为研究pH对酶活性的影响，某同学准备了5支试管，各加入等量的胰蛋白酶溶液但pH各不相同，每支试管加1块1cm³的正方体凝固蛋白块，试管均置于25℃室温条件下，记录各试管蛋白块消失的时间，见下表。请分析回答：

（1） 从上述数据分析可知，酶发挥活性的适宜pH是            。

（2） 为了使实验在更短的时间内完成，有两种方法可以改进此项实验，一是将原题中正

方体蛋白块处理得更小（如切成0.5×0.5×0.5=0.125 cm³），这相当于消化道内进

行的物理性消化；二是可以                              。

  （3） 为确认蛋白块的消失是由于酶的作用，请你设计实验加以证明。

①取两支洁净的试管，分别标上A、B。

②给A、B两支试管分别加入等量的适宜pH的缓冲液；再在两支试管中均加入

                     。

③给A试管加入                   ，给B试管加入等量的蒸馏水，在37℃条

件下保温一段时间，定时观察实验结果；

④实验结果是                                          。

为研究pH对酶活性的影响，某同学准备了5支试管，各加入等量的胰蛋白酶溶液但pH各不相同，每支试管加1块1cm³的正方体凝固蛋白块，试管均置于25℃室温条件下，记录各试管蛋白块消失的时间，见下表。请分析回答：

为了研究pH对酶活性的影响，某学习小组进行如下操作：

①取5支洁净试管，分别编号A～E。

②向5支试管中加入等量的胰蛋白酶溶液。

③按下表要求调节各试管内的pH。

试管编号    A    B    C    D    E

pH          4    6    7    8    10

现有稀释的鸡蛋清液体和鸡蛋煮熟后的蛋白碎块供选择，应该选择________作为底物加入5支试管中进行实验的效果较好。

④将5支试管均置于相同且适宜温度条件下，记录消化蛋白质所用的时间。

下表为某同学以其中的一种底物进行实验所测得的时间：

试管编号                   A       B     C     D     E

pH                        4       6     7     8     10

消化蛋白质所用时间(min)      >100    30    18    11    35

a．从表中可知，在上述各pH条件下，胰蛋白酶活性最强的是pH＝________。是否可以认定该pH就是胰蛋白酶的最适pH？________。

b．为判断蛋白质是否被消化，某同学选用双缩脲试剂进行检验，这一做法是否正确？________。写出你的理由：___________________。

（15分）胰蛋白酶作用于一定量的某种物质（底物），温度保持37℃，pH保持在最适值，生成物量与反应时间关系如下图，请回答下列问题。

（1）该酶作用的底物是_____________________。
（2）在140分钟后，曲线变成水平，这是因为______________________________。
（3）若增加胰蛋白酶浓度，其他条件不变，请在原图上画出生成物量变化示意曲线。（2分）
（4）若胰蛋白酶浓度和其他条件不变，反应液pH值由2逐渐升高到10，则酶催化反应的速度将____________________，原因是_______________________。
（5）该酶是在______________细胞的核糖体上合成的，然后被分泌进入______________道后才有活性。
（6）下图中能正确表示胰蛋白酶对底物的分解速度和温度关系的是（    ）

（7）为探究洗衣粉加酶后的洗涤效果，将一种无酶洗衣粉分成3等份，进行3组实验。甲、乙组在洗衣粉中加入1种或2种酶，丙组不加酶，在不同温度下清洗同种化纤布上的2种污渍，其他实验条件均相同，下表为实验记录。请回答下列问题。

根据基因工程原理，回答以下问题：
Ⅰ：如图是基因工程技术生产胰岛素的操作过程示意图，请据图回答：

（1）完成过程②、③必需的酶分别是    、    。
（2）在利用A、B获得C的过程中，一般用    酶切割A和B，使它们产生相同的末端，再加入    ，才可形成C。
（3）取自大肠杆菌的物质B，在基因工程中起    作用，必须具备的条件是    。(至少写出两个)
Ⅱ：干扰素是是抗病毒的特效药，成分是一种糖蛋白，传统的生产方法是从人的白细胞内提取，每升人血只能提取0.05μg，所以价格昂贵。现在某基因公司用图示方式生产干扰素：

（1）从人的淋巴细胞中取出    ，使它同质粒相结合，然后移植到酵母菌体内获得干扰素。
（2）科学家成功地把人的干扰素基因移植到烟草的DNA分子上，使烟草获得了抗病毒的能力，试分析：
①人的基因之所以能接到植物体内，其物质基础是    。
②烟草有了抗病毒的能力，这表明烟草体内产生了    。烟草植株产生这种新性状(变异性状)的来源属于    。
③若要鉴定干扰素基因是否进入烟草细胞，可采用的检测方法是    ；若要鉴定干扰素
基因是否翻译成干扰素，可采用    。这些检测方法都属于分子检测。
（3）如果将携带干扰素基因的重组质粒导入二倍体植物细胞，经培养、筛选获得一株有抗病毒特性的转基因植物。经分析，该植物的某一染色体携带有目的基因（因此可以把它看作是杂合子）。理论上，在该转基因植物自交F1代中，出现具有抗病毒特性的植物的概率是    。

根据基因工程原理，回答以下问题：

Ⅰ：如图是基因工程技术生产胰岛素的操作过程示意图，请据图回答：

（1）完成过程②、③必需的酶分别是    、    。

（2）在利用A、B获得C的过程中，一般用    酶切割A和B，使它们产生相同的末端，再加入    ，才可形成C。

（3）取自大肠杆菌的物质B，在基因工程中起    作用，必须具备的条件是    。(至少写出两个)

Ⅱ：干扰素是是抗病毒的特效药，成分是一种糖蛋白，传统的生产方法是从人的白细胞内提取，每升人血只能提取0.05μg，所以价格昂贵。现在某基因公司用图示方式生产干扰素：

（1）从人的淋巴细胞中取出    ，使它同质粒相结合，然后移植到酵母菌体内获得干扰素。

（2）科学家成功地把人的干扰素基因移植到烟草的DNA分子上，使烟草获得了抗病毒的能力，试分析：

①人的基因之所以能接到植物体内，其物质基础是    。

②烟草有了抗病毒的能力，这表明烟草体内产生了    。烟草植株产生这种新性状(变异性状)的来源属于    。

③若要鉴定干扰素基因是否进入烟草细胞，可采用的检测方法是    ；若要鉴定干扰素

基因是否翻译成干扰素，可采用    。这些检测方法都属于分子检测。

（3）如果将携带干扰素基因的重组质粒导入二倍体植物细胞，经培养、筛选获得一株有抗病毒特性的转基因植物。经分析，该植物的某一染色体携带有目的基因（因此可以把它看作是杂合子）。理论上，在该转基因植物自交F1代中，出现具有抗病毒特性的植物的概率是    。

产人胰岛素的方法”的专利摘要：本发明利用转基因番茄为生物反应器生产人胰岛素。所用的人胰岛素基因是依据植物“偏爱”的密码子来设计所含的密码子，通过人工合成若干DNA片段，拼接而成，并且在胰岛素-COOH端加上KDEL内质网滞留序列，避免胰岛素在植物细胞中的降解。将该基因置于CaMV35S启动子和果实专一性启动子2A12的驱动之下，通过农杆菌介导的方法转入番茄中，在番茄的果实中表达人胰岛素。请回答：   

（1）本专利是采用___________方法获得目的基因的。获得的人胰岛素基因与人体细胞中胰岛素基因的碱基序列不同，但两者所编码的蛋白质中氨基酸序列相同，原因是__________   。要想在体外获得大量该目的基因的片段，可以采用___________。该技术中使用的关键酶是___________________ ；还需____________________等条件。

（2）根据上述摘要，转基因操作时所用的载体是____________，载体上的____________

可以转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。

构建的基因表达载体中应含有____________（多选）

①目的基因     ②CaMV 35S启动子   ③果实专一性启动子2A12       ④引物 

⑤标记基因     ⑥内含子滞留序列     ⑦终止密码子           ⑧终止子

（3）如果要检测在受体细胞中是否存在目的基因可采用____________    ，该技术中使用的基因探针也可以用来检测_____________________ 。此外，还可以从_______对目的基因的表达进行鉴定。

iPS细胞全称为诱导性多能干细胞，是由体细胞诱导而成的干细胞，具有发育的多潜能性，可以形成神经元等人体多种组织细胞。以下为iPS细胞研究中的几个重要事件。
资料1：2007年，美日科学家利用病毒将“c-Myc”等4个基因植入人类皮肤细胞，发现皮肤细胞可转化为iPS细胞。
资料2：2009年7月，我国科学家首次利用由体细胞诱导而成的iPS细胞，通过四倍体囊胚注射得到存活并具有繁殖能力的小鼠。

（1）美日科学家所利用的病毒的作用相当于基因工程中基因操作工具中的____。iPS细胞与__________细胞的特性最相近。

（2）皮肤取出后一般用胰蛋白酶等物质处理将细胞分散，而不用胃蛋白酶，原因是__________________________________________________________________

（3）皮肤细胞经诱导可形成iPS细胞，原因是_______________________________。

（4）在皮肤干细胞培养过程中，科研人员发现人工合成激素Ry可能引起细胞癌变。下面是关于这一问题的探究实验，请完善相应内容。
材料用具：含皮肤干细胞的培养液、适宜浓度的激素Ry溶液、显微镜、__________等
实验步骤：
①将皮肤干细胞培养液平均分成2组，编号为A、B。
②B组培养液中添加少量___________，A组培养液不添加。
③将A、B两组干细胞置于相同的培养条件下培养72小时。
④取样，分别染色、制片，在显微镜下观察__________________________________________。
结果与结论预测：如果____________________________，说明激素Ry能引起细胞癌变。