Question

1975年Kohler和Milstein的单克隆抗体技术在生产和使用抗体方面开创了新纪元，如图示单克隆抗体制备流程阶段示意简图．请据图回答下列问题：
（1）该技术是在动物细胞培养技术和

 

技术的基础上发展起来的．
（2）图10中细胞A体外培养不具有分裂能力，但能分泌

 

，细胞B体外培养能够

 

．
（3）动物细胞融合常用的方法是

 

．
（4）细胞融合是随机的过程，在HAT培养基中培养，要筛选出

 

细胞．在细胞培养过程
中，为了促进细胞摄取葡萄糖，常向培养液中加入

 

（激素）．
（5）培养2周后，即测定培养细胞的特征，筛选出

 

的细胞置于不同孔内（如图所示）培养．此操作前要将培养细胞稀释到7～10个细胞/ml，每孔滴入0.1ml细胞稀释液，其目的是

 

．
（6）要获得大量的单克隆抗体，可对获得的杂交瘤细胞进行

 

培养．

Answer 1

考点：单克隆抗体的制备过程

专题：

分析：单克隆抗体的制备过程中利用了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术，在制备的过程中的两次筛选考生必须识记．由于细胞融合的结果可能有三种情况：B淋巴细胞自身融合细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞、杂交瘤细胞，因此需要特定的选择培养基进行筛选．

解答： 解：（1）单克隆抗体的制备技术首先要利用动物细胞融合将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，然后要利用动物细胞培养技术对融合的细胞进行筛选，筛选出杂交瘤细胞，再进行培养．
（2）图中细胞A为经过免疫的B淋巴细胞，该细胞不具有分裂能力，但能分泌特异性抗体．细胞B为骨髓瘤细胞，该细胞能够无限增殖．
（3）动物细胞融合常用的方法有物理法（离心、震动、电刺激）、化学法（PEG）、生物法（灭活的病毒）．
（4）HAT培养基是选择培养基．由于细胞融合的结果可能有三种情况：B淋巴细胞自身融合细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞、杂交瘤细胞，因此需要用HAT培养基筛选出杂交瘤细胞．胰岛素具有促进组织细胞加速摄取利用葡萄糖的作用，因此在细胞培养过程中，常向培养液中加入胰岛素．
（5）培养2周后，筛选出能产生特异性抗体的骨髓瘤细胞细胞置于不同孔内培养．此操作前要将培养细胞稀释到7～10个细胞/ml，每孔滴入0.1ml细胞稀释液，其目的是 保证每个孔内不多于一个细胞，达到单一细胞培养以保证抗体的纯度的目的．
（6）要获得大量的单克隆抗体，可对获得的杂交瘤细胞注射到小鼠的腹腔中进行体内培养，也可利用动物细胞培养技术进行体外培养．
故答案为：
（1）动物细胞融合            
（2）分泌特异性抗体    无限增殖
（3）PEG（灭活的病毒、电刺激）     
（4）杂交瘤      胰岛素
（5）特异性分泌抗X蛋白抗体的     保证每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的（单一细胞培养以保证抗体的纯度）
（6）体外或体内（体外和体内、体外、体内）

点评：本题考查了单克隆抗体的制备过程和动物细胞培养等相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力．