Question

甲型血友病患者血液中因缺乏凝血因子Ⅷ常发生出血不止的现象，危及患者生命，而救治的主要措施就是给他输入凝血因子Ⅷ．运用基因工程及胚胎工程知识回答与凝血因子Ⅷ的生产相关的问题．
（1）基因工程中培养能产生人凝血因子Ⅷ的转基因羊时，科学家将人凝血因子Ⅷ的基因与羊乳腺蛋白基因的

 

等调控组件重组在一起，通过

 

方法，导入羊的受精卵中．
（2）在制作受精卵时，活体采卵前要先用

 

对母羊进行处理，促进其多排卵．在受精前，要对精子进行获能处理，常用的方法有培养法和

 

．
（3）完成体外受精后，受精卵还要进行体外培养，培养液的主要成分除无机盐和有机盐外，还需添加

 

等营养成分，以及

 

等物质．
（4）为提高转基因羊的繁育效率，常采用

 

的方法获得多个相同的胚胎．
（5）培育成功的转基因羊在性成熟后，就可形成一个以乳腺为基础的人凝血因子Ⅷ发生器，请写出乳腺细胞中人凝血因子Ⅷ基因表达的全过程：

 

最后从羊奶中分离出人凝血因子Ⅷ，再进一步加工生产，满足临床需要．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,动物细胞与组织培养过程,胚胎分割移植

专题：

分析：1、基因表达载体的构建是基因工程的核心．目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用．基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因．
2、将目的基因导入受体细胞，如受体细胞是植物细胞，常用农杆菌转化法（约80%的转基因植物都是用这种方法获得的），具体过程：目的基因插人Ti质粒的T-DNA上→农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达．另外，还可用基因枪法和花粉管通道法；如果受体细胞是动物细胞，常用显微注射技术；如果受体细胞是微生物细胞，用Ca2+处理细胞→感受态细胞→表达载体与感受态细胞混合（在缓冲液中）→一定温度下，感受态细胞吸收DNA分子，完成转化．
3、胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等，经移植获得同卵双胚或多胚的技术．来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一．

解答： 解：（1）基因表达载体的组成有目的基因+启动子+终止子+标记基因．受体是动物细胞时，可以通过行为注射法转化目的基因．
（2）活体采卵时，先用促性腺激素处理母羊，使其超数排卵．精子必须先要获能，才可以与成熟的卵母细胞受精，具体获能的方法有化学培养法和培养法．
（3）受精卵移入发育培养液中继续培养，培养液成分一般都比较复杂，除了含有各种无机盐、有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸、激素等外，还要添加血清等物质．
（4）胚胎分割采用机械方法将早期胚胎切割，经移植获得同卵双胚或多胚，从而获得较多基因型相同的个体．
（5）基因表达遵循中心法则，包括转录和翻译两个过程，如 （人凝血因子VIII基因）DNA→转录mRNA→翻译蛋白质（人凝血因子VIII）．
故答案为：
（1）启动子、终止子    显微注射
（2）促性腺激素    化学诱导法
（3）维生素、激素、氨基酸、核苷酸      血清
（4）胚胎分割移植
（5）（人凝血因子VIII基因）DNA→转录→mRNA→翻译→蛋白质（人凝血因子VIII）

点评：本题综合考查了胚胎工程和基因工程的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系；理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力．