Question

【题目】基因工程制药是制药行业的一支新军，不仅具有独特的优势，发展速度也很快，下图是应用基因工程构建疱疹病毒亚单位疫苗的方法，请根据图示回答下列问题：

（1）提取单纯疱疹病毒DNA后用__________酶切取___________基因作为目的基因，获取目的基因后，要用__________对其进行扩增。

（2）首先，要已知目的基因的_______________，以便人工合成引物。将过量的引物与目的基因混合，加热到_____℃，使双链DNA解旋成单链，之后冷却到55-60℃，引物与DNA单链结合，下一步，加入_________和4种脱氧核苷酸，升高温度至70-75℃后，完成互补链的合成，如此重复循环多次，直到产生足够供实验用的目的基因。

（3）提取并剪切牛痘DNA，使其与目的基因连接成重组DNA后，在___________中培养一段时间后，分离出无害的病毒（疫苗），它含有与______________相同的外壳。

（4）将分离出的疫苗注射到人体内，激活人体的______________免疫，产生抗体和记忆细胞。

Answer 1

【答案】 限制酶 外壳蛋白 PCR技术 一段核苷酸序列 90—95 Taq酶 活细胞 单纯疱疹病毒 体液

【解析】试题分析：本题考查基因工程、PCR技术等相关知识，解答本题关键是能识记基因工程的基本步骤，理解PCR技术的原理，再结合题意，就能准确作答。

（1）据题干信息可知，利用疱疹病毒的蛋白质外壳制成疫苗，所以要获得控制合成疱疹病毒蛋白质外壳的基因，即为本实验的目的基因，常利用特定的限制酶进行切割疱疹病毒DNA可以获取目的基因；如果需要大量的目的基因，则可以通过PCR技术进行扩增。

（2）PCR技术可在体外大量扩增目的基因，该技术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物，PCR反应中温度呈现周期性变化，其中加热到90～95℃使是双链DNA解聚为单链，然后冷却到55-60℃使引物与互补DNA链结合，在加入热稳定性DNA聚合酶和合成DNA的原料，即4种脱氧核苷酸；继续加热到70～75℃，目的是在DNA聚合酶作用下进行延伸。

（3）提取并剪切牛痘DNA，使其与目的基因连接成重组DNA，通过显微注射法将含有牛痘DNA的表达载体导入到牛的活细胞中，经过一段时间培养后，可获得与疱疹病毒相同的外壳。

（4）疫苗注射到人体内后，机体会产生特异性免疫，在特异性免疫中能产生抗体的只有体液免疫过程。