Question

【题目】登革热病毒可以感染人类并导致严重疾病，为获得适用于临床检测的病毒抗原，研究者从登革热病毒中获取其外膜抗原基因，让它在大肠杆菌中进行表达，具体过程如下图。

请回答下列问题：

（1）登革热病毒需培养在动物细胞培养液中，原因是__________。细胞培养液中常常需要添加__________，以防培养过程中受污染。

（2）①过程包括________和_____扩增，分别需要的酶是__________和___________。

（3）②过程需要的工具酶是________________。

（4）③过程是用___________处理大肠杆菌，使其处于_____________状态。

（5）获得的病毒蛋白可用于检测患者血清中的_________(抗原/抗体），)确诊疾病。

Answer 1

【答案】（1）病毒无法独立生活，必须寄生在活细胞中 抗生素

（2）逆转录（反转录） PCR（目的基因） 逆转录酶 Taq酶

（3）限制酶和DNA连接酶

（4）Ca2+（CaCl2） 感受态（“感受”、“能吸收周围环境中DNA分子的”给分）

（5）抗体

【解析】试题分析：（1）登革热病毒没有细胞结构，没有独立生活的能力，必须寄生在活细胞中，所以需培养在动物细胞培养液中。为了防止杂菌污染，细胞培养液中常常需要添加抗生素。

（2）据图分析，过程①表示逆转录形成目的基因和PCR技术扩增目的基因两个过程，分别需要逆转录酶和Taq酶的催化。

（3）②过程是基因工程中构建基因表达载体的过程，需要限制酶和DNA连接酶的催化。

（4）③过程是将目的基因导入大肠杆菌的过程，需要用Ca2+（CaCl2）处理大肠杆菌，使其处于感受态，以便目的基因的导入。

（5）获得的病毒蛋白可用于检测患者血清中的抗体，以确诊疾病。