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【题目】苹果干腐病是由一种名为茶藤子葡萄座腔菌的真菌引起的疾病,病菌通常由枝条伤口入侵感染,在伤口处形成溃疡。某中学的科研小组计划分离出该真菌,并进行药物防治实验,为苹果干腐病的防治提供合理的建议。经过查阅资料,确定了分离时所用的PDA培养基配方,如下表所示:

该真菌在上述PDA培养基上生长时有特定的形态特征:辐射状白色匍匐菌丝,绒毛状。

(1)要获得菌落,则上表中还应添加的成分是________。氯霉素在PDA培养基中的作用是____。培养基的制备步骤包括计算、称量、溶化、_____________、倒平板。等平板冷却凝固后,应将平板倒置,这样做的目的是_________

(2)用剪刀从染病枝条溃疡处剪取lxlcm2的患病组织,并用0.1%的升汞进行____,置于培养基中心,在合适条件下进行培养,共培养五组。待菌落形态特征稳定后,用_____法将该致病菌分别转移至含有等量0.5%苦水碱剂、40%福美砷、清水的上述PDA培养基中进行抗药性实验,并每隔24h记录一次最后划线区域的菌落数目。

①选取菌落数目稳定的记录作为结果,这样做的目的是____

②记录结果如下:

从结果分析可知,_______ 能很好地抑制该真菌的生长,适合防治苹果干腐病。

【答案】琼脂(或凝固剂) 抑制细菌等杂菌的生长 灭菌 以防止冷凝水污染培养基 消毒 平板划线 可以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落数目 0.5%苦水碱剂

【解析】

培养微生物的培养基一般含有水、碳源、氮源、无机盐等营养要素,此外培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。根据物理状态培养基可分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基,一般固体培养基中会加入琼脂作为凝固剂。

1)培养菌落需要用固体培养基,而固体培养基需要加入琼脂(或凝固剂)进行凝固。分析表格物质,氯霉素能够抑制细菌等杂菌的生长,而真菌可以生存。培养基的制备步骤包括计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。等平板冷却凝固后,要将平板倒置放置,以防止冷凝水污染培养基。
2)0.1%的升汞的作用是消毒,题中给出“每隔24h记录一次最后划线区域的菌落数目”,因此可以确定分离微生物用的方法是平板划线法。
①为了避免因培养时间不足而导致遗漏的菌落数目,因此要选取菌落数目稳定的记录作为结果。
②通过表格数据可知,不同条件下菌落数相比较,0.5%苦水碱剂作用后菌落数最少,因此0.5%苦水碱剂能很好的抑制该真菌的生长,适合防治苹果干腐病.

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