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    聚合酶链式反应中用到的Taq酶作用的适宜温度大约是

        A. 55～60℃    B. 70~75℃   C. 90~95℃   D. 37℃

     

    【答案】

    B

    【解析】Taq酶起作用是在DNA合成过程中即延伸过程中，温度为70~75℃，所以B选项正确。

     

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    科目：高中生物 来源：2015届吉林省高二上期期末考试生物卷（解析版） 题型：综合题

    PCR技术是一种DNA的扩增技术，操作步骤简介如下：

    第一步：准备反应式溶液和模块DNA。

    A．配制聚合酶链式反应溶液：

    配方：按如下比例进行配制：蒸馏水100、缓冲溶液15、氯化镁溶液8、引物13、引物23、DNA聚合酶、矿物油1(防止聚合酶在冻结时受伤害)；dATP、dGTP、dCTP、dTTP每一种各加5。

    B．准备要拷贝的DNA：

    提取准备要拷贝的DNA

    (如可以用一牙签轻刮口腔内壁，将牙签放入蒸馏水中摇动。加热蒸馏水沸腾，使细胞破碎放出DNA。用离心机离心后，去除蒸馏水中较大的细胞碎片。这时上清液中就有了较纯的DNA。)

    第二步：聚合酶链式反应。

    ①将要拷贝的DNA“B”放入反应液“A”中。

    ②水浴加热。首先，94 ℃，使DNA双螺旋解旋，历时1 min；然后，56 ℃，使引物结合到DNA上，历时90 s；最后，72 ℃，用聚合酶使DNA拷贝，历时90 s。③重复步骤②。每重复一次，即完成一次拷贝。

    分析回答下列问题：

    (1)以上材料可以说明（　　）

    A．DNA的复制必须在活细胞内才能完成

    B．DNA能指导蛋白质的合成

    C．在合适的条件下，非细胞环境也能进行DNA复制

    D．PCR技术是一种无性生殖技术

    (2)为什么要加入两种引物。________________________________________________________________________

    ________________________________________________________________________。

    引物的作用是什么？________________________________________________________________________

    ________________________________________________________________________。

    (3)PCR技术中用到的DNA聚合酶，取自生长在温泉中的一种细菌，就PCR技术来讲，你认为使用这种细菌中提取的酶较普通的动植物体内提取的DNA聚合酶的优势是________________________________________________________________________

    ________________________________________________________________________。

     

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    科目：高中生物 来源： 题型：单选题

    聚合酶链式反应中用到的Taq酶作用的适宜温度大约是


    1. A.
      55～60℃
    2. B.
      70~75℃
    3. C.
      90~95℃
    4. D.
      37℃

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    科目：高中生物 来源： 题型：阅读理解

    回答下列有关基因工程和克隆技术的问题。（10分）

    2006年12月22日，我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出，这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答：

    63、说出绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程中用到了哪些生物工程技术？           　

    利用了哪些原理？                      （本题答案从下列所给选项中选择填写）

    ①转基因技术；②细胞核移植技术；③胚胎移植技术；④干细胞技术；⑤动物细胞培养技术

    ⑥基因突变；⑦基因重组；⑧动物细胞核具有全能性；⑨动物细胞具有全能性

    64、过程①②中必需用到的酶分别是                和                 。绿色荧光蛋白基因之所以能与质粒重组，原因是                                               。

    65、早期胚胎的培养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及               等物质。

    通过上图中过程①的方法获取目的基因的数量是有限的，要获得大量的绿色荧光蛋白基因可以利用PCR技术。PCR扩增反应（如下图所示）中加入的TaqDNA聚合酶能在接近沸点的条件下，发挥延伸DNA子链的作用，将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上。请回答：

     


    PCR（DNA聚合酶链式反应）技术示意图：

    PCR（DNA聚合酶链式反应）技术示意图
     
     


    66、你认为TaqDNA聚合酶一定是从下列哪种生物体细胞中分离提取的？        

    A．水母细胞         B．猪胎儿成纤维细胞   　C．极端嗜热菌     D．大肠杆菌

    67、下面的表达式不能反映TaqDNA聚合酶的功能，为什么？                           。

     


    68、用限制酶EcoRV、MboI单独或联合切割同一种质粒，得到DNA片段长度如下图（1kb即1000个碱基对），请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、MboI的切割位点和标出碱基对数。（2分）

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