人体内的P53基因是正常细胞内重要的抑癌基因.研究表明P53基因突变可导致肝脏细胞癌变．科学家发现P53基因对体外培养的肝癌细胞生长有抑制作用.拟通过实验加以验证．根据相关信息回答下列问题:(1)培养肝癌细胞:切下新鲜的肝癌组织.在37℃下用酶消化30-40分钟.再置于培养箱中培养．细胞培养过程中.必需满足培养箱中的气体环境外.还需要满足� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

人体内的P53基因是正常细胞内重要的抑癌基因，研究表明P53基因突变可导致肝脏细胞癌变．科学家发现P53基因对体外培养的肝癌细胞生长有抑制作用，拟通过实验加以验证．根据相关信息回答下列问题：
（1）培养肝癌细胞：切下新鲜的肝癌组织，在37℃下用

酶消化30～40分钟，再置于培养箱中培养．细胞培养过程中，必需满足培养箱中的气体环境外，还需要满足的条件有

（需要正确写出三种以上）．
（2）体外大量扩增P53基因：该技术中需要加入

种引物和一种特殊的

酶．
（3）将P53基因经过一系列的处理并与脂质体混合，再将混合物滴加至肝癌细胞上，轻轻混匀．最后筛选出含有P53基因的肝癌细胞，脂质体在这个操作中的作用是

．
（4）将两种细胞接入孔空板中，从次日开始检测每孔的细胞总数，绘制成如图所示的增长曲线．曲线表示1的是

细胞，曲线表示2的是

细胞．

考点：动物细胞与组织培养过程,基因工程的应用

专题：

分析：1、分析曲线图：P53基因是正常细胞内重要的抑癌基因，所以导入P53基因的肝癌细胞数目会下降，即曲线2，而普通肝癌细胞能无限增殖，其数目不断上升，即曲线1．
2、PCR扩增反应需要两种引物、模板DNA、原料（4种脱氧核苷酸）、酶（耐高温的DNA聚合酶）．
3、动物细胞培养需要满足以下条件
①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理．通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染．此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害．
②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等．通常需加入血清、血浆等天然成分．
③温度：适宜温度：哺乳动物多是36.5℃+0.5℃；pH：7.2～7.4．
④气体环境：95%空气+5%CO₂．O₂是细胞代谢所必需的，CO₂的主要作用是维持培养液的pH．

解答： 解：（1）动物细胞培养前需要用胰蛋白酶处理组织，使细胞分散成单个细胞．动物细胞培养的条件：①无菌、无毒的环境：消毒、灭菌；添加一定量的抗生素；定期更换培养液，以清除代谢废物．②营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．③温度和PH．④一定的气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO₂（维持培养液的PH）．
（2）体外大量扩增P53基因：该技术中需要加入2种引物和一种特殊的热稳定DNA聚合（或耐热的DNA聚合）酶．
（3）脂质体在这个操作中的作用是将P53（目的）基因导入肝癌细胞．
（4）P53基因是正常细胞内重要的抑癌基因，所导入P53基因的肝癌细胞数目下降，而普通肝癌细胞能无限增殖，其数目不断上升，即曲线1是肝癌细胞，曲线2是转入P53基因的肝癌细胞．
故答案为：
（1）胰蛋白酶       无菌无毒的环境、适宜营养、适宜的温度和pH
（2）2             热稳定DNA聚合（或耐热的DNA聚合）
（3）将P53（目的）基因导入肝癌细胞
（4）肝癌细胞     转入P53基因的肝癌细胞

点评：本题考查动物细胞培养和应用、探究实验，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力；能运用所学知识，解决问题的能力；具有对一些生物学问题进行初步探究的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理．

练习册系列答案

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如图是人体胃酸分泌的部分调节途径，其中幽门粘膜G细胞（一种内分泌细胞）能合成分泌胃泌素，作用于胃粘膜壁细胞，促进其分泌胃酸．请分析回答：
（1）通过“①→②→胃粘膜壁细胞”（途径1）促进胃酸分泌过程中，兴奋在①和②神经元之间传递时，信号发生的变化是

，作用于胃粘膜壁细胞的信号物质是

．
（2）通过“③→④→⑤→胃粘膜壁细胞”（途径2）促进胃酸分泌的调节方式是

．与途径1相比较，从反应速度和作用时间看，主要特点是

．
（3）研究发现，当胃酸分泌增加后会引起胃壁扩张，后者又会加强胃泌素的分泌，胃泌素的这种分泌调节机制称为

．

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生物体缺少下列哪种元素时，会出现贫血（　　）

A、锌

B、铁

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请回答下列问题：
Ⅰ：家蚕是二倍体，体细胞中有28对染色体，其中一对是性染色体，雄蚕含有两个同型的性染色体ZZ，雌蚕含有两个异型的性染色体ZW．（1）雌蚕的一个染色体组可以写成

，雄蚕体细胞有丝分裂后期，含有

条Z染色体．
（2）已知控制家蚕结黄茧的基因（Y）对控制家蚕结白茧的基因（y）为显性，但当另一对非同源染色体上的基因R存在时，就会抑制黄色基因Y的表达，从而使蚕茧变为白色；而r基因不会抑制黄色基因Y的表达．
①基因型为YyRr的两个个体交配，子代出现结白茧的概率是

．
②现有基因型不同的两个结白茧的蚕杂交，产生了足够多的子代；子代中结白茧的与结黄茧的比例是3：1．若其中一个亲本的基因型为YYRr，则另一个亲本的基因型可能是

．
（3）家蚕中D、d基因位于Z染色体上，d是致死基因（导致隐性纯合的受精卵不能发育，但Z^d的配子有活性）．能否选择出相应基因型的雌雄蚕杂交，使后代只有雄性

（填能或不能）．若能，请写出亲本的基因型；若不能，请说明理由

．
Ⅱ：已知果蝇的某一相对性状由一对等位基因A-a控制，研究表明该性状的遗传是从性遗传，即基因位于常染色体上，但与性别相关联，雌雄差异在于杂合子，雄性杂合子表现为显性性状，而雌性杂合子表现为隐性性状．
现有表现型为显性的雌果蝇与隐性雄果蝇杂交，得F₁，F₁雌雄果蝇随机交配得F₂，F₂雌雄果蝇随机交配得F₃，F₂雄果蝇中具有显性性状的个体占

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．

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下列组合中，依次属于种群、群落和生态系统的一组是（　　）
①生活在山洼草丛中的昆虫　②某一湖泊中的全部生物　③酿制葡萄酒时发酵罐中的酵母菌　④一片果园．

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①为使反应出现得较快且明显，实验前应将小鼠饥饿处理，以消耗肝糖元；
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