微生物的分离.培养和计数是现代生物工程应用中的重要环节．图为大肠杆菌分离和培养过程中部分操作示意图．请分析回答下列问题:(1)实验过程中对培养基.培养皿.实验操作者的双手所采用的灭菌.消毒方法依次是 . . ．(2)培养大肠杆菌时.在接种前需要检测培养基是否被污染．对于固体培养基应采用的检测方法是．(3)图示是利用法进行微生物接种.把聚集� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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微生物的分离、培养和计数是现代生物工程应用中的重要环节．图为大肠杆菌分离和培养过程中部分操作示意图．请分析回答下列问题：
（1）实验过程中对培养基、培养皿、实验操作者的双手所采用的灭菌、消毒方法依次是

、

．
（2）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染．对于固体培养基应采用的检测方法是

．
（3）图示是利用

法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步

分散到培养基的表面．在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线的原因是

．
（4）关于图示的操作方法和结果，叙述正确的是

．
A．操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌．
B．划线操作须在火焰上进行．
C．在5区域中才可以提到所需菌落．
D．在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌．
（5）若要培养具有耐高和耐酸特性的酵母菌，制备选择培养基时在基本培养的基础上，注意

和

，其目的是

．

考点：微生物的分离和培养

专题：

分析：1、无菌操作技术有消毒和灭菌，消毒有煮沸消毒法、巴氏消毒法和化学药剂消毒法，灭菌有灼烧灭菌法适用于接种工具、干热灭菌法适用于玻璃器皿和金属工具、高压蒸汽灭菌法适用于培养基及容器的灭菌．
2、接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，平板划线分离法：由接种环以菌操作沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落．
稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞．计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表一个细胞），再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内．

解答： 解：（1）无菌操作技术有消毒和灭菌，消毒有煮沸消毒法、巴氏消毒法和化学药剂消毒法，灭菌有灼烧灭菌法适用于接种工具、干热灭菌法适用于玻璃器皿和金属工具、高压蒸汽灭菌法适用于培养基及容器的灭菌．
（2）培养大肠杆菌时，检测培养基是否被污染的方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生．
（3）接种有平板划线法和稀释平板法，本题是后者，反复把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，可以实现对菌种的分离，在操作过程中灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线的原因是以免接种环温度太高杀死菌种；
（4）在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌主要是稀释作用；
（5）选择培养基的考查，根据菌种的特殊性制定培养基，使其他菌群不能在此生长，达到选择的目的，故制备选择培养基时在基本培养的基础上，注意添加高浓度蔗糖（葡萄糖）和调低pH，其目的是提供高糖和酸性的筛选环境．
故答案为：
（1）高压蒸汽灭菌  干热灭菌  化学消毒
（2）将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生
（3）平板划线   稀释    以免接种环温度太高，杀死菌种
（4）D
（5）添加高浓度蔗糖（葡萄糖）　调低pH　  提供高糖和酸性的筛选环境

点评：微生物这部分内容是高考试题的一个热点一般体现在对生物工程中的应用，考察的知识点有微生物的无菌操作、微生物的分离以及产品的提取，注意总结．

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