Question

【题目】人的HPRT基因缺陷（HPRT-）和小鼠的TK基因缺陷（TK－）细胞在HAT培养基中都不能存活。杂种细胞在分裂中随机丢失人的染色体，但保留所有的鼠染色体。因此，利用人—鼠细胞融合技术可以将人类基因定位于特定的染色体上。

（1）将人的HPRT－细胞与小鼠的TK－细胞用________促进融合，融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的_______细胞，称为杂交细胞。然后培养在________培养基（HAT）中，最终筛选出人—鼠杂种细胞。细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使____________成为可能。

（2）将存活下来的杂种细胞进行单克隆培养，获得不同的细胞株，用碱性染料染色后镜检，观察结果如下：

细胞株编号	1	2	3	4	5	6
所含人染色体编号	11，14， 17，22	7，11， 14，17	5， 7， 17，21	2， 9， 11，17	5，17， 18，20	2， 5， 17，19

由此可推测________基因在________染色体上。

（3）如果要确定人鸟苷酸（UMP）激酶基因所在染色体，应选择UMP激酶缺陷的________（填“人”或“鼠”）细胞与相应细胞杂交，这样的方法________（填“能”或“不能”）对小鼠的基因进行定位。

（4）经过基因测序发现UMP激酶缺陷是因为编码它的基因中部的部分碱基替换造成的，结果可能导致（_____）

A.转录不能进行

B.合成的蛋白质分子缺少部分氨基酸序列

C.合成的蛋白质分子增加部分氨基酸序列

D.合成的蛋白质分子氨基酸数目不变

Answer 1

【答案】 PEG（或灭活病毒） 单核 选择 远缘杂交 TK 17 鼠 不能 BD

【解析】

根据题干信息已知，人的HPRT基因缺陷（HPRT-；TK+）和小鼠的TK基因缺陷（TK－；HPRT+）细胞在HAT培养基中都不能存活。据图分析，将人的HPRT基因缺陷（HPRT-）和小鼠的TK基因缺陷（TK－）细胞融合，形成融合细胞（HPRT+；TK+），在HAT培养基上让其生长和分裂。

（1）将人的HPRT-细胞与小鼠的TK-细胞用PEG（或灭活病毒）促进融合，图中显示融合细胞的细胞核也发生了融合，形成了单核的融合细胞（杂交细胞）；然后培养在选择培养基（HAT）中，最终筛选出人-鼠杂种细胞。细胞融合技术能够突破有性杂交方法的局限，使得远缘杂交成为可能。

（2）将存活下来的杂种细胞进行单克隆培养，获得不同的细胞株，用碱性染料（或龙胆紫或醋酸洋红）染色后镜检。根据表格中的数据分析可知，所有的细胞株都含有17号染色体，据此推测TK基因应该在17染色体上。

（3）如果要确定人鸟苷酸（UMP）激酶基因所在染色体，应选择UMP激酶缺陷的鼠细胞与相应细胞杂交，这样的方法不能对小鼠的基因进行定位。

（4）经过基因测序发现UMP激酶缺陷是因为编码它的基因中部的部分碱基替换造成的，由于改变发生在基因的中部，因此不会导致转录不能发生，A错误；由于基因中部的部分碱基发生了替换，可能使得终止子提前，进而导致合成的蛋白质分子缺少部分氨基酸序列，B正确；碱基发生替换发生在中间，不会导致末端的终止子改变，因此蛋白质的氨基酸序列不会增加，C错误；碱基替换后可能导致氨基酸的种类发生改变，而合成的蛋白质分子氨基酸数目不变，D正确。