Question

【题目】某研究团队拟从餐厨垃圾中分离具有高效降解能力的微生物，并制成菌制剂，用于餐厨垃圾高效无害化处理。设计实验如下：

步骤一：取一定量的餐厨垃圾样品，筛除大块杂质后，装入无菌袋中密封，备用。

步骤二：配制用于培养菌种的培养基，配方如下：

成分	蛋白胨	牛肉膏	氯化钠	琼脂
含量（g/L）	10	15	10	5

【1】根据配方可知，该培养基属于

A.固体培养基B.液体培养基

C.通用培养基D.选择培养基

步骤三：制备样品稀释液，并将不同浓度的样品稀释液涂布于平板培养基表面进行培养，48h后观察结果。

【2】在涂布过程中需要用到的工具有

A.无菌圆纸片B.无菌玻璃刮铲C.酒精灯D.接种环E.无菌滴管

【3】培养后，培养基上长出了35个菌落，通过观察菌落的____________，可初步判断是20种不同的菌种。为进一步确定菌种类型，还需从分子水平进行的检测方法是_____________。

步骤四：对20种菌种进行分离纯化。为了比较这些菌种对餐厨垃圾的降解效果，分别配制含有餐厨垃圾主要成分（淀粉、蛋白质、脂肪和纤维素）的培养基，分别用于测定各菌种对其主要成分的降解效果，并进行测定。图表示其中4种菌种（X1-X4）在淀粉培养基上的培养结果，表3为这四种菌的测定结果。

四种菌种对餐厨垃圾各成分的降解系数

菌种 编号	淀粉 （D/D0）	蛋白质 （D/D0）	脂肪 （D/D0）	纤维素 （D/D0）
X1	2.26±0.20	2.26±0.08	1.06±0.05	1.17±0.05
X2	1.90±0.08	1.90±0.08	1.10±0.09	1.05±0.11
X3	1.78±0.05	1.78±0.19	1.20±0.11	3.13±0.26
X4	2.09±0.07	2.09±0.08	2.10±0.02	2.39±0.14

备注：降解系数（D/D0）越大，降解效果越明显。

【4】写出图所示的测定菌种对淀粉降解效果的实验原理：_______________。

【5】根据表中数据判断，降解餐厨垃圾能力最强的菌种是______________。

Answer 1

【答案】

【1】AC

【2】BCE

【3】 形态 基因检测

【4】菌种对淀粉降解的能力越强，分解培养基中的淀粉就越多，培养基上形成的透明圈就越大，即D/D0比值越大

【5】X4

【解析】

据表表一中，该培养基的配方中有琼脂，所以该培养基为固体培养基，培养基中的碳源、氮源、无机盐成分齐全，故为通用培养基的配方。图中和表二中，X4菌落的D/D0最大，降解餐厨垃圾效果最好。

【1】据表一分析可知，该培养基的配方中有琼脂，所以该培养基为固体培养基，培养基中的碳源、氮源、无机盐成分齐全，故为通用培养基的配方，故选AC。

【2】在稀释涂布平板法接种过程中，需要使用在酒精灯火焰附近操作，用无菌玻璃刮铲涂布接种，用无菌滴管移取菌液，故选BCE。

【3】培养后，培养基上长出菌落，需要观察菌落的形态特征初步判断菌种的的种类。要进一步确定菌种类型，还需从分子水平进行基因检测。

【4】根据题意和题图分析可知，菌种对淀粉降解的能力越强，分解培养基中的淀粉就越多，培养基上形成的透明圈就越大，即D/D0比值越大。

【5】根据表二综合分析可知，餐厨垃圾以脂肪和纤维素类为主，所以四种菌种对四种餐厨垃圾的D/D0比值相对较大的是X4。

本题结合图表主要课程微生物的培养与分离，意在强化学生对微生物培养与分离的相关原理及应用的相关知识的理解与掌握。