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【题目】结肠癌是一种常见的消化道恶性肿瘤,在年轻人中的发生率呈上升趋势。白藜芦醇对结肠癌有一定的治疗作用,为探究其机制,做了相关研究。

1 )细胞发生癌变的根本原因的____________的突变,因其具有____________的特点,是癌症较难治愈的部分原因。

2)为研究白藜芦醇对结肠癌H116细胞的作用机理,将H116细胞分别用不同浓度白藜芦醇处理,置于____________恒温培养箱中培养244872小时后检测细胞增殖情况,如图所示:

结果表明____________________________________

3)为探究白藜芦醇的作用机理,用流式细胞仪分析不同浓度白藜芦醇处理的H116细胞的细胞周期,结果如下表:

日期白藜芦醇浓度(μM

0

20

80

100

G1

4981

7804

8274

8434

S

3899

1861

848

848

G2

1120

335

878

878

结果表明,与对照组相比,白藜芦醇的作用是使细胞停留在__________期,其机理是____________

4)进一步研究发现,Akt对于细胞增殖具有重要作用,用不同浓度的白藜芦醇处理H116细胞,检测细胞中Akt和磷酸化的Akt表达量,如图2所示,推测白藜芦醇的作用是_______________________

注:细胞中GAPDH表达量丰富且稳定,在实验中可作为标准参照。

5 )综合(2 )、( 3 )、( 4 )实验结果推测,白藜芦醇治疗结肠癌的机理是___________________

【答案】原癌基因(或抑癌基因) 无限增殖;糖蛋白减少,易转移 CO2 随着白藜芦醇浓度的升高,培养时间的延长,白藜芦醇对结肠癌H116细胞的抑制作用越强。 G1 抑制结肠癌H116细胞的DNA复制,抑制细胞的增殖。 促进Akt磷酸化,从而影响细胞增殖 促进Akt磷酸化,使细胞停留在在G1期,抑制DNA复制,抑制癌细胞增殖

【解析】

本题考查学生对探究实验的设计能力,设计实验时,要注意单一变量原则和对照原则。一定要理清题目中的自变量和因变量。从图中可以看出自变量为白藜芦醇的浓度和培养时间,因变量为结肠癌H116细胞相对增长速率。

1)细胞癌变是在致癌因子的作用下原癌基因和抑癌基因发生突变,使细胞发生转化而引起癌变。癌细胞的主要特征有:无限增殖;形态结构发生显著改变;细胞表面发生变化,细胞膜上的糖蛋白等物质减少,易转移。

2)培养动物细胞应置于CO2恒温培养箱中培养。分析实验结果可知:随着白藜芦醇浓度的升高,培养时间的延长,白藜芦醇对结肠癌H116细胞的抑制作用越强。

3)分析表格数据可知,与对照组相比,白藜芦醇可以使G1期细胞明显增多,且白藜芦醇浓度越大,G1期细胞所占比例越大,故可推测白藜芦醇的作用机理是抑制结肠癌H116细胞的DNA复制,从而抑制细胞的增殖。

4)据图2结果分析可知,白藜芦醇可以促进Akt磷酸化,从而影响细胞增殖。

5)综合(2)、(3)、(4)实验结果推测,白藜芦醇治疗结肠癌的机理是促进Akt磷酸化,使细胞停留在在G1期,抑制DNA复制,抑制癌细胞增殖。

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3)若用 Sau3AⅠ切图中所示的质粒(多个),最多可能获得_____________种大小不同的 DNA 片段。

4)步骤获得的重组质粒通过农杆菌转入马铃薯的原生质体,并诱导形成细胞壁,再转入_________ A、细胞分裂素多,生长素少 B、细胞分裂素少,生长素多 C、细胞分裂素和生长素比例适合 D、细胞分裂素中等,生长素少)的培养基中培养,形成__,再进行生根培养,获得转基因马铃薯。

5)可用__的方法,从个体水平检测马铃薯植株中 PVYCP 基因是否成功表达。

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