Question

【题目】以下是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图。

（1）上图中过程①的完成采用的方法有:_____________，依据的生物学原理_____________。

（2）过程④要用到的酶有_____________，过程⑥采用的方法叫_____________。

上图中的质粒本身含有氨苄青霉素抗性基因和M、N两种限制酶（两种酶切割序列完全不同）切割位点。若用限制酶M和N切割，通过凝胶电泳分离，分析得到下表。

分子量(kb)	1.0	2.0	3.0	4.0	5.0	6.0	7.0	8.0	9.0	10.0
酶M	+				+					+
酶N							+		+
酶M+酶N	+	+	+		+
凝胶电泳结果（1kb=1000对碱基，+表示检测到该片段的存在）

（3）该质粒长度为___________kb，在该质粒中，M酶与N酶的切割点分别有__________、_______个。

（4）氨苄青霉素抗性基因的作用是_______________________________________。

Answer 1

【答案】 用物理方法（离心、振动、电刺激）、聚乙二醇（PEG）、灭活的病毒 细胞膜具有流动性 逆转录酶、DNA聚合酶 感受态法 16 3 2 作为标记基因（鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将有目的基因的受体细胞筛选出来）

【解析】试题分析：本题以“制备抗体的两个途径模式简图”为情境，综合考查学生对基因工程、生产单克隆抗体等相关知识的识记和理解能力。以图示中的箭头和文字信息为切入点，围绕基因工程操作的基本程序、生产单克隆抗体的过程明辨图中数字所示的生理过程、字母所示的细胞名称。在此基础上，结合问题情境，从题图中提取有效信息进行相关问题的解答。

(1) 过程①是诱导动物细胞融合，采用的方法有:用物理方法（离心、振动、电刺激）、聚乙二醇（PEG）、灭活的病毒，依据的生物学原理是细胞膜具有流动性。

(2) 过程④为逆转录，要用到的酶有逆转录酶、DNA聚合酶。过程⑥为将构建的重组质粒导入大肠杆菌细胞内，最常用的转化方法是用CaCl2或Ca2+处理，增大细胞壁的通透性,使其成为感受态细胞，即采用的方法叫感受态法。

(3)上图中的质粒为环状DNA。表中信息显示：单独用限制酶M切割，得到1.0、5.0和10.0 kb的3个片段，说明有3个酶M的切割点；单独用限制酶N切割，得到7.0和9.0 kb的2个片段，说明有2个酶N的切割点。综上分析，该质粒长度为1.0＋5.0＋10.0＝16.0 kb。

(4) 氨苄青霉素抗性基因的作用是作为标记基因（鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将有目的基因的受体细胞筛选出来）。