Question

已知某质粒上有2种限制性核酸内切酶的酶切位点，且两种酶的识别序列不同，如图所示．若在多个该质粒中，加入限制酶Ⅰ、限制酶Ⅱ和DNA连接酶，得到的质粒碱基数目最少为（　　）

• A、50
• B、80
• C、100
• D、250

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．
DNA连接酶能够将两个相同的黏性末端或平末端之间的磷酸二酯键连接．

解答： 解：分析图解可知，限制酶Ⅰ在该质粒上有三个限制酶切点，限制酶Ⅱ在该质粒上只有一个酶切位点，如果同时用两种限制酶切割，质粒将会切割形成四种片段，即200（酶Ⅰ和酶Ⅱ切割，黏性末端不同）、200（酶Ⅰ切割，黏性末端相同）、80（酶Ⅰ切割，黏性末端相同）、50（酶Ⅰ和酶Ⅱ切割，黏性末端不同）．
用DNA连接酶处理，要求得到的质粒碱基数目最少，则为形成的片段自身连接，要求具有相同的黏性末端，因此得到的质粒碱基数目最少为80个．
故选：B．

点评：本题考查了基因工程的有关知识，要求考生能够掌握限制酶和DNA连接酶的作用特点；能够结合题意和图解判断切割形成的片段类型；再根据DNA连接酶的作用特点进行判断，难度适中，属于考纲中理解、应用层次的考查．