【题目】径柳匙叶草是一种泌盐植物。科研工作者将径柳匙叶草液泡膜Na＋/K＋逆向转运蛋白基因（TaNHX2基因）转移到棉花细胞内，获得了转基因耐盐棉花新品种。图1是获取的含有目的基因的DNA片段，Sau3A I、EcoR I、BamH I为三种限制酶，图中箭头所指为三种限制酶的切点；图2是三种限制酶的识别序列与酶切位点示意图；图3是土壤农杆菌中用于携带目的基因的Ti质粒结构示意图。请分析回答问题：
（1）若图1所示DNA片段是利用径柳匙叶草的DNA直接获得的，则该获取目的基因的方法为_________。
（2）不能在径柳匙叶草根尖分生区细胞中获得TaNHX2基因的mRNA，其原因是_________。
（3）若用BamH I切割图1所示的DNA片段，获得目的基因，则需选用_________切割图3所示质粒，以便构建基因表达载体，该方案的缺陷是_________。故切割图1所示DNA片段的最佳方案是选用_________酶。
（4）用上述最佳方案构建基因表达载体，所得重组质粒_________（选填“能”“不能”或“不一定能”）被BamHⅠ切割。
（5）图3中，质粒上的抗生素抗性基因的作用是_________。
（6）为了检测技术成果，科研工作者在个体水平的检测方法是_________。
【答案】从基因文库中获取 基因的选择性表达（径柳匙叶草根尖分生区细胞中TaNHX2基因不能表达） Sau3A I 出现目的基因和质粒的自我环化、目的基因在质粒上的连接方向不确定 EcoRI和BamH I 不一定能 以便筛选出含有目的基因的受体细胞 将转基因棉花种植在盐碱地，观察其生长状况
【解析】
基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
（1）利用径柳匙叶草的DNA直接获得目的基因的方法为从基因文库中获取目的基因。
（2）径柳匙叶草根尖通过成熟区细胞吸收水分和矿质元素，细胞中TaNHX2基因表达,而分生区细胞中TaNHX2基因不能表达。
（3）依据图示限制酶识别和切割位点，用BamH I切取目的基因，不能选EcoR I切割载体，因为EcoR I切割产生的粘性末端和目的基因粘性末端碱基序列不相同。选用Sau3A I切割相应质粒，会产生相同的粘性末端，以便构建基因表达载体，该方案的缺陷是出现目的基因和质粒的自我环化、目的基因在质粒上的连接方向不确定。为克服上述弊端，可选用EcoRI和BamH I切割质粒。
（4）选用EcoRI和BamH I切割质粒，构建基因表达载体后所得重组质粒上不一定有BamHⅠ酶切位点，不一定能被BamH Ⅰ切割。
（5）基因工程中抗生素抗性基因常用作标记基因，以便筛选出含有目的基因的受体细胞。
（6）结合目的基因的功能，人们通过将转基因棉花种植在盐碱地，观察其生长状况在个体水平检测目的基因是否成功表达。
高中必刷题系列答案科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】福寿螺已被我国列入外来入侵物种。如图是防治福寿螺的稻鸭生态农业模式，请回答下列问题：
（1）图中有_____条食物链，其中福寿螺和鸭子之间的关系是_________。能将_____________压制在一个低水平上。
（2）鸭子产生的粪便属于___________同化量的一部分，粪便会被___________分解成无机物，为水稻等提供营养物质。
（3）福寿螺作为人侵物种会导致生态系统的________能力下降，可利用鸭子防治福寿螺与稻飞虱，从能量流动的角度看，其目的是_________________________。
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【题目】果蝇的灰体和黑体受等位基因 B， b 控制，截刚毛和正常刚毛受等位基因 D， d 控制，两对基因独立遗传。为研究体色与刚毛性状的遗传，进行了如下实验。请回答：
杂交组合 | 子代性别 | 子代表现型及数量 | |||
灰体正常刚毛 | 黑体正常刚毛 | 灰体截刚毛 | 黑体截刚毛 | ||
灰体正常刚毛雌性×黑体正常刚毛雄性 | 雌性 | 49 | 49 | 50 | 49 |
雄性 | 100 | 99 | 0 | 0 | |
灰体截刚毛雌性×灰体正常刚毛雄性 | 雌性 | 0 | 0 | 151 | 49 |
雄性 | 149 | 50 | 0 | 0 | |
（1）黑体是________性状，控制刚毛性状遗传的基因_________（填位于常染色体或位于X 和 Y 染色体的同源区段或仅位于 X 染色体）上。组合二中的亲本雄果蝇的基因型为_______________。
（2）截刚毛雄果蝇体细胞中最多有____个截刚毛基因。
（3）请写出组合一亲本雄果蝇与组合二亲本雌果蝇杂交产生后代的遗传图解。___________________
（4）组合一中的 F1 果蝇群体中，d 的基因频率是_________。让组合一 F1 雌雄果蝇随机交配，后代灰体正常刚毛雌果蝇的基因型有_________种，其中 BbXDXd 占的比例为_________。
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【题目】图为不同培养阶段酵母菌种群数量、葡萄糖浓度和乙醇浓度的变化曲线，请回答下列问题：
(1) 曲线AB段酵母菌呼吸发生的场所是_____；曲线BC段酵母菌呼吸的方式为_________。
(2) 酵母菌种群数量从C点开始下降的主要原因除葡萄糖大量消耗外，还有_____、_____。
(3) 在T1一T2时段，单位时间内酵母菌消耗葡萄糖量迅速增加的主要原因有________、___________。
(4) 某同学在T3时取样，统计的酵母菌种群数量明显高于D对应的数量，原因可能有__________、____________和用血球计数板计数时出现错误等。
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【题目】图甲是用来测定某绿色植物相关生理过程的实验装置，请据图回答：
（1）若用该装置来探究植物的细胞呼吸，则需要对装置进行________处理，处理后，若各种条件都一定且适宜，发现实验中红墨水滴向左移动，则表明植物__________，随着实验时间的延长，请预测红色墨水滴的移动状态____________________。
（2）若用该装置来探究温度对植物光合作用的影响，除增加光照外，装置还需要改动的是_________；图乙是用改动后的装置在适宜光照条件下测得的温度与光合作用速率和呼吸作用速率的变化关系曲线，由图可知：
①光合作用和呼吸作用都受温度的影响，其中最适合植物生长的温度是_____；在温度为 40℃的条件下，植物的实际光合速率为___。
②在温度为 55℃条件下，植物细胞呼吸消耗的氧气来源是_______。
③若温度保持在 20℃的条件下，长时间每天交替进行 14h 光照、10h 黑暗，植物能否正常生长？_____（填“能”或“不能”）。
④为保证实验结果的准确性，本实验还需设置对照组，对照组设置情况是________。
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【题目】果蝇卷翅基因 A 是 2 号染色体（常染色体）上的一个显性突变基因，其等位基因 a 控制野生型翅型，卷翅基因 A 纯合时致死。
（1）研究者发现 2 号染色体上的另一纯合致死基因 B，从而得到“平衡致死系”果蝇，其基因与染色体关系如图。图中同源染色体上的 2个DNA分子碱基序列是否相同？______该品系的雌雄果蝇互交（不考虑交叉互换和基因突变），其子代中杂合子的概率是______；子代与亲代相比，子代 A 基因的频率______（上升/下降/不变）。
（2）欲利用 “平衡致死系”果蝇来检测野生型果蝇的一条 2 号染色体上是否出现决定新性状的隐性突变基因，DD 和 Dd 不影响翅型，dd 决定新性状翅型。可做下列杂交实验（不考虑杂交过程中的交叉互换及新的基因突变）：
实验步骤：P“平衡致死系”果蝇（♀）×待检野生型果蝇（♂）
F1 选出卷翅的雌雄果蝇随机交配
F2 ？
预期实验结果并得出结论：
F2 代的表现型及比例为_____________________，说明待检野生型果蝇的 2 号染色体上有决定新性状的隐性突变基因。
F2 代的表现型及比例为_______________________，说明待检野生型果蝇的 2 号染色体上没有决定新性状的隐性突变基因。
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【题目】下列实验程序不正确的是（ ）
A.蔬菜加工+泡菜盐水→加调料、装坛
泡菜
B.挑选葡萄、冲洗、榨汁果醋
果酒
C.动物组织
制备细胞悬液→原代培养→传代培养
D.离体细胞消毒、接种
愈伤组织
试管苗
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【题目】如图是某细胞在某项生命活动的前后，几种生物膜面积的变化图。该过程中不可能合成的下列物质是（ ）
A.抗体
B.性激素
C.抗原-MHC复合体
D.胰蛋白酶
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【题目】Bt基因即苏云金芽孢杆菌（Badcilusthuringiensis）基因，其表达产物伴胞晶体是一种毒性很强的蛋白质晶体，能使一些鳞翅目害虫瘫痪致死。如图为培养转Bt基因试管苗的基本操作过程。
（1）Bt基因可从构建的Bt基因组文库中获取，也可以从其cDNA文库中获取，后者获取的基因与前者的区别是______（填“含有”或“不含有”）启动子。若目的基因满足______条件时，也可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。
（2）图中用到Ti质粒作为载体将Bt基因送入受体细胞中，质粒DNA分子上有一个至多个限制酶切割位点，其作用是______。基因表达载体的组成包括__________________________。
（3）步骤Ⅳ中产生的细胞团称为______，步骤Ⅳ和Ⅴ过程要注意控制培养基中______的浓度比例，以便获得幼苗。
（4）生态工程是实现循环经济的最重要手段之一，所谓循环经济，是使一个系统产出的污染物，能够成为本系统或者另一个系统的生产原料，从而实现______。我国西北的一些地区年降雨量很小，只适宜种植少数的草本植物，但却被硬性规定种植转Bt基因的植物，结果造成减产。这个案例主要违背了生态工程的______原理。
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