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    回答下列有关基因工程的问题
    最新基因医疗工程主要选择腺相关病毒（简称AAV）作为治疗用基因载体（见图1）．AAV是有衣壳、无包膜的DNA小病毒，基因组含有病毒衣壳基因rep和复制相关蛋白基因cap，以及其他基因，但缺乏复制激活基因E，所以，AAV感染细胞后不会复制，对人体安全．当人体细胞同时感染其他DNA病毒（含有基因E）后，会激活复制、表达，形成病毒粒子（含DNA和衣壳），病毒粒子具有侵染能力．AAV病毒衣壳不能包装较大DNA分子．
    血友病是由于基因TPO突变而不能合成凝血因子，导致机体出血．目前血友病的临床治疗主要有两种基因疗法，一是将基因工程菌生产的凝血因子注入患者体内，补充凝血因子；二是用含目的基因的重组病毒感染患者，使患者获得病毒直接提供的凝血因子．

    （1）在质粒重组之前需获取大量的目的基因等，实验室最常见的方法是（写中文全称）
     
    ．
    （2）过程①②需要限制酶外，还需要
     
    酶．
    （3）重组AAV中去除了基因rep、cap，此举的目的是
     
    ；重组AAV转染细胞产生病毒粒子，需要人工重组辅助质粒，这是因为
     
    ．
    （4）比较两种基因治疗法，说出用重组AAV病毒粒子感染治疗的优点：
     
    ．
    （5）实验发现，用昆虫细胞、酵母菌、人体细胞承担重组质粒与重组AAV的转染，都能收集到凝血因子，这一现象说明
     
    ．
    （6）病毒粒子可能含有重组AAV或人工重组辅助质粒，就需要检验、提纯，检验可以用酶切结合电泳法．已知腺相关病毒（AAV）与人体DNA片段的EcoRI与BamHI的酶切位点如图2所示，两种酶分开切的电泳图如图3所示

    则用这两种酶作用于重组AAV，（如图4）电泳图正确的是
     
    ．
    考点：基因工程的原理及技术
    专题：
    分析：基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的获取，②基因表达载体的构建，③将目的基因导人受体细胞，④目的基因的检测与鉴定．
    解答： 解：（1）获取大量的目的基因的常用方法是聚合酶链反应．
    （2）过程①②为基因基因表达载体的构建，需要限制酶和DNA连接参与．
    （3）rep为病毒衣壳基因、cap为病毒复制相关蛋白基因，重组病毒去除这两种基因后不能在人体大量复制，提高安全性，又因为AAV病毒衣壳不能包装较大DNA分子，所以去除后保证AAV能结合较大目的基因片段；由图可知，重组AAV中没有cap和rep基因，所以需要人工重组辅助质粒参与提供腺相关病毒（AAV）复制所用酶以及衣壳蛋白的基因．
    （4）结合图形可知，凝血因子进入人体内，由于代谢而导致数量下降，必须不断注射，而病毒所携带的目的基因能在患者体内长期生产凝血因子，不需要经常注射．
    （5）在不同的生物体细胞中，相同的重组AAV转染都能获得相同的蛋白质，说明生物共用一套遗传密码．
    （6）根据题意，两种酶都使用可将重组AAV切割成四段，且总DNA片段长度为1230pp，故选：B．
    故答案为：
    （1）聚合酶链反应   
    （2）DNA连接  
    （3）重组AAV不能在人体大量复制，提高安全性，并保证AAV能结合较大目的基因片段        辅助质粒能提供腺相关病毒（AAV）复制所用酶以及衣壳蛋白的基因
    （4）凝血因子进入人体内，由于代谢而导致数量下降，必须不断注射，而病毒所携带的目的基因能在患者体内长期生产凝血因子，不需要经常注射
    （5）生物共用一套遗传密码子
    （6）B
    点评：本题考查基因工程内容，意在考查考生能从课外材料中获取相关的生物学信息，并能运用这些信息，结合所学知识解决相关的生物学问题．
    练习册系列答案
    年级 高中课程 年级 初中课程
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    科目：高中生物 来源： 题型：

    如图表示植物叶肉细胞的两个重要的生理过程中C、H、0的转化，下列叙述中不正确的是（　　）
    A、a、c过程产生[H]时也产生ATP
    B、甲、乙过程中的[H]转移途径相同
    C、进行甲、乙过程的环境条件有差异
    D、甲为光合作用，乙为呼吸作用

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    Ⅰ镰刀型细胞贫血症是一种遗传病．如图表示人类镰刀型细胞贫血症的病因，据图回答下列问题．
    （1）过程①表示的变异类型为
     
    ，真核细胞中，该行为主要发生在细胞分裂的
     
    期．
    （2）过程②遵循
     
    原则；参与过程③的RNA包括哪几种
     
    ．
    （3）若血红蛋白基因中另有一个碱基对发生了同样的变化，但血红蛋白氨基酸序列却没有改变，其原因是
     
    ．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    关于基因突变的叙述，不正确的是（　　）
    A、基因突变的方向和环境没有明确的因果关系
    B、DNA分子中发生碱基对的增添，引起基因结构的改变属于基因突变
    C、基因突变的普遍性是指基因突变可以发生在生物个体发育的任何时期
    D、基因突变会产生新的基因

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    下列有关基因突变的叙述正确的是（　　）
    A、生物随环境的改变而产生适应性的变异
    B、由于细菌的数量多，繁殖周期短，因此其基因突变率很高
    C、自然状态下的突变是不定向的，而人工诱变多时定向的
    D、基因突变在自然界中广泛存在

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    诱变育种能使植物体产生更多的突变个体，生物细胞对辐射、化学诱变剂敏感的时期是细胞分裂的（　　）
    A、间期B、前期C、后期D、末期

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    甲图表示某草原生态系统的食物网简图，其中E（20000kJ）表示牧草一年固定的太阳能总量，E1、E2、E3（E1+E2+E3=3000kJ）分别表示牲畜、昆虫和鼠三者同化的能量．牧草呼吸消耗的能量为2500kJ，牲畜、昆虫和鼠三者呼吸消耗的能量为600kJ，三者粪便中的能量为500kJ．乙图表示该草原中某一种群的λ随时间变化的曲线．据图回答相关问题：

    （1）甲图中鹰与狐狸的关系是
     
    ．该食物网中由第一营养级到第二营养级的能量传递效率为
     
    ．
    （2）乙图曲线所示种群在前5年种群数量的变化类型是
     
    增长，在1～20年中种群数量最多的是第
     
    年，20～30年中种群的增长率为
     
    ．
    （3）该草原在第10年曾发生火灾，“野火烧不尽，春风吹又生”是对火灾过后草原生物群落
     
    过程的真实写照，这体现了生态系统的
     
    稳定性．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    下列关于人体内环境稳态失调的叙述，错误的是（　　）
    A、淋巴管阻塞引起组织水肿
    B、血液中钙盐过少引起肌无力
    C、机体接触同种过敏原引起过敏反应
    D、腹泻引起体液中水和无机盐大量丢失

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    2010年8月中旬媒体报道南亚出现了一种“超级细菌”，能够合成一种特殊蛋白质，以水解抗生素，几乎使所有的抗生素对它都束手无策．推测这种“超级细菌”是基因突变的结果．为了确定该推测是否正确，应检测和比较这类细菌细胞中（　　）
    A、基因的碱基组成
    B、基因的碱基序列
    C、蛋白质的含量
    D、mRNA的含量

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