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(13分)图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有Msp Ⅰ、BamH Ⅰ、Mbo Ⅰ、Sma Ⅰ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题:

(1)图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由______连接。

(2)若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段,产生的末端是_______末端,其产物中有_____种不同的DNA片段。

(3)若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d。从杂合子分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶Sma Ⅰ完全切割,产物中共有_____种不同DNA片段。

(4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是_________。在导入重组质粒后,为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加_____的培养基进行培养。

(5)假设D基因是抗棉铃虫的Bt毒蛋白基因,将D基因转入棉花培养成转基因抗虫棉,如果__________________和_____________________,即可分别在分子水平和个体水平上说明抗虫基因已成功表达。

 

【答案】

(1)脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖   (2)平  3   (3)4   (4)BamH I 抗生素B  

(5)在棉花细胞内检测到Bt毒蛋白   棉花表现出抗棉铃虫的性状(棉铃虫吃了转基因棉的枝叶会中毒而死)

【解析】

试题分析:有DNA的结构可知一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖连接,由图知限制酶SmaⅠ切割产生的末端是平末端,其产物为537bp,790bp,661bp三种。基因D切割产物为537bp,790bp,661bp三种,基因d碱基对被替换后,替换部位无法被限制酶SmaⅠ切割,故产生661bp和1327bp两种片段,综上所述,为4种片段。由图可知形成重组质粒应选用的限制酶是BamH I,抗生素A基因已被破坏,所以培养基中应加抗生素B。将D基因转入棉花培养成转基因抗虫棉,如果在棉花细胞内检测到Bt毒蛋白和棉花表现出抗棉铃虫的性状(棉铃虫吃了转基因棉的枝叶会中毒而死)即可分别在分子水平和个体水平上说明抗虫基因已成功表达。

考点:基因工程

点评:本题考察了学生的理解能力和识图能力,难度较大,对于限制酶位点变化前后切割的不同,分析不到位是本题失分的主要原因。

 

练习册系列答案
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图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。下列不正确的是( )

A. 图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖连接
B. 若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段,其产物长度为537bp、790bp、661bp
C.若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后形成重组质粒,那么应选用的限制酶是MboI
D.在导入重组质粒后,为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加相应抗生素的培养基进行培养

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(13分)图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有Msp Ⅰ、BamH Ⅰ、Mbo Ⅰ、Sma Ⅰ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题:

(1)图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由______连接。
(2)若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段,产生的末端是_______末端,其产物中有_____种不同的DNA片段。
(3)若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d。从杂合子分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶Sma Ⅰ完全切割,产物中共有_____种不同DNA片段。
(4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是_________。在导入重组质粒后,为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加_____的培养基进行培养。
(5)假设D基因是抗棉铃虫的Bt毒蛋白基因,将D基因转入棉花培养成转基因抗虫棉,如果__________________和_____________________,即可分别在分子水平和个体水平上说明抗虫基因已成功表达。

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科目:高中生物 来源:2014届福建厦门一中高二下期期中生物卷(解析版) 题型:综合题

(12分)图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有Msp Ⅰ、BamH Ⅰ、Mbo Ⅰ、Sma Ⅰ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题:

(1)若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段,产生的末端是       末端,其产物长度为                                          

(2)若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d。从杂合子分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶Sma Ⅰ完全切割,产物中共有       种不同DNA片段。

(3)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是         。在导入重组质粒后,为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加                 的培养基进行培养。经检测,部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达,其最可能的原因是                           

                                                           

 

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(1)若用限制酶Sma I完全切割图1中所示DNA片段,则其产物有______种,长度分别为______。

(2)若将图2中质粒和目的基因通过同种限制酶处理后进行连接,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是______。

(3 )在导入重组质粒后,为了筛选出含重组质粒的水稻细胞,需配置相应培养基,其中添加的碳源是______,目的是提供营养和______。另外,培养基中除了含有必要营养物质、琼脂和激素外,一般还需要添加______(抗生素A/抗生素B),该培养基从用途上看属于______培养基。

(4)在培养过程中,除必要的温度、光照和氧气等外界条件外,成功的另一个关键是操作过程必须保证无菌,镊子等器械及培养基都可使用的灭菌方法是______。

 

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