Question

【题目】下图1所示为动物细胞培养的基本过程示意图。请据图回答下列问题：

（1）容器A进行动物细胞培养时先要对材料剪碎，然后用__________________处理分散细胞，制成B瓶中的细胞悬液。细胞悬液转入C瓶中进行的初次培养称为______________，培养的细胞在贴壁生长到铺满培养瓶底部时停止分裂，这种现象称为______________________。

（2）在D瓶中正常培养了一段时间后，发现细胞绝大部分死亡，只有极少数细胞存活，这是因为存活的细胞发生______________，可无限增殖。目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为______代以内，以保持细胞正常的_________________核型。

（3）B、C、D瓶中的培养液为保证无菌、无毒的环境，需要添加一定量的_________。培养过程还需要提供O2和CO2等气体环境，CO2的作用是__________________________________。

（4）动物细胞体外培养时，通常要在培养液中补充一定浓度的某些物质。如图2是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。据图可知，培养______________细胞一定需要添加血清。

Answer 1

【答案】胰蛋白酶(或胶原蛋白酶) 原代培养接触抑制突变10二倍体抗生素调节pH正常

【解析】

据题文描述和图示分析可知：该题考查学生对动物细胞培养等相关知识的识记和理解能力。

(1) 动物细胞培养时，将置于容器A中的动物组织剪碎后，需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，使其分散成单个细胞，再制成B瓶中的细胞悬液。细胞悬液转入C瓶中进行的初次培养称为原代培养。当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，此现象称为细胞的接触抑制。

(2) D瓶中进行的培养为传代培养。一般来说，细胞在传至10～50代左右时，增殖会逐渐减慢，以至于完全停止，这时绝大部分细胞死亡，只有极少数细胞发生突变，克服细胞寿命的自然极限，获得不死性而得以存活。由于10代以内的细胞能够保持正常的二倍体核型，所以目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内。

(3) B、C、D瓶中的培养液，为了保证无菌、无毒的环境，需要添加一定量的抗生素，以防止培养过程中的污染。培养过程还需要提供O2和CO2等气体环境，其中CO2的作用是调节培养液的pH。

(4)图2显示：对于癌细胞而言，加入血清组与没有加入血清组的细胞数目差异不显著，说明是否加入血清对癌细胞的增殖影响不大；但对于正常细胞而言，加入血清组的细胞数目明显高于没有加入血清组的细胞数目，说明是否加入血清对正常细胞的增殖影响很大，所以培养正常细胞一定需要添加血清。