Question

【题目】磷是植物生长的重要营养元素之一，我国74%的耕地土壤中缺磷，而施入土壤的磷肥只有5%—25%的利用率，大部分磷都成了不能吸收的难溶性磷酸盐。为了从土壤中筛选出能够将难溶性磷酸盐转化为植物能吸收的可溶性磷的优良解磷菌株，以便将其添加到有机肥中，改善植物磷元素供应。科研人员进行如下实验：

实验原理：固体培养基中难溶性磷酸盐在微生物的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈（如右图），透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（D/d）代表微生物溶解磷的能力大小。

实验步骤：

步骤1取某地区土样5g制得土壤溶液后稀释，取稀释液lmL接种到基础培养基A上，在适宜温度下培养72h。

步骤2 在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种，培养34d后观察菌落特征和透明圈的大小，初步筛选出三种优良解磷菌株（如右表）。

请分析回答下列问题：

（1）土壤中的磷以_______________形式被植物细胞吸收，吸收后可用于合成_______________ （填出

3种含磷的有机物）。

（2）实验中所用的固体培养基往往是在液体培养基中加人凝固剂_______________制备的，培养基上出现的单一菌落可以看做一个_______________（填“种群”、“群落”、“生态系统”）。

（3）为了筛选出所需菌株，培养基中唯一的磷源应该是_______________，步骤1中接种方法是_______________，步骤2中接种环的灭菌方法是_______________。

（4）根据实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是_______________。为了保持所得菌种的纯净，需要进行菌种的保藏。临时保藏时，要将菌种接种到试管的_______________ 格养基上，长成菌落后放人4℃的冰箱中；长期保存时可以采用_______________的方法。

Answer 1

【答案】

（1）PO43-（HPO42-或H2PO4-）（2分） 核酸、磷脂、ATP、NADPH等（3分。写出任意三项即可）

（2）琼脂 种群

（3）难溶性磷酸盐（2分） 稀释涂布平板法（2分） 灼烧灭菌

（4）乙 固体斜面 甘油管藏

【解析】

（1）P应是以磷酸盐的方式被吸收的，即PO43-（HPO42-或H2PO4-）。吸收后可以用于合成磷脂、核酸、ATP、NADPH等。

（2）固体培养基需要在液体培养基中加入凝固剂琼脂。培养基上出现的菌落是位于同一区域内的同种生物的全部个体，所以是一个种群。但如果受到杂菌的污染后就是一个群落。

（3）因为是为了筛选吸收难溶性磷酸盐的细菌，所以应以难溶性磷酸盐为唯一的磷源。步骤1是稀释涂布平板法，步骤2是中对接种环需要进行灼烧灭菌。

（4）溶解磷能力最强的应是乙，因为透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（D/d）代表微生物溶解磷的能力大小。临时保藏可以接种到试管的固体鞋面培养基上，长期保存可以使用甘油管藏法进行保存。

土壤中分解尿素的细菌	分解纤维素的微生物
①选择培养基的成分：尿素作为唯一的氮源 ②鉴定方法：在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，pH升高，说明细菌能分解尿素	①选择培养基的成分：纤维素作为唯一的碳源 ②鉴定方法：刚果红染色法，即刚果红与纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，培养基出现以纤维素分解菌为中心的透明圈