Question

1．材料Ⅰ：家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力．将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可提取干扰素用于制药．材料Ⅱ：毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关．获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图．

请依材料所给出的信息分析回答下列问题：
（1）在基因工程操作程序中，基因表达载体的构建是基因工程的核心，为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的启动子和终止子之间．
（2）采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞．该PCR反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液（含Mg²⁺）、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、干扰素基因特异的DNA引物对和热稳定DNA聚合酶．
（3）据材料Ⅱ，在过程②中，将成纤维细胞置于5%CO₂的气体环境中，CO₂的作用是维持培养液的pH．在过程③中，用促性腺激素处理以获取更多的卵（母）细胞．成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行去核处理．
（4）从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是早期胚胎培养．在胚胎移植前，通过胚胎分割技术可获得较多胚胎．

Answer 1

分析 根据题意和图示分析可知：图示表示获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程图，其中①表示基因表达载体的构建过程，该过程需要限制酶和DNA连接酶；②表示动物细胞培养过程，该过程需要采用胰蛋白酶处理组织块以获得单个细胞；③表示卵母细胞的采集和培养过程．
基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定．其中基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤，该载体是由目的基因、标记基因、启动子和终止子组成的．

解答 解：（1）在基因工程操作程序中，基因表达载体的构建是基因工程的核心．基因表达载体的组成包括：目的基因、标记基因、启动子、终止子．来自cDNA文库的干扰素基因片段是通过逆转录得到的，无启动子和终止子等，将其插入在表达载体的启动子和终止子之间才能构成完整的基因并在受体细胞内表达．
（2）PCR反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液（含Mg²⁺）、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、干扰素基因特异的DNA引物对和热稳定DNA聚合酶．
（3）在动物细胞培养过程中，将成纤维细胞置于5%CO₂的气体环境中，CO₂的作用是维持培养液的pH．在卵母细胞的采集和培养过程中，用促性腺激素处理以获取更多的卵母细胞，成熟卵母细胞在核移植前需要进行去核处理．
（4）从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是早期胚胎培养．在胚胎移植前，通过胚胎分割技术可获得较多胚胎．
故答案为：
（1）基因表达载体的构建   启动子  终止子
（2）干扰素基因特异的DNA引物对     热稳定DNA聚合酶（Taq酶）
（3）维持培养液的pH   促性腺激素   去核
（4）早期胚胎培养   胚胎分割

点评 本题结合转基因山羊培育过程图，考查基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记所列知识要点，能准确判断图中各过程的名称，并能在较简单的情境中使用，属于考纲识记层次的考查．