Question

多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损．成熟的番茄果实中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜．利用基因工程减少PG基因的表达，可延长果实保质期．科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入番茄细胞中，得到转基因番茄，具体操作流程如图．据图回答下列问题：
（1）若已获取PG的mRNA，可通过

 

获取PG基因．
（2）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有

 

的培养基进行筛选，理由是

 

．
（3）将转入反向链接PG基因的番茄细胞培育成完整的植株，需要用

 

技术；其中，愈伤组织经

 

形成完整植株．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,植物培养的条件及过程

专题：

分析：基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答： 解：（1）若已获取PG的mRNA，可通过逆转录法获取PG基因．
（2）由图可知，重组质粒中含卡那霉素抗性基因而四环素抗性基因被破坏，因此用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有卡那霉素的培养基进行筛选．
（3）将转基因番茄细胞培育成完整植株需采用植物组织培养技术，其过程为转基因番茄细胞

脱分化

愈伤组织

再分化

胚状体→转基因番茄．
故答案为：
（1）逆转录法  
（2）卡那霉素    重组质粒中含卡那霉素抗性基因而四环素抗性基因被破坏
（3）植物组织培养    再分化

点评：本题结合图解，考查基因工程和植物组织培养的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤；识记植物组织培养的过程及应用，能结合图中信息准确答题．