Question

12．分析有关微生物的资料，回答问题．
烧伤病人容易感染绿脓杆菌，引起化脓性感染．比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素都是非常经典的抗绿脓杆菌的药物．临床使用时，有时需要做细菌耐药实验．实验时，从病人身上获取少量样本，按下列一定的实验步骤操作，以确定病人体内的绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性．获取绿脓杆菌单菌落
（1）配制培养基．主要步骤是计算→称量→溶化→调pH和灭菌→分装→倒平板．可用牛肉膏蛋白胨培养基培养绿脓杆菌，其培养基中的是否还需加入生长因子？理由是无需，因为牛肉膏中已含有某些生长因子．
固体培养基中常用琼脂作凝固剂，理想的凝固剂应具有的特点是BDE．（多选）
A．含有某些特殊的营养物质
B．消毒灭菌不会改变其特性
C．能被微生物分解和利用
D．微生物生长温度范围内保持固体状态
E．配制方便且有良好的透明性
（2）图2所示接种方法为划线法，这种方法的主要目的是使接种物逐步稀释（或单个菌落）．在接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是检测培养基平板灭菌是否合格．   检测绿脓杆菌对不同抗生素的敏感度
（3）分析图3中的实验结果，说明绿脓杆菌对比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素类抗生素敏感，判断的理由是都有抑菌圈．如果你是医生，建议患者最好选用美罗培南抗生素．

Answer 1

分析 根据题意：该实验的目的是探究病人体内的绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性，实验的自变量的抗生素的种类，培养基的基本成分、培养条件等属于无关变量，绿脓杆菌的生长状况是因变量；实验的原理是将绿脓杆菌稀释液涂布到固体培养基表面，使其均匀生长，布满平板．将分别含等剂量的比阿培南、美罗培南、头抱菌素和碳青霉烯类抗生素的同大小的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，适宜条件培养一段时间，如果抗生素对于该菌具有抑制作用，该菌在含有抗生素的地方不能正常的生长，会出现透明圈，根据透明圈的大小判断抑菌效果，透明圈越大，抑菌效果越好．

解答 解：（1）微生物培养基的制作的一般过程为：计算→称量→溶化→调pH和灭菌→分装→倒平板．牛肉膏蛋白胨培养基中含有生长因子，可以用来培养绿脓杆菌．培养基中理想的凝固剂应具有的特点是消毒灭菌不会改变其特性，微生物生长温度范围内保持固体状态和配制方便且有良好的透明性，故选：BDE．
（2）据图2分析，图示可以表示平板划线法接种．此方法的主要目的是使接种物通过划线逐步稀释（或单个菌落）．微生物培养中的空白培养的目的是检测培养基平板灭菌是否合格．
（3）据图3分析，含有比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素的抑菌圈较大，说明绿脓杆菌对这些抗生素有敏感性．绿脓杆菌对美罗培南最敏感，是该病人首选的抗生素．
故答案为：
（1）调pH和灭菌    无需，因为牛肉膏中已含有某些生长因子   BDE
（2）划线   逐步稀释（或单个菌落）    检测培养基平板灭菌是否合格
（3）比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素   都有抑菌圈    美罗培南

点评 对于微生物实验室培养的掌握、应用相关知识解决实际问题、并分析实验结果获取结论是本题考查的重点．解答本题的关键是判断出如果抗生素对于该菌具有抑制作用，该菌在含有抗生素的地方不能正常的生长，会出现透明圈，根据透明圈的大小判断抑菌效果．