下面是烟草叶片原生质体分离和培养的流程图:请回答:(1)酶解时.在纤维素酶和果胶酶的混合液中.还需添加来提高混合液的渗透压.以利于获得完整的原生质体．(2)获得原生质体后.可用方法检测原生质体是否存活．然后将原生质体制成悬浮液.滴加在上.用显微镜观察并计数．要判定原生质体是否已形成细胞壁.可用方法鉴别．(3)欲通过原生质体培养得到愈伤组织.从培养基� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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下面是烟草叶片原生质体分离和培养的流程图：

请回答：
（1）酶解时，在纤维素酶和果胶酶的混合液中，还需添加

来提高混合液的渗透压，以利于获得完整的原生质体．
（2）获得原生质体后，可用

方法检测原生质体是否存活．然后将原生质体制成悬浮液，滴加在

上，用显微镜观察并计数．要判定原生质体是否已形成细胞壁，可用

方法鉴别．
（3）欲通过原生质体培养得到愈伤组织，从培养基的成分考虑，配制培养基时需要注意的主要方面有哪些？

．

考点：植物培养的条件及过程

专题：

分析：植物体细胞杂交是首先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得原生质体；用物理法（离心、振动、电刺激）或者化学法（聚乙二醇）诱导细胞融合，获得融合的原生质体；原生质体再生出细胞壁，获得杂种细胞；杂种细胞经过脱分化和再分化获得杂种植株．

解答： 解：（1）在获得植物原生质体时，需在0.5～0.6mol/L的甘露醇溶液环境（较高渗透压）下用纤维素酶和果胶酶混合液处理实验材料，将细胞壁消化除去，获得球形的原生质体．
（2）获得原生质体后可用红墨水染色法检测，因为生活状态的原生质体细胞膜具有选择透过性，原生质体不会被染上颜色，但如果原生质体死亡，由膜的选择透过性丧失，原生质体会被染成红色；对原生质体进行显微计数，必须将原生质体制成的悬浮液滴加在血细胞计数板上；可用质壁分离实验来检测原生质体是否已经形成细胞壁．
（3）要将原生质体培养成愈伤组织，配置培养基时需要注意营养物质的适当配比和植物生长调节剂的适当配比．
故答案为：
（1）甘露醇
（2）红墨水染色血细胞计数板质壁分离
（3）营养物质的适当配比和植物生长调节剂的适当配比

点评：本题考查原生质体分离和培养，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力．要注意，目前应用最广泛的是聚乙二醇（PEG），因为它易得、简便，且融合效果稳定．PEG的促融机制尚不完全清楚，它可能引起细胞膜中磷脂的酰键及极性基团发生结构重排．

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、

．
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．
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黄色鹦鹉；

绿色鹦鹉；

蓝色鹦鹉；

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．
（2）若生物为小鼠，其毛色的黄与灰、尾形的弯曲与正常各为一对相对性状，分别由等位基因A、a和B、b控制，在毛色遗传中，具有某种纯合基因型的合子不能完成胚胎发育．从鼠群中选择多只基因型相同的雌鼠作母本，多只基因型相同的雄鼠作父本，杂交所得F₁的表现型及比例如下表所示，请分析回答：

黄毛尾弯曲

黄毛尾正常

灰毛尾弯曲

灰毛尾正常

♂

♀

①控制小鼠尾形遗传的基因位于

染色体；亲本中母本的基因型是

．
②若只考虑小鼠毛色的遗传，让F₁代的全部雌雄个体随机交配，在得到的F₂代群体中，a基因的基因频率为

．
③让F₁代的全部黄毛尾正常雄鼠与黄毛尾弯曲雌鼠杂交，F₂代中灰毛尾弯曲雄鼠占的比例为

．
（3）若该生物为番茄，有一种三体，其6号染色体的同源染色体有三条（比正常的番茄多一条）．三体在减数分裂联会时，3条同源染色体中的任意2条随意配对联会形成一个二价体，另1条同源染色体不能配对而形成一个单价体．减数第一次分裂的后期，组成二价体的同源染色体正常分离，组成单价体的1条染色体随机地移向细胞的任何一极，而其他如5号染色体正常配对、分离（如图所示），Bb基因在第6号染色体上．
①从变异的角度分析，三体的形成属于

，设三体番茄的基因型为AABBb，则其产生的花粉可能有的基因型为

，其根尖分生区一细胞连续分裂两次所得到的子细胞的基因型为

．
②以马铃薯叶型（bb）的二倍体番茄为父本，正常叶型的三体番茄为母本（纯合体）进行杂交得到F₁，再让F₁的三体正常叶型植株与二倍体马铃薯叶型植株杂交得到F₂，则F₂代植株叶型表现为马铃薯叶型的比例为

．

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