[题目]利用基因工程生产羧酸酯酶制剂的流程如图所示.下列叙述不正确的是( )A.过程①是在小菜蛾细胞的细胞核中进行B.过程②获取的CarE基因中不含有启动子C.过程③进行前需要用Ca2+处理大肠杆菌D.过程④可以利用DNA分子杂交技术鉴定目的基因是否已导入受体细胞题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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【题目】利用基因工程生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如图所示，下列叙述不正确的是（）

A.过程①是在小菜蛾细胞的细胞核中进行

B.过程②获取的CarE基因中不含有启动子

C.过程③进行前需要用Ca2+处理大肠杆菌

D.过程④可以利用DNA分子杂交技术鉴定目的基因是否已导入受体细胞

【答案】A

【解析】

根据题意和图示分析可知：图中过程①表示通过反转录法合成相应的DNA；过程②表示利用PCR技术对目的基因进行扩增；过程③表示将目的基因导入受体细胞；过程④表示通过筛选获得工程菌。

A、过程①表示通过反转录法合成目的基因，该过程是在体外进行的，不是在小菜蛾细胞的细胞核中进行的，A错误；
B、目的基因是通过逆转录法获得的，该方法获得的目的基因不含启动子，因此过程②获取的CarE基因中不含有启动子，B正确；
C、将目的基因导入大肠杆菌细胞时采用感受态转化法，感受态细胞可用CaCl2溶液处理后制备，C正确；
D、过程④可以利用DNA分子杂交技术鉴定目的基因是否已导入受体细胞，D正确。
故选A。

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（2）检测发现，转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图2方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。

①这是一种定点的_________技术。

②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”，若不选用该引物则划“×”）。_____

	引物A	引物B	引物C	引物D
PCR1
PCR2
PCR3
PCR4

（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较_________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。

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（1）该实验的自变量是_____。上述实验结果_____ （填“能”或“不能”）说明植物激素类似物甲的生理作用具有两重性，原因是_____。

（2）为探究3μmol/L的激素类似物甲和0．5μmol/L的激素类似物乙对微型月季插条生根的复合影响，应至少设计_______种培养基，分别是________。

（3）若乙为脱落酸的类似物，除了会抑制生根，脱落酸还会_____种子萌发。小麦和玉米在即将成熟时，如果经历持续一段时间的干热之后，又遇到大雨，种子就容易发芽，除了由于水分的充分供应，还有可能的原因是___________________。

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注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种限制酶，箭头指向的位置为限制酶的切割位置，Ampr是氨苄青霉素抗性基因，Neor是G418抗性基因。

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