Question

【题目】【山西大学附属中学2017届高三下学期3月模块诊断理综生物试题】生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的。请回答下列问题：

（1）培养大肠杆菌所用的LB培养基一般用________法灭菌。检验大肠杆菌的含量时，通常将水样用_________进行一系列的梯度稀释。

（2）将稀释后的水样分别接种到LB固体培养基，_______（填“正置/倒置”）于恒温培养箱，在_____℃条件进行培养。用该方法统计样本菌落数时_________（填“需要/不需要”）设置对照组。

（3）对于生活饮用水中大肠杆菌的数量统计，也可以采用滤膜法，该法是利用滤膜的直径_______（填“大于/小于”）大肠杆菌的直径，将大肠杆菌留在滤膜上进行的计数。

（4）下图表示培养和纯化大肠杆菌的部分操作步骤，下列相关叙述错误的是_____（多选）。

A．步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置

B．步骤②接种环火焰上灼烧后迅速蘸取菌液后划线

C．步骤③多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落

D．步骤④恒温培养箱培养后可用来对大肠杆菌进行计数

Answer 1

【答案】 （1） 高压蒸汽灭菌 无菌水 （2） 倒置 37 需要 （3）小于 ABD

【解析】（1）对培养基灭菌，一般都采用高压蒸汽灭菌法。为了防止其他杂菌污染，在检验大肠杆菌的含量时，通常将水样用无菌水进行一系列的梯度稀释。

（2）将稀释后的水样分别接种到LB固体培养基，倒置于恒温培养箱，在37℃条件进行培养。用该方法统计样本菌落数时需要设置对照组，主要是对比观察是否有杂菌滋生。

（3）滤膜法统计生活饮用水中大肠杆菌的数量，是利用滤膜的直径小于大肠杆菌的直径，将大肠杆菌留在滤膜上进行的计数。

（4）步骤①倒完平板后立即盖上培养皿，冷却后将平板倒过来放置，有利于表面的水分更好的挥发和防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，A错误；步骤②接种环火焰上灼烧后，应在火焰旁冷却后再蘸取菌液后划线，主要是防止高温接种环杀死菌种，B错误；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落，C正确；步骤④恒温培养箱培养后不一定可用来对大肠杆菌进行计数，因为应选择菌落数在30～300的平板进行计数，D错误。