[题目]Ⅰ．酸雨主要是大气中所含的S02造成的.研究人员为了获得用于烟气脱硫的脱硫细菌.进行了相关实验.回答下列问题:(1)采集菌种:在某热电厂烟囱周围区域采集土样.取样用的小铁铲和盛装土样的信封在使用前都需要 .将采集的土样进行稀释处理后.接种到培养基上进行培养.(2)分离目的菌:将目的菌转移到含少量无菌水的锥形瓶中.边搅拌边持续通入S02.驯� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

【题目】Ⅰ．酸雨主要是大气中所含的S02造成的。研究人员为了获得用于烟气脱硫的脱硫细菌，进行了相关实验。回答下列问题：

（1）采集菌种：在某热电厂烟囱周围区域采集土样，取样用的小铁铲和盛装土样的信封在使用前都需要____________。将采集的土样进行稀释处理后，接种到培养基上进行培养。

（2）分离目的菌:将目的菌转移到含少量无菌水的锥形瓶中，边搅拌边持续通入S02，驯化几分钟后接种到固体培养基上，待长出菌落后再重复上述步骤，并逐步延长通S02的时间，与此同时逐步降低培养基的pH。由此分离得到的目的菌具有较强的____________的能力。

（3）活菌计数:为获得大量目的菌用于生产，在培养过程中需连续取样进行计数。____________法常用来统计样品中的活菌数目。通常情况下，用此方法得到的活菌数目往往比实际数目____________（填“高”或“低”）。

（4）检测目的菌对抗生素的敏感性:取该单菌落适当稀释后的液体2滴，接种于固体培养基表面，并用___________使菌液均匀分布。在37℃培养箱中培养24小时后，将大小相同且分别含有不同抗生素的圆纸片均匀置于该平板的不同位置，再培养一段时间，结果如下图所示（圆纸片周围的白色区域表示没有菌落分布），据此实验结果推测，五种抗生素中对该菌抑制作用最强的是_____________________（答序号和名称）。

（5）菌种保存:采用平板划线法分离纯化得到了脱硫细菌，可以采用____________的方法，对菌种长期保存。

Ⅱ．“树橘柚者，食之则甘，嗅之则香”，每年的10月，正是柑橘大量上市的季节。橘子全身都是宝；不仅果肉的营养价值高，药用价值也高，其皮、核、络、叶都是“地道药材”。回答下列问题：

（1）常采用压榨法提取橘皮精油。若采取水蒸气蒸馏法提取，由于橘皮精油的有效成分会发生______；若采用水中蒸馏法又会产生_________的问题所以一般采用压榨法。

（2）提取橘皮精油的实验流程为：①石灰水浸泡→②_______→③压榨→④______→⑤静置→⑥再次过滤→橘皮油。其中，③过程一般加入相当于橘皮质量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4，其目的是利于橘皮精油___________。

（3）若想利用橘子生产果酒需要用到酵母菌。果汁发酵后是否有酒精产生，可用___________来检验。

（4）若想利用橘子生产果醋需要用到醋酸菌。醋酸菌的最适生长温度为___________。

Ⅲ．(1)如图为腐乳制作的流程示意图,请据图分析回答下列问题.

卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的,卤汤中的酒可以选用料酒、黄酒、米酒、高粱酒等,含量一般控制在12%左右；所加酒的作用之一是能使腐乳具有________________________。

（2）回答下列有关泡菜制作的习题：

制作泡菜时，为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的作用是 ___________________；泡菜制作过程中，乳酸发酵过程即为乳酸菌进行___________的过程；泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有温度、__________和__________等。

【答案】灭菌利用SO2稀释涂布平板低涂布器青霉素甘油管藏部分水解原料焦糊漂洗过滤与水分离酸性重铬酸钾30—35℃独特的香味增加乳酸菌数量无氧呼吸食盐用量腌制时间

【解析】

根据实验目的可知，实验需要获得“烟气脱硫的脱硫细菌”，因此需要使用选择培养基将该菌筛选出，即题中的“驯化”。微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养；在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。橘皮精油无色透明，主要储存在橘皮部分，由于橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解，又会产生原料焦糊问题，所以一般采用压榨法提取，其提取过程为：石灰水浸泡→漂洗→压榨→过滤→静置→再次过滤→橘皮精油。参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型．果酒制作的原理是其进行的有氧呼吸和无氧呼吸。参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。在腐乳的制作过程中，毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖氧化为乳酸。

Ⅰ．（1）为了防止杂菌的污染，取样用的小铁铲和盛装土样的信封在使用前都需要灭菌。

（2）根据驯化过程可知，驯化过程中不断通入SO2，并且延长时间，与此同时逐步降低培养基的pH，因此分离得到的脱硫细菌具有较强的利用SO2和耐酸的能力。

（3）稀释涂布平板法常用来统计样品中的活菌数目；由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此用此计数方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。

（4）用稀释涂布平板法接种时所用的涂布工具是涂布器；据图分析，青霉素圆纸片周围的透明圈最大，说明五种抗生素中对该菌抑制作用最强的是青霉素。

（5）长期保存菌种一般采用甘油管藏法，即将菌液与灭菌的甘油混匀，放在-20℃的冰箱中保存一年。

Ⅱ．（1）提取橘皮精油时，若采取水蒸气蒸馏法提取，橘皮精油的有效成分会发生部分水解；若采用水中蒸馏法又会产生原料焦糊的问题，因此提取橘皮精油常常用压榨法。

（2）提取橘皮精油的实验流程为：石灰水浸泡→漂洗→压榨→过滤→静置→再次过滤→橘皮油，其中压榨步骤加入相当于橘皮质量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4的目的是让橘皮精油与水分离。

（3）酵母菌无氧呼吸产生的酒精可以用酸性重铬酸钾进行检测。

（4）醋酸菌生长的最适宜温度为30-35℃。

Ⅲ．（1）腐乳制作过程中，卤汤中加入料酒可以抑制微生物的生长，同时能使腐乳具有独特的香味。

（2）陈泡菜液含有较多的乳酸菌，可为泡菜发酵提供更多的菌种，因此为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液；乳酸发酵是利用了乳酸菌的无氧呼吸；泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有温度、食盐用量和腌制时间等。

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