Question

【题目】为研究不同浓度灵芝多糖对体外培养的正常小鼠和肿瘤小鼠的巨噬细胞吞噬功能的影响，请利用以下材料完成相关实验

材料与用具：生长状况相似的健康小鼠若干只、小鼠肉瘤细胞、动物细胞培养液、鸡红细胞、用培养液配制的灵芝多糖溶液(低、中、高浓度)、显微镜、二氧化碳培养箱等。

说明：巨噬细胞可吞噬鸡红细胞，其吞噬功能可用吞噬率反映，即检査100个巨噬细胞中已发生吞噬作用的巨噬细胞数。获得巨噬细胞的方法和具体检测方法不作要求。)

（1）完善实验思路：

①将生长状况相同的健康小鼠随机分为2组，编号甲、乙。乙组小鼠注射一定量的小鼠肉瘤细胞，饲养一段时间后，选择肿瘤模型鼠。

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（2）分析与讨论

①巨噬细胞能通过细胞膜上的___________与异物结合，将异物吞入细胞内，形成吞噬泡后与细胞内的_____________融合而将异物消化分解。

②实际观察表明，时间过长会造成吞噬率下降，其原因是__________。

③研究发现本实验中的灵芝多糖溶液均可提高小鼠巨噬细胞的吞噬率，且浓度越高促进作用越强。请用柱形图表示正常小鼠组的实验结果。

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Answer 1

【答案】②取甲组小鼠的巨噬细胞平均分为4组，编号甲1至甲4(0.5分)；取乙组小鼠的巨噬细胞平均分为4组编号乙1至乙4；每组重复若干样品(0.5分)

③将等量不含灵芝多糖的培养液和含低、中、高浓度灵芝多糖的溶液分别加入甲1乙1、甲2乙2…甲4乙4样品中(0.5分)，分别在二氧化碳培养箱中培养一段时间(0.5分)。

④从每组培养液中取出等量的巨噬细胞，加入等量鸡红细胞，培养一定的时间后，制作临时装片(0.5分)，在显微镜下计数100个巨噬细胞中吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数，即为吞噬百分率(0.5分)。

⑤统计并分析数据 受体 溶酶体 被吞噬的鸡红细胞时间过长可被消化降解而观察不到吞噬现象

【解析】

该实验的实验目的是研究不同浓度的灵芝多糖对正常小鼠和肿瘤小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响。方法采用不同浓度的灵芝多糖体外培养正常小鼠和肿瘤小鼠巨噬细胞，吞噬鸡红细胞实验，制作临时装片，固定染色后置于显微镜下观察，计数正常小鼠和肿瘤小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞的数目，并计算吞噬率。

（1）①实验需探究不同浓度的灵芝多糖对正常小鼠和肿瘤小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响，根据实验所给材料，培养液配制的灵芝多糖溶液（低、中、高浓度），而因此一般正常小鼠和肿瘤小鼠的吞噬细胞各分为四组，分别取等量低、中、高浓度的灵芝多糖溶液加入到细胞培养瓶中，各另取一个培养瓶不加灵芝多糖，作为空白对照。将样品分别在二氧化碳培养箱中培养一段时间，从每组培养液中取出等量的巨噬细胞，加入等量鸡红细胞，培养一定时间后，制片，计数，计算吞噬率。因此在获得肿瘤模型鼠后的实验设计思路为：②取甲组小鼠的巨噬细胞平均分为4组，编号甲1至甲4；取乙组小鼠的巨噬细胞平均分为4组，编号乙1至乙4；每组重复若干样品。

③将等量不含灵芝多糖的培养液和含低、中、高浓度灵芝多糖的溶液分别加入甲1乙1、甲2乙2…甲4乙4样品中，分别在二氧化碳培养箱中培养一段时间。

④从每组培养液中取出等量的巨噬细胞，加入等量鸡红细胞，培养一定的时间后，制作临时装片，在显微镜下计数100个巨噬细胞中吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数，即为吞噬百分率。

（2）①巨噬细胞能通过细胞膜上的受体与异物结合，将异物吞入细胞内，形成吞噬泡被溶酶体消化分解。

②如果从每组培养液中取出等量的巨噬细胞，加入等量鸡红细胞后，培养一定时间后，镜下可见吞噬细胞核呈蓝色，被吞噬的鸡红细胞呈椭圆形，其胞浆呈红色而核被染成蓝色。若培养时间过长，被吞噬的鸡红细胞可被消化降解而观察不到吞噬现象。

③根据题意可知，灵芝多糖溶液均可提高小鼠巨噬细胞的吞噬率，且浓度越高促进作用越强。故横坐标为0、低、中、高三种浓度的灵芝多糖溶液，纵坐标为吞噬率，并且吞噬率依次增大。