Question

【题目】利用紫外线诱变选育高产β－胡萝卜素的三孢布拉霉负菌，未突变菌不能在含有一定浓度的β－紫罗酮的培养基上生长，菌体随β－胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色。图甲为选育及提取获得β－胡萝卜素流程，请回答下列问题：

（1）用紫外线照射三孢布拉霉负菌的目的是__________________。为选出高产突变菌种，还应在培养基中添加__________________。

（2）某同学进行正确的接种操作后，平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是______________（填“稀释涂布平板法”或“平板划线法”）；由于________，所以培养基上只有少数菌能生长形成菌落。

（3）进行③过程时，应选取________色的菌落接种至液体培养基。过程⑥是________，用纸层析法鉴定提取的胡萝卜素粗品。

（4）将萃取的胡萝卜素样品与β－胡萝卜素标准样品层析后进行比对，结果如图，从图中分析可知，色带________为β－胡萝卜素。

Answer 1

【答案】诱导其发生基因突变 一定浓度的β-紫罗酮 稀释涂布平板法 基因突变频率低，只有少数突变的菌才能生长繁殖 橙红 浓缩 I

【解析】

1、胡萝卜素的提取：
（1）胡萝卜素的性质：胡萝卜素是橘黄色结晶，化学性质比较稳定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机溶剂。
（2）胡萝卜素的提取来源
提取天然胡萝卜素的方法主要有：一是从植物中提取；二是从大面积养殖的岩藻中获得；三是利用微生物的发酵生产。
（3）萃取剂：最适宜作胡萝卜素萃取剂的是石油醚。
（4）实验流程：
胡萝卜→粉碎→干燥→萃取（石油醚）→过滤_→浓缩→胡萝卜素→鉴定（纸层析法）。

2、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着划线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

（1）利用紫外线处理三孢布拉霉负菌的目的是使其发生基因突变。由于未突变菌不能在含有一定浓度的β-紫罗酮的培养基上生长，所以为选出高产突变菌种，还应在培养基中添加一定浓度的β-紫罗酮。

（2）乙图固体平板培养基中菌落均匀分布，该同学的接种方法是稀释涂布平板法；只有少数菌能生长形成菌落的根本原因是基因突变频率低和不定向性，只有少数基因突变的菌才能生长、繁殖。

（3）菌体随β-胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色，因此选择β-胡萝卜素含量高的菌株时，应选取橙红色的菌落接种至液体培养基。过程⑥是浓缩，用纸层析法鉴定提取的胡萝卜素粗品。

（4）据图分析，色素带Ⅰ与标准样色素带一致，故其为β胡萝卜素。