Question

13．某同学欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌并对该菌进行计数，下列实验操作中不正确的是（　　）

• A． 将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释
• B． 在无氮培养基中加入酚红指示剂可用来鉴定分解尿素的细菌
• C． 可将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照
• D． 同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板

Answer 1

分析 1、从土壤中分离出能分解尿素的细菌的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株．
2、尿素分解菌产生的脲酶能够将尿素分解为氨使酚红指示剂呈红色，用加入酚红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌．
3、稀释涂布法：是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，在适宜条件下培养．在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落．能够测定样品中活菌数的方法是：稀释涂布平板法．

解答 解：A、为防止土壤浸出液浓度过高，难以获得单菌落，要将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释，A正确；
B、在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂可筛选出分解尿素的细菌，B错误；
C、可以将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照，以判断培养基灭菌是否彻底，C正确；
D、同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板，防止偶然因素对实验结果的影响，D正确．
故选：B．

点评 本题主要考查微生物的培养和分离、尿素分解菌的筛选与分离，意在强化对实验过程的理解，提高学生的实验技能．