Question

【题目】[生物——选修3：现代生物科技专题]

根据基因工程的有关知识，回答下列问题：

（１）限制性内切酶切割ＤＮＡ分子后产生的片段，其末端类型有 和 。

（２）质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下：

为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是 。

（３）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即 DNA连接酶和 DNA连接酶。

（４）反转录作用的模板是 ，产物是 。若要在体外获得大量反转录产物，常采用 技术。

（５）基因工程中除质粒外， 和 也可作为运载体。

（６）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是 。

Answer 1

【答案】（1）平末端（1分) 粘性末端 (1分)

（2）切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同 (2分)

（3）T４ (1分) Ecoli (1分)

（4）mRNA (2分) 单链DNA (2分) PCR（聚合酶链式反应）(1分)

（5）动植物病毒 (1分) λ噬菌体的衍生物 (1分)

（6）未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱 (2分)

【解析】

试题分析：（1）限制性内切酶在它识别序列的中心轴线处切割DNA分子后产生的是平末端，而在在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切割后产生的是黏性末端。

（2）若用不同的限制酶切割运载体与含有目的基因的DNA片段，只有切割后运载体与目的基因产生的黏性末端相同，才能使运载体与目的基因相连。因此质粒运载体用EcoRⅠ切割后，为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同的另一种限制性内切酶切割。

（3）根据酶的来源不同，DNA连接酶分为两类: 一类是从T４噬菌体中分离出来的，称为T４DNA连接酶，另一类是从大肠杆菌中分离得到的，称为E·coli DNA连接酶。

（4）反转录是以mRNA为模板来合成DNA的过程，因此反转录作用的模板是mRNA，产物是单链DNA。可以在体外短时间内大量扩增DNA的技术叫PCR(多聚酶链式反应)技术，所以若要在体外获得大量反转录产物，常采用PCR（聚合酶链式反应）技术。

（5）基因工程中的运载体除质粒外,还有动植物病毒、λ噬菌体的衍生物等。

（6）大肠杆菌细胞外有细胞壁和细胞膜,能阻止其他物质的进入,导致未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱 ，所以一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞。