Question

[生物一选修l生物技术实践】
请回答下列生物技术有关问题：
（1）DNA变性后，当温度缓慢降低后，两条彼此分离的DNA链又重新结合成双链，称为，PCR技术利用了DNA的

 

原理，通过控制温度来控制双链的解聚与结合．
（2）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、

 

和

 

等条件，使用过的培养基及其培养物必须经过

 

处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散．
（3）在制备固定化酵母细胞过程中，溶化好的海藻酸钠溶液要冷却至室温，才能加入已活化的酵母菌，目的是防止

 

．如果在CaCI2溶液中形成的凝胶珠颜色过浅，说明固定的酵母细胞数目

 

．
（4）若用花药进行离体培养则应选择花粉发育至

 

期的花药培养成功率最高．

Answer 1

考点：用DNA片段进行PCR扩增,微生物的分离和培养

专题：

分析：第（1）小题着重识记PCR技术的过程，即：高温变性（解链）→低温复性→中温延伸．第（2）小题要求考生识记微生物培养的培养基和培养条件，此小题较简单．第（3）小题，蛋白质和DNA分子在高温下均可变性，因此为防止高温杀死酵母菌，海藻酸钠溶液要冷却至室温．最适合花药培养的小孢子发育时期为单核靠边期．

解答： 解：（1）在PCR技术的过程中包括：高温变性（解链）→低温复性→中温延伸三个步骤，因此当温度缓慢降低后，两条彼此分离的DNA链又重新结合成双链，称为复性．由此看出PCR技术利用了DNA在高温下变性的原理，通过控制温度来控制双链的解聚与结合．
（2）在微生物培养时，除考虑营养条件外，还要考虑pH、温度和渗透压等条件，并且还要保持无杂菌环境．为了防止大肠杆菌对环境的污染，使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃．
（3）溶化好的海藻酸钠溶液溶液温度较高，为了防止高温杀死酵母菌，需将海藻酸钠溶液要冷却至室温，才能加入已活化的酵母菌．如果在CaCI2溶液中形成的凝胶珠颜色过浅，说明固定的酵母细胞数目较少．
（4）一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养的成功率最高．而选择单核期以前的花药接种，质地幼嫩，极易破碎；选择单核期之后的花药接种，花瓣已有松动，又给材料的消毒带来困难，且难以挑选到单核期的花药．
故答案为：
（l）复性  热变性  
（2）酸碱度    渗透压    灭菌 
（3）高温杀死酵母菌     较少   
（4）单核

点评：本题考查了PCR技术、微生物的培养、酵母细胞的固定化、花药离体培养等方面的知识，意在考查考生识记并理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力．