘制的曲线图。请据图回答有关问题：

①直接参与将¹⁴C—缬氨酸掺入新合成蛋白质的细胞器是          ，该过程在生物学上
称为         ，所依赖的模板是         分子，合成该分子所需要的原料是                   。
②从受精开始到10小时之内，蛋白质合成所依赖的模板分子的来源是       。（从下图四个选项中选择，用字母代表）

（6分）请回答下列有关温度与酶活性的问题：

（1）温度对唾液淀粉酶活性影响的实验：

  将盛有2mL唾液淀粉酶溶液的试管和盛有2mL可溶性淀粉溶液的试管编为一组，共四组。在0℃、20℃、37℃和100℃水浴中各放入一组，维持各自的温度5min。然后，将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中，摇匀后继续放回原来的温度下保温。

把                               的时间作为本实验的起始时间记录下来。再每隔一分钟，取一滴混合液滴在盛有碘液的点滴板上进行观察，记录每种混合液蓝色消失的时间。通过比较混合液中         消失所需时间的长短来推知酶的活性。预计         温度下混合液因其中的酶失去活性蓝色不会消失。

（2）科研人员通过蛋白质工程来设计改变酶的构象。在研究溶菌酶的过程中，得到了多种突变酶，测得酶50%发生变性时的温度（Tm），部分结果见下表：

       （注：Cys上角的数字表示半胱氨酸在肽链的位置）

溶菌酶热稳定性的提高，是通过改变                       和增加        得以实现的。从热稳定性高的酶的氨基酸序列出发，利用             方法获得目的基因，通过基因工程的手段，可以生产自然界中不存在的蛋白质。

（6分）请回答下列有关温度与酶活性的问题：

（1）温度对唾液淀粉酶活性影响的实验：

  将盛有2mL唾液淀粉酶溶液的试管和盛有2mL可溶性淀粉溶液的试管编为一组，共四组。在0℃、20℃、37℃和100℃水浴中各放入一组，维持各自的温度5min。然后，将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中，摇匀后继续放回原来的温度下保温。

把                               的时间作为本实验的起始时间记录下来。再每隔一分钟，取一滴混合液滴在盛有碘液的点滴板上进行观察，记录每种混合液蓝色消失的时间。通过比较混合液中         消失所需时间的长短来推知酶的活性。预计         温度下混合液因其中的酶失去活性蓝色不会消失。

（2）科研人员通过蛋白质工程来设计改变酶的构象。在研究溶菌酶的过程中，得到了多种突变酶，测得酶50%发生变性时的温度（Tm），部分结果见下表：

       （注：Cys上角的数字表示半胱氨酸在肽链的位置）

溶菌酶热稳定性的提高，是通过改变                       和增加        得以实现的。从热稳定性高的酶的氨基酸序列出发，利用             方法获得目的基因，通过基因工程的手段，可以生产自然界中不存在的蛋白质。

请回答下列（1）、（2）小题。

（1）已知放线菌素D是RNA合成抑制剂。右图是根据海胆受精卵在有放线菌素D和无放线菌素D存在情况下培养时，对¹⁴C标记的缬氨酸参与蛋白质合成的实验结果绘制的曲线图。请据图回答有关问题：

①直接参与将¹⁴C—缬氨酸掺入新合成蛋白质的细胞器是           ，该过程在生物学上

称为          ，所依赖的模板是          分子，合成该分子所需要的原料是                    。

②从受精开始到10小时之内，蛋白质合成所依赖的模板分子的来源是        。（从下图四个选项中选择，用字母代表）

A．未受精卵原有的     B．受精卵新合成的   C．精子提供的 D．无法确定

③受精10小时以后，海胆细胞内新合成蛋白质所依赖的模板主要是      （答案从上小题四个选项中选择，用字母代表），作出此判断的依据是

                                                                   。

（2）鸡的输卵管细胞合成卵清蛋白，成红细胞合成β珠蛋白，胰岛细胞合成胰岛素，这些细胞都是在个体发育过程中逐渐产生的，因此早期人们推测细胞的这种分化是由于在发育过程中遗传物质的选择性丢失所致。分子生物学技术发展起来后，科学工作者用编码上述三种蛋白的基因分别作探针，对三种细胞中提取的总DNA的限制性内切酶的酶切片段和三种细胞的总RNA分别作分子杂交实验，结果如下表：

       注：“+”阳性结果（表示杂交过程中有杂合双链）

       “－”阴性结果（表示杂交过程中有游离的单链）

①上述实验结果说明：早期人们认为细胞的分化是由于在发育过程中遗传物质的选择性丢失所致，据此实验，你认为这种推测          （填“成立”或“不成立”），理由是          

                                                      。而细胞发育的不同阶段合成不同的蛋白质是                 　　　　　　　　       的结果。同一生物不同类型的细胞具有不同的形态结构，各自执行特定的生理功能，其直接原因主要是由                    分子决定的，可以说这类分子是一切生命活动的体现者。

②卵清蛋白中富含人体所需的多种必需氨基酸。为开辟的食物来源，除了从日常禽蛋类食物中获取，还有望通过生物工程中的           和             利用大肠杆菌或酵母菌生产大量的卵清蛋白。

请回答下列（1）、（2）小题。

（1）已知放线菌素D是RNA合成抑制剂。右图是根据海胆受精卵在有放线菌素D和无放线菌素D存在情况下培养时，对¹⁴C标记的缬氨酸参与蛋白质合成的实验结果绘制的曲线图。请据图回答有关问题：

①直接参与将¹⁴C—缬氨酸掺入新合成蛋白质的细胞器是           ，该过程在生物学上

称为          ，所依赖的模板是          分子，合成该分子所需要的原料是                    。

②从受精开始到10小时之内，蛋白质合成所依赖的模板分子的来源是        。（从下图四个选项中选择，用字母代表）

A．未受精卵原有的     B．受精卵新合成的   C．精子提供的 D．无法确定

③受精10小时以后，海胆细胞内新合成蛋白质所依赖的模板主要是      （答案从上小题四个选项中选择，用字母代表），作出此判断的依据是

                                                                   。

（2）鸡的输卵管细胞合成卵清蛋白，成红细胞合成β珠蛋白，胰岛细胞合成胰岛素，这些细胞都是在个体发育过程中逐渐产生的，因此早期人们推测细胞的这种分化是由于在发育过程中遗传物质的选择性丢失所致。分子生物学技术发展起来后，科学工作者用编码上述三种蛋白的基因分别作探针，对三种细胞中提取的总DNA的限制性内切酶的酶切片段和三种细胞的总RNA分别作分子杂交实验，结果如下表：

       注：“+”阳性结果（表示杂交过程中有杂合双链）

       “－”阴性结果（表示杂交过程中有游离的单链）

①上述实验结果说明：早期人们认为细胞的分化是由于在发育过程中遗传物质的选择性丢失所致，据此实验，你认为这种推测          （填“成立”或“不成立”），理由是          

                                                      。而细胞发育的不同阶段合成不同的蛋白质是                 　　　　　　　　       的结果。同一生物不同类型的细胞具有不同的形态结构，各自执行特定的生理功能，其直接原因主要是由                    分子决定的，可以说这类分子是一切生命活动的体现者。

②卵清蛋白中富含人体所需的多种必需氨基酸。为开辟的食物来源，除了从日常禽蛋类食物中获取，还有望通过生物工程中的           和             利用大肠杆菌或酵母菌生产大量的卵清蛋白。

 请回答下列有关基因工程的问题：

（1）如果用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的          片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群体就叫做这种生物的           。

（2）目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为        。将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是         法。转基因动物中采用最多，也是最为有效的一种将目的基因导入动物细胞的方法是        。大肠杆菌最常用的转化方法是：首先用Ca²⁺处理细胞，使细胞处于一种              的生理状态，这种状态的细胞被称作感受态细胞。然后将重组表达载体DNA溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度条件下促进                       ，完成转化过程。

（3）目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。首先，要检测转基因生物        上是否插入了目的基因。其次，还需要检测目的基因是否          。最后检测目的基因是否           。

(4)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似。PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能，这是因为        

                                                                             。

(5)用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1 kb

  即1000个碱基对)，请在下图质粒上画出EcoRV、Mbol的切割位点。

（6）基因工程中使用的限制酶，其特点是                                          。

请回答下列有关温度与酶活性的问题：

（1）温度对唾液淀粉酶活性影响的实验：

  将盛有2mL唾液淀粉酶溶液的试管和盛有2mL可溶性淀粉溶液的试管编为一组，共四组。在0℃、20℃、37℃和100℃水浴中各放入一组，维持各自的温度5min。然后，将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中，摇匀后继续放回原来的温度下保温。

把                               的时间作为本实验的起始时间记录下来。再每隔一分钟，取一滴混合液滴在盛有碘液的点滴板上进行观察，记录每种混合液蓝色消失的时间。通过比较混合液中         消失所需时间的长短来推知酶的活性。预计         温度下混合液因其中的酶失去活性蓝色不会消失。

（2）科研人员通过蛋白质工程来设计改变酶的构象。在研究溶菌酶的过程中，得到了多种突变酶，测得酶50%发生变性时的温度（Tm），部分结果见下表：

       （注：Cys上角的数字表示半胱氨酸在肽链的位置）

溶菌酶热稳定性的提高，是通过改变                       和增加        得以实现的。从热稳定性高的酶的氨基酸序列出发，利用             方法获得目的基因，通过基因工程的手段，可以生产自然界中不存在的蛋白质。